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杀白细胞毒素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的四环素耐药基因的检测
随着抗生素的大量广泛应用,近年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)已经成为医院感染中常见的病原菌,MRSA具有多重耐药特征,常表现为对β-内酰胺类、四环素类等多种抗生素同时耐药,给临床治疗带来困难.为进一步探讨MRSA对四环素类抗菌药物的耐药机制与MRSA的致病因子杀白细胞毒素(PVL)产生情况及其关系,对45株MRSA进行了四环素耐药相关基因tetM和PVL基因的检测,结果报告如下.
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大肠杆菌菌株四环素耐药基因 PCR 检测方法的建立
近年来,由于抗生素的滥用,耐药细菌不断增多,耐药范围扩大,程度加强,不断出现多重耐药菌株。研究表明,细菌在抗生素的选择性压力下,获取外源性的耐药基因是常用、有效的抵抗抗生素的方式。因此,调查耐药基因在大肠杆菌中的流行以及耐药特征具有十分重要的意义。目前,国内外研究细菌耐药机理和耐药性相关基因已经发展到分子水平。分子生物学检测方法正越来越受到人们的关注,PCR 技术就是其中之一,它具有操作简便、快速、结果直观、特异性强、敏感性高、重复性好、稳定性好等优点,能实现多重反应,自动化程度高,可同时检测大量样品。目前这一技术已经被广泛用于临床致病菌、动物感染和食品微生物的检测上。
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香港海鸥型菌四环素耐药性及其耐药分子机制研究
目的:了解香港海鸥型菌分离株对四环素的耐药性及四环素耐药基因的分布情况.方法:采集草鱼和青蛙的肠道标本,用选择性培养基分离、生化鉴定和16SrRNA基因鉴定的方法分离出香港海鸥型菌.用纸片扩散法对香港海鸥型菌分离株进行四环素类抗生素的耐药性测定,用PCR方法检测四环素耐药株中5种四环素耐药基因的携带情况,并将检测阳性的PCR产物进行序列测定.结果:从614份肠道标本中共分离出157株香港海鸥型菌,其中鱼分离株82株,蛙分离株75株,鱼和蛙的分离率分别为18.51％和43.86％.5株四环素耐药株均来自蛙分离株,其中有2株检测出四环素耐药基因tetA及其阻遏基因tetR,其他四环素耐药基因则未检出.tetA基因的氨基酸序列与已报道的香港海鸥型菌的TetA蛋白同源性为100％.结论:不同宿主的香港海鸥型茵对四环素的耐药性存在显著差异.该菌携带的四环素耐药基因以tetA为主,某些耐药菌株的耐药机制仍然未知.
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猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析
本研究对16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%.对四环素耐药基因tetC进行PCR扩增,结果在12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率;序列分析结果表明tetC的核苷酸同源率较高,达97.7%～98.7%,建立tetC基因的PCR检测技术,为沙门氏菌对四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径.
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致病性猪沙门菌四环素耐药基因tetB的PCR检测
目的 检测临床分离猪源致病性沙门菌四环索的耐药基因,确定沙门菌四环素耐药基因类型.方法 用KB法测定分离株对四环素等21种抗生素的耐药情况,用PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG及tetK,并对扩增产物进行测序.结果 临床分离株全部对四环素耐药,33株沙门菌中有29株扩增出tetB特异性片段,基因序列与参考菌的同源性为99%,tetB检测与药敏试验阳性符合率为87.9%.结论 tetB的PCR检测对四环素耐药性具有较高的特异性,tetB基因是决定本试验中临床分离株四环索耐药的主要基因,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了依据.
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多重PCR技术检测沙门菌两种四环素耐药基因
应用两对特异性引物同时检测四环素耐药基因tetB和tetC.通过对35株沙门菌分离株的四环素耐药性检测,表明所有沙门菌分离株均含tetC基因,与药敏试验结果阳性符合率65.7%,8株同时含有tetB基因,与药敏试验结果阳性符合率100%,tetB基因和tetC基因双阳性的菌株与药敏试验结果阳性符合率也为100%.取其中部分菌株扩增出tetB和tetC基因片段进行序列分析,5株菌的tetB基因扩增产物序列完全相同,与质粒pRT11相应序列同源性达99.7%;14株菌的tetC基因扩增产物与质粒pBR322中的相应序列同源性为100%.证实沙门菌耐药基因普遍存在,且同时含有tetB和tetC基因的菌株表现耐药.多重PCR技术同时检测两种四环素耐药基因,适合大量样本的检测,对开展沙门菌四环素多种耐药基因的分子流行病学监测提供了有效途径.
