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高糖培养液对L-929细胞的增殖和IL-6表达的影响
糖尿病是以高血糖为特征的代谢紊乱综合征,也是全球发病率高的疾病之一[1].血糖升高是糖尿病一切病理生理变化的基础,是糖尿病各种并发症的总根源[2].有研究表明糖尿病患者其血糖升高,伴随着唾液内以及龈沟液内高糖,同时其牙周病发病率为非糖尿病患者的1倍,牙周病被认为是糖尿病的第6大并发症[3-4].本研究用不同糖浓度的培养液培养小鼠成纤维细胞( L-929),模拟临床糖尿病患者牙周组织浸泡在细胞外液高糖状态,检测高糖环境对L-929的细胞增殖、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响,探讨高糖诱发牙周疾病的原因.
关键词： 小鼠成纤维细胞L-929 高糖浓度 增殖 白介素-6 -
高糖对大鼠肾小球系膜细胞分泌t-PA及PAI-1的实验影响
目的:本研究观察大鼠肾小球系膜细胞(MC)在不同环境条件培养下,其增殖、分泌t-PA及PAI-1的影响,寻找较合适的培养条件,为体外研究纤溶系统的调节机制提供模型和摸索合适的条件.方法:在本实验中以MTT比色法观察了在不同的糖浓度下大鼠肾小球系膜细胞的增殖状况.其它的实验部份包括:①以不同浓度的葡萄糖液(5,10,20,30mmol/L)培养MC24,48,72及168小时(即一周).②以不同浓度的胎牛血清(FBS)(5,10,20,25%)培养MC24,48,72及168小时.以上培养物的上清液内PAI-1和t-PA的含量以ELISA法测定.结果:①高糖对MC增殖有害,即有抗增殖作用.②高糖刺激MC分泌PAI-1,其含量持续升高,维持一周,而t-PA量则在一周培养后有所下降.③增加FBS的浓度可促进PAI-1的分泌(r=0.813)至降低t-PA,以20%的浓度量为合适.④如上②所述:高糖条件下MC释放PAI-1显示随时间依赖式增加,72小时达高峰,并至少在一周内维持较高的水平,而t-PA则在培养到一周时发生变化(下降).结论:在实验室中,高糖对MC增殖有抑制作用而增加了PAI-1的表达,由此对细胞外基质(ECM)的降解亦有抑制.
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高糖和甘露聚糖结合凝集素激活补体途径对人肾小球内皮细胞TGF-β1表达及NF-κB活性的影响
目的 观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)激活补体凝集素途径(LCP)对人肾小球内皮细胞(HRGECs)转化生子因子-β1(TGF-β1)表达和核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法 体外培养HRGECs,根据不同体外干预条件,随机分为5组:正常糖对照组,正常糖+ MBL组,高糖组,高糖+MBL组以及抗MBL组.采用流式细胞计数检测HRGECs表面LCP相关信号通路蛋白MBL和C3的表达；实时荧光定量RCR和ELISA法分别检测HRGECs中TGF-β1mRNA表达及其上清液中蛋白浓度,凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测细胞核内NF-κB的活性.结果 ①高糖+MBL组HRGECs表面MBL、C3及MBL+ C3蛋白沉积高于正常糖+MBL组、高糖组(P＜0.05)；而对高糖+ MBL组进行抗MBL干预后,HRGECs表面MBL、C3及MBL+ C3蛋白沉积明显减少(P＜0.05).②高糖+ MBL组的TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于正常糖+MBL组和高糖组（P均＜0.05）；进行抗MBL干预后,其TGF-β1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.05).③高糖+MBL组可见NF-κB活性明显增强,且高于正常糖+ MBL组和高糖组(P＜0.05)；抗MBL干预后,其NF-κB活性明显减弱(P＜0.05).结论 高糖和MBL可能通过激活LCP使人肾小球内皮细胞TGF-β1核酸表达及蛋白释放增加,并导致细胞内NF-κB活性明显增强；抗MBL干预可阻断LCP激活,下调TGF-β1核酸及蛋白表达,抑制NF-κB激活.
