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秀丽隐杆线虫在生态毒理学评价中应用研究进展
随着全球工业的飞速发展,工业废弃物的排放、农药和重金属制品的使用不断增多,导致了重金属、有机物等污染物在环境中的富集.这些污染物通过各种途径终会影响生态系统的生物多样性和人类的健康.因此,近年来国内外学者越来越关注污染物对生态系统的破坏和对生物的毒害作用及其作用机制,逐渐筛选出一些操作简单、成本低廉、测试周期较短的生物指示物和模式生物进行污染物的检测和评价,例如线虫、斑马鱼、大型蚤、蚯蚓等.
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HSPA1A启动子荧光素酶报告基因HepG2细胞体系在评价焦炉逸散物毒性中的应用
目的 探讨利用含HSPA1A(HSP70-1)启动子荧光素酶报告基因质粒的稳定转染HepG2/HSPA1A细胞评价焦炉逸散物毒性的可行性.方法 构建含HSPA1A启动子的pGL4.17/HSPA1A重组质粒并转染人HepG2细胞,建立稳定细胞株HepG2/HSPA1A.用不同浓度的炉底、炉侧和炉顶焦炉逸散物染毒HepG2/HSPA 1A细胞24h,分别测定细胞的相对荧光素酶活力、存活率、丙二醛(MDA)含量、Olive尾距和微核率.结果 与对照组相比,炉底焦炉逸散物染毒组细胞的相对荧光素酶活力明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).且在0.15 μg/L时,细胞的相对荧光素酶活力高,为对照组的1.4倍.细胞的相对荧光素酶活力分别随着炉侧和炉顶焦炉逸散物浓度的增加而逐渐增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).且在高浓度时(65.4 μg/L,202 μg/L)细胞的相对荧光素酶活力分别为对照组的2.1和5.3倍.仅炉底焦炉逸散物染毒后细胞的相对荧光素酶活力与MDA浓度呈正相关,差异有统计学意义(r=0.404,P＜0.05).炉底、炉侧和炉顶焦炉逸散物染毒后,HepG2/HSPA1A细胞的相对荧光素酶活力均与Olive尾距、微核率呈正相关(r尾距分别为0.476、0.940、0.788,r微核率分别为0.580、0.649、0.432),P＜0.05.结论 HepG2/HSPA1A细胞的相对荧光素酶活力可以敏感地反映焦炉逸散物的毒性效应,该细胞可用于快速评估职业环境复合污染物的综合毒性效应.
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肝脏谷胱甘肽的高效液相色谱法测定
谷胱甘肽为一广泛存在于细胞内的小分子三肽化合物,其还原型(GSH)与氧化型(GSSG)在相关酶作用下可相互转换而构成细胞内重要的氧化还原缓冲对,在毒物代谢、拮抗脂质过氧化损伤过程中发挥重要作用,并参与维持蛋白质结构和功能、氨基酸转运、糖代谢、细胞信号传导调控等多种生理过程,是卫生毒理、职业临床、肿瘤、心脑再灌注损伤等研究中的重要参数[1],对化合物毒性评估、中毒机制的探讨可提供重要的信息 [2].高效液相色谱(HPLC)具有灵敏性高、专一性强等特点,可同时检测GSH、GSSG, 但国内未见采用,现介绍如下.
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应用高内涵分析技术进行药物肝毒性风险评估的研究
目的：研究尝试应用高内涵分析技术建立药物肝毒性高内涵毒性评价指数测定的标准方法。方法采用 ToxInsight 药物肝毒性检测试剂盒，利用对多靶点的特异性染色，结合高内涵活细胞成像分析平台考察4种药物对人源性肝癌细胞 HepG2的细胞毒性作用，包括对该细胞的细胞数、核 DNA 含量、细胞质内谷胱甘肽降低水平、活性氧水平、线粒体膜电位的改变等5个指标进行综合分析，拟对受试样品的肝毒性进行评估。结果氟西汀和罗格列酮的肝毒性评估结果为阴性；甲芬那酸和噻氯匹定的肝毒性评估结果为阳性，提示具有肝毒性风险，且甲芬那酸的肝毒性风险比噻氯匹定的高。结论应用高内涵分析技术评估药物肝毒性的方法基于活细胞、多参数、实时、高通量，能够实现药物多种生物活性、毒性的早期、快速检测，并且灵敏稳定，简便可行，可尝试用于对药物进行体外肝毒性的安全风险评估。
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关于流感病毒毒性评估
病毒在人群中的流行速度或病毒在人群传播过程中所显示的毒力主要反应出人群的遗传异质性.当一个病毒性疾病在不同亚群之间的发病率和死亡率不表现出明显差异时,该病毒的毒力可能十分强大.相反,当这些差异存在时,则其毒力较低;差异种类越多,差异程度越大,则毒力越小.
关键词： 甲型H1N1流感病毒 病毒毒性 毒性评估 -
热休克蛋白基因启动子报告基因技术评估环境污染物毒性作用的研究进展
热休克蛋白是细胞受应激原(高温、重金属和化学毒物等)刺激后诱导产生的一种应激蛋白,在进化上高度保守并具有多种与应激相关的生物学功能.报告基因是一种编码某种易于检测的蛋白质或酶的基因,通过它的表达产物来标定目的基因的表达调控.由于报告基因技术和应激基因调控的报告基因细胞系统的构建日趋成熟,热休克蛋白基因启动子调控的报告基因检测技术在医疗卫生领域的应用也越来越广泛,本文主要综述其在环境污染物毒性评估中的研究现状与进展.
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秀丽隐杆线虫在化学品毒性评估中的研究进展
化学品毒性评估的传统经典方法是啮齿类动物毒性实验。随着世界各地新化学品的合成数量增多，传统的毒性检测评估模式和测试速度已经远远不能满足市场和人群的健康需求。模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)因其独特的生物学优势正逐渐地被应用到化学品的毒性评估研究中。本文将从秀丽隐杆线虫的生物学优势、化学品毒性评估时线虫基因型的选择、染毒方式、评估指标、高通量筛选技术等方面进行综述，并简要介绍线虫毒性评估的研究专利。后，对秀丽隐杆线虫的化学品毒性评估应用前景进行讨论和展望。
