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硫酸铟急性毒性和致突变作用研究
铟是一种稀有金属元素,属于第ⅢA族.铟及其化合物被广泛地应用于航空航天、原子能工业及医学等领域.
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硫酸铟对大鼠肾脏的损害作用
目的 探讨硫酸铟亚慢性经口染毒对大鼠的肾脏损害作用.方法 选取4周龄SPF级雄性Wistar大鼠32只,随机分成对照组(生理盐水)、硫酸铟低剂量组(52.3 mg/kg)、中剂量组(104.6 mg/kg)和高剂量组(261.4 mg/kg),每组8只.采用灌胃方式进行染毒,1次/天,5天/周,连续染毒8周,染毒结束后收集24 h尿液;次日处死前称重,并收集血液和肾脏.采用试剂盒测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(ALB)、总抗氧化能力(T-AOC),以及肾组织微量还原型谷胱甘肽(GSH)含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和尿液中β2-微球蛋白(β2-MG)含量;采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定血液、尿液和肾组织中的铟含量;采用HE染色对肾组织进行病理形态学观察.结果 实验期间,各组大鼠一般状况正常,体重稳定增长,在染毒第7周和第8周时,高剂量染毒组大鼠体重明显低于对照组(P＜0.05).与对照组比较[(1.27±0.55)、(0.40±0.01)和(0.30±0.06) μg/L],3个剂量组大鼠血铟[(44.10±23.10)、(52.08±21.03)和(67.42±45.98) μg/L]、尿铟[(0.72±0.13)、(2.75±0.15)和(4.31±0.33) μg/L]和肾铟含量[(1.36±0.83)、(1.52±0.49)和(2.87±0.20) μg/g]均显著升高(P＜0.05);高剂量染毒组大鼠血清中Cr明显高于对照组[(66.06±18.62) μmol/L和(46.53±7.95)μmol/L,P＜0.05],高剂量组和中剂量组大鼠血清BUN含量[(3.98±0.82) mmol/L和(4.09±0.71)mmol/L]明显低于对照组[(4.77±0.49) mmol/L,P＜0.05];3个剂量组血清和尿液中β2-MG水平较对照组均明显升高(P＜0.05);3个剂量组大鼠血清T-AOC水平[(4.87±2.36)、(4.50±2.33)和(4.00±3.29) U/mL]和肾组织GSH水平[(6.41±1.86)、(5.06±2.09)和(2.77±2.64) μmol/(g prot)]均明显低于对照组[(15.20±5.43) U/mL和(14.74±6.47) μmol/(g prot),P＜0.05];中、高剂量染毒组与对照组比较有明显的炎症性病理改变,主要表现为肾小球肿胀、肾小管结构异常和炎性细胞浸润等.结论 硫酸铟灌胃染毒会引起大鼠肾脏铟的蓄积、发生氧化损伤、病理改变以及功能障碍等.
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硫酸铟对雄性大鼠生殖毒性的实验研究
为探讨硫酸铟对雄性大鼠的生殖毒性效应,将32只健康SPF级雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照(生理盐水)组和52.30、104.60、261.40 mg/kg硫酸铟染毒组,每组8只.采用灌胃方式进行染毒,每天1次,每周5次,连续染毒8周.检测大鼠血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度及附睾精子数量、精子存活率和精子畸形率.结果显示,与对照组相比,仅261.40 mg/kg硫酸铟染毒组大鼠的睾丸、附睾重量及其脏器系数均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着硫酸铟染毒剂量的升高,大鼠的睾丸、附睾重量及其脏器系数均呈下降趋势.与对照组比较,104.60、261.4 mg/kg硫酸铟染毒组大鼠的血清T水平均降低,而261.4 mg/kg硫酸铟染毒组大鼠的血清FSH水平较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);各剂量硫酸铟染毒组大鼠的血清LH水平均无明显变化.提示硫酸铟对雄性大鼠具有生殖毒性.
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硫酸铟对V79细胞氧化损伤及VitC拮抗作用体外研究
目的 观察硫酸铟对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79)的氧化损伤及维生素C的修复作用.方法 以体外培养的V79细胞为研究对象,四氮唑蓝比色分析法(MTT法)观察不同染毒剂量(0.5、1、2、4、8 mmol/L硫酸铟)和不同染毒时间(2、6、12、24 h)的细胞毒性;应用生化方法检测经铟染毒的细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)含量及维生素C(VitC)的修复作用.结果 当硫酸铟浓度≥1 mmol/L时,各染毒组细胞吸光度值与对照组比较降低,差异有统计学意义(P<0.05).随着硫酸铟浓度增高,SOD活力降低,MDA含量增加;随着VitC浓度的增加,SOD活力升高,MDA含量减少,但当VitC浓度增至500 μmol/L时,V79细胞的SOD活力反而下降,MDA含量增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 硫酸铟对V79细胞的损伤可能与细胞氧化应激增强有关,低浓度VitC(20、100 μmol/L)对该损伤有拮抗作用.
