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清利冲剂抗尿道致病性大肠杆菌的实验研究
目的:观察清利冲剂对尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichi Coli,UEC)在人尿道上皮细胞的粘附效应及对其P菌毛表达的影响.方法:采用体内外实验,观察经清利冲剂处理后人尿道上皮细胞细菌粘附的数量.透射电镜下观察细菌的形态和P菌毛.结果:经清利冲剂处理后尿道上皮细胞上UEC明显减少(P＜0.01),P菌毛表达被抑制.结论:清利冲剂通过抑制P菌毛的表达,阻止UEC对人尿道上皮细胞的粘附而起到治疗尿路感染的作用.
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018 Ox-LDL对内皮细胞粘附分子表达及粘附功能影响的研究
目的: 大量的研究已证明高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素, 血脂异常可引起血管内皮细胞和血细胞的功能改变. 近年来的研究发现, 其中氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)起主要作用. 故尔观测Ox-LDL对血管内皮细胞粘附分子ICAM-1、 VCAM-1、 P-selectin表达和粘附作用的影响. 方法: 本研究采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作研究载体, 采用单核细胞系U937细胞观测Ox-LDL对内皮细胞(EC)粘附功能的影响, 采用免疫组化ABC法和ELISA二种方法观测Ox-LDL(100 μg/ml和200 μg/ml二种浓度)对EC上粘附分子ICAM-1、 VCAM-1和P-selectin表达的影响. 以计数法观测Ox-LDL对EC粘附功能的影响. 结果: 以ABC法测定ICAM-1的阳性表达率(%)如下: 100 μg/ml为60.8±11.5, 200 μg/ml为67.2±7.6, TNF-α(250 U/ml)为88.2±11.5, 未加任何刺激剂的对照组为37.9±5.6. 结果表明: 以Ox-LDL处理的HUVEC ICAM-1阳性表达率显著高于对照组. 以ELISA法测定的结果(以OD值表示)是100 μg/ml为1.424±0.361, 200 μg/ml为1.612±0.402, TNF-α为1.965±0.420, 对照组为1.330±0.320, 此结果同样表明Ox-LDL显著增加HUVEC上ICAM-1的表达. 以上二种方法均未观测到Ox-LDL对HUVEC上VCAM-1和P-selectin表达的影响. 粘附实验的结果显示: 浓度为100 μg/ml的Ox-LDL能显著增强U937细胞与HUVEC的粘附率(%), 实验组为20.22±8.29, 对照组为6.19±4.09, 二者差异非常显著(P<0.01). 结论: 本研究测定结果表明Ox-LDL确有促EC活化, 增加其表面粘附分子表达, 增强EC与白细胞(特别是单核细胞)的粘附作用, 促进动脉粥样硬化形成的作用.
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黄连解毒汤含药血清对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响
目的:探讨黄连解毒汤含药血清对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响.方法:以黄连解毒汤连续灌服大鼠3 d,每天2次,每次生药0.3 g/100 g大鼠,末次给药后分别于0.5、1、1.5、2、2.5 h取血制备含药血清.对照血清以生理盐水灌服后同法制备.以常规制备的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)单层细胞与中性粒细胞粘附为模型,各时段血清均以20%、10%、5%及2.5%浓度处理HUVEC 24 h,用MTT法观察其对HUVEC的毒性作用(以细胞死亡率表示);在此基础上,以对HUVEC无毒性作用浓度的含药血清处理HUVEC 24 h后,加入中性粒细胞(5×106/mL)粘附30 min,计算细胞粘附率.结果:各时段含药血清的细胞死亡率均随着浓度的降低而降低,但均高于对照组,其中仅5%和2.5%浓度的细胞死亡率与对照组相接近,无显著差异.故各时段均选用5%和2.5%浓度进行细胞粘附实验.实验发现0.5 h和2 h时段在5%浓度时,能明显降低细胞粘附率(P＜0.01).结论:①大鼠黄连解毒汤含药血清对HUVEC有一定毒性;②在连续多次灌胃后不同时段所取的含药血清中仅0.5 h和2 h时段,并在5%浓度时既对HUVEC无明显毒性,又能对细胞粘附有明显抑制作用;③黄连解毒汤含药血清能抑制中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附,这可能是黄连解毒汤抗炎免疫作用的机制之一.其有效作用成分及在抑制细胞粘附过程中的分子作用机制还有待于进一步研究.
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基因转染 CLD1对大肠癌细胞株 SW480粘附作用的影响
目的：探讨基因转染CLD1对大肠癌细胞株SW480粘附作用的影响。方法对SW480 CLD1（转染CLD1的SW480细胞株）、SW480 control （转染了pEGFP-C1的SW480细胞株）、SW480细胞株分别进行细胞同质粘附实验和细胞异质粘附实验。结果细胞同质粘附实验结果显示SW480CLD1细胞粘附细胞数量少于SW480 control （ P＝0.000）和SW480细胞（ P＝0.000），SW480 control的粘附细胞数与SW480无差异（ P＝0.376），粘附细胞数顺序为SW480CLD1＜SW480control和SW480。异质粘附实验的结果显示SW480CLD1粘附细胞数多于SW480control（P＝0.000）和SW480（P＝0.000），差异有统计学意义。 SW480control和SW480粘附细胞数无显著差异（P＝0.334）。粘附细胞数顺序为 SW480CLD1＞SW480control和 SW480。结论 CLD1基因转染后可减少SW480细胞之间的同质粘附作用，增加SW480细胞与Ⅳ型胶原的粘附性。
关键词： 大肠癌 CLD1(claudin-1) 基因转染 粘附实验