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硫酸铟对L929细胞周期及细胞凋亡的影响
目的 探讨硫酸铟对小鼠成纤维细胞(L929)细胞周期和细胞凋亡的影响.方法 用四氮唑蓝比色法(MTT),检测L929的存活情况；采用流式细胞仪检测硫酸铟对L929细胞周期、细胞凋亡(染毒浓度分别为1.5、3.0、4.5 mmol/L,染毒时间为24 h)的影响.结果 硫酸铟可改变L929细胞周期及细胞凋亡率.细胞周期表现为S期细胞增多,而处于Gl期的细胞减少,提示硫酸铟可能具有影响L929细胞周期的作用,进而抑制细胞增殖；硫酸铟可增加细胞凋亡率.结论 硫酸铟可引起L929细胞毒性,细胞存活率呈浓度-时间依赖性下降；硫酸铟可影响细胞周期和诱导细胞凋亡.
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硫酸铟对V79细胞DNA损伤作用的彗星实验
目的 观察硫酸铟对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79)的DNA损伤作用.方法以体外培养的V79细胞为研究对象,四氮唑蓝比色分析法(MTT法)观察不同染毒浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L硫酸铟)和不同染毒时间(2、6、12、24 h)的细胞毒性;应用彗星实验(单细胞凝胶电泳技术)检测经不同浓度的硫酸铟染毒不同时间后对V79细胞DNA的损伤作用.结果 当硫酸铟浓度≥0.5 mmol/L时,各染毒组细胞存活率与对照组比较降低,差异有统计学意义(P<0.05).各染毒组拖尾率与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且随着硫酸铟浓度的增加,呈上升趋势; Tail DNA%,尾长,Olive尾矩随染毒剂量增大而增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 硫酸铟可以引起V79细胞急性毒性,细胞存活率呈浓度-时间依赖性下降.硫酸铟对V79细胞的DNA有损伤作用,且有明显的剂量-效应关系.
关键词： 硫酸铟 MTT实验 彗星实验(单细胞凝胶电泳) DNA损伤 V79细胞 -
硫酸铟经皮染毒致豚鼠亚慢性毒性作用
铟是一种稀有金属元素,与铊同属一族.尽管目前铟及其化合物职业中毒报告较少,但资料表明,可溶性铟盐对人和动物有毒[1].
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硫酸铟急性及亚急性毒性试验研究
硫酸铟是铟冶炼作业过程中工人接触的主要职业危害因素之一.为保护职业接触人群的健康,我们对硫酸铟的急性及亚急性毒性进行了试验研究.
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硫酸铟生殖毒性的研究
采用常规致畸实验方法,给予妊娠大鼠432.80 mg/kg、135.25 mg/kg、43.28 mg/kg(1/5～1/50 LD50)硫酸铟经口灌胃染毒,以探讨硫酸铟的致畸效应以及其对雌性大鼠的生殖毒性作用.结果染毒组孕鼠孕末增重明显降低,吸收胎数均显著高于对照组,存活胎仔仅见个别有卷尾、波状肋、少肋等,未见到腭裂、脑外露、器官缺失等典型畸变;各染毒组成形胎仔的生长发育与对照组比较差异无统计学意义.提示硫酸铟具有明显早期胚胎毒性作用,可导致早期胚胎大量死亡并形成吸收胎.其致畸作用及对成形胎仔的生长发育影响并不明显.
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硫酸铟对小鼠成纤维细胞毒性作用的研究
[目的]了解硫酸铟对小鼠成纤维细胞( L929)的细胞毒性、DNA损伤及活性氧含量的影响. [方法]以体外培养的L929细胞为研究对象,采用四氮唑盐比色分析法(MTT法)观察不同染毒浓度(1、2、4、8mmol/L硫酸铟)在不同时间段(2、24、48h)染毒对L929细胞的毒性作用；采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测在2h作用下,不同浓度(1、2、4 mmol/L硫酸铟)染毒致DNA损伤的情况及活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化. [结果]硫酸铟对L929细胞生长具有抑制作用,在各个浓度及时间段内光密度值随染毒浓度增加及染毒时间延长而降低,阴性组与染毒组差异有统计学意义(P＜O.05).单细胞凝胶电泳结果显示,彗星拖尾率、彗尾DNA％、尾长、Olive尾矩随染毒浓度增加而增加,阴性组与染毒组之间的差异有统计学意义(P＜0.05),且ROS含量随染毒浓度增加表现递增. [结论]本实验条件下,硫酸铟能够明显抑制L929细胞增殖,存在明显的剂量-效应关系和时间-效应关系,并在短时间内能够引起DNA单链断裂及ROS含量增多.
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硫酸铟对V79细胞内活性氧和线粒体膜电位的影响
[目的]观察硫酸铟对中国仓鼠肺纤维细胞(V79细胞)内活性氧(ROS)和线粒体膜电位的影响.[方法]不同浓度硫酸铟(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)染毒体外培养的V79细胞,MTT法检测细胞存活率；以2',7'-荧光素乙二酯和碘化四氯代四乙基苯咪唑羰花青为探针,采用流武细胞术,检测经不同浓度硫酸铟染毒12h后V79细胞内ROS和线粒体膜电位的水平. [结果]硫酸铟能明显降低V79细胞的存活率；不同浓度硫酸铟作用于V79细胞12h后,细胞内的平均荧光强度从21.60增加到31.10,线粒体膜电位从0.191 3降低到0.1090,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05). [结论]硫酸铟能增加V79细胞内ROS的释放、降低线粒体膜电位,影响细胞的正常代谢功能,对细胞造成损伤.
