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应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术分析镉中毒大鼠尿液蛋白质组学变化
多年来,镉引起的健康危害受到高度关注,特别是长期接触镉引起的毒性效应已成为当今研究的重点.表面增强激光解析电离.飞行时间质谱(Surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是近年来新起的一种蛋白质组检测技术,其原理是蛋白质选择性地与生物芯片活力表面结合,然后用质谱仪快速扫描,从而获得蛋白质图谱.
关键词： 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 镉 蛋白质组学 -
SELDI技术研究白喉毒素对豚鼠肝脏组织蛋白质组的毒理作用
作为蛋白质组学新的研究技术,表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)具有快速、简单和灵敏等优点,它不仅可在肿瘤诊断中用于发现标志物、观察治疗效果,还可用于研究蛋白质的修饰、相互作用、信号传导和酶促调节等[1-3],从而实现在蛋白质水平的大规模功能研究.目前该技术主要应用于肿瘤的早期诊断,而在毒理学方面的应用几乎为空白.白喉毒素(DT)作为融合靶向性抗肿瘤药物[4-6],也是近期的研究热点.为拓展SELDI技术在毒理学的应用,我们使用该技术,研究了DT染毒豚鼠与正常豚鼠肝脏组织蛋白质组的差异,从而探讨DT的毒理作用和可能的作用机制.
关键词： 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 白喉毒素 蛋白质组 -
甲状腺癌中医辨证唾液蛋白质组诊断模型研究
目的 探讨甲状腺癌不同证型患者的唾液蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型,为甲状腺癌的中医辨证分型提供客观依据.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测23例痰瘀互结型和26例肝郁气滞型甲状腺癌患者的唾液蛋白质指纹图谱,筛选出2组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法 建立诊断模型.结果 通过2组唾液蛋白质指纹图谱数据比较,共获得29个有明显差异的蛋白峰(P＜0.01),其中M/Z 3809.85、3 110.04、4 970.80被选择用于构建佳决策树模型,该模型的测试组总准确率为85.7%(42/49),灵敏度为84.6%(22/26),特异性为86.9%(20/23).结论 初步建立了甲状腺癌的唾液蛋白质指纹图谱辨证模式,为中医证候实质研究提供了新的方法 和途径.
关键词： 甲状腺癌 唾液 中医证候 蛋白质组学 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
用表面增强激光解析/电离飞行时间质谱蛋白指纹快速鉴定4种临床常见菌
目的 建立临床常见细菌蛋白指纹数据模型,为细菌的快速鉴定奠定基础.方法 利用表面增强激光解析/电离飞行时间质谱检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌参考株的细菌蛋白,筛选每种细菌稳定表达的蛋白峰,建立细菌的蛋白指纹数据模型,将其数据导人自建Fingerwave软件.收集临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌共256株并运用质谱仪检测其细菌蛋白峰,蛋白峰数据与Fingerwave软件中蛋白指纹数据模型进行相似度比较,以评价其鉴定符合率.结果 初步建立了4种临床常见细菌的蛋白指纹数据模型,利用其对临床菌株进行鉴定,鉴定结果与传统微生物学鉴定及分子生物学鉴定结果的符合率分别为大肠埃希菌93.1％ (54/58)、肺炎克雷伯菌87.2％( 75/86)、铜绿假单胞菌95.2％( 60/63)和金黄色葡萄球菌96.2％ (51/53).结论 通过蛋白指纹数据的相似度比较,可同时对4种常见临床细菌进行鉴定,为细菌感染的快速诊断提供了可能性.
关键词： 细菌 蛋白指纹比较 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术的质量控制与标准化
表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术是近年兴起的蛋白质组学研究前沿技术,其标准化和质量控制是其顺利应用到临床的关键.我们对SELDI-TOF-MS检测样本采集与制备、试剂的选择与保存、实验仪器的校准与维护;实验结果重复性验证与分析;数据处理与分析的标准化方法的选择、SELDI-TOF-MS技术系统标准化进行探讨和评价.
关键词： 蛋白质组学 标准化 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
应用SELDI-TOF-MS技术建立肝癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型
目的:建立肝癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型.方法:用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得新发肝癌、肝硬化患者和正常人血清的蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,建立肝癌的筛选模型.结果:肝癌患者与健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白(4477,8943,5181,8617,13 761 Da)在肝癌患者血清中高表达,肝癌患者与肝硬化患者血清蛋白质指纹图谱之间2个标志蛋白(4477,13 761 Da)在肝癌患者血清中高表达,1个标志蛋白(4097 Da)在肝癌患者血清中低表达.SELDI-TOF-MS技术的特异性(60/60,100%);敏感度(18/20,90%).分析系统筛选出4477,8943,13 761,4097 Da标志蛋白建立的肝癌诊断模型.结论:建立的血清蛋白质指纹图谱模型能够区分肝癌与非肝癌患者,SELDI-TOF-MS在肝癌的诊断及肿瘤特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有一定价值.
关键词： 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 蛋白芯片 肝癌 -
瘢痕性气道狭窄的血清蛋白质组学研究
目的 对比瘢痕性气道狭窄患者与健康对照组的血清蛋白质指纹图谱,寻找与气道瘢痕增生有关的蛋白.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测17例瘢痕性气道狭窄患者和17名健康人血清蛋白质图谱,用Biomarker Wizard软件分析得到两组间差异蛋白.结果 瘢痕性气道狭窄患者血清蛋白图谱与对照组相比,存在49个差异表达蛋白(P＜0.05),其中25个高表达,24个低表达,经蛋白质数据库搜索,初步确立特定相对分子质量所对应的蛋白.结论 瘢痕性气道狭窄患者血清和对照组血清中存在明显差异蛋白,这些差异蛋白可能与气道瘢痕的发生发展密切相关.
关键词： 气道狭窄 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 蛋白质组学 -
应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术筛选乳腺癌相关蛋白标志物
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选乳腺癌的特异性蛋白标志物.方法 用SELDI-TOF-MS仪及CM10蛋白芯片检测110例乳腺癌患者治疗前及100名健康对照的血清蛋白指纹图谱,应用软件自动采集数据、筛选差异表达蛋白,对表达有差异蛋白的诊断效率进行统计分析,采用多变量的Logistic回归模型校正混杂因素.结果 乳腺癌组与健康对照组相比,共有49个蛋白峰的强度差异有统计学意义(P＜0.05).结合以前的文献,筛选出6个蛋白标志物,质荷比(M/Z)分别为3264、3968、4376、8124、8924和9180,组建成乳腺癌诊断模型,其中表达下调的蛋白M/Z有4376、8126和8924,表达上调的有3264、3968和9180.M/Z为3264、3968、4376、8126、8924的蛋白诊断乳腺癌的ROC曲线下面积分别为0.936、0.933、0.727、0.976和0.751,可作为诊断乳腺癌的标志物.M/Z为9180的蛋白与乳腺癌的TNM分期和Her-2的表达相关(P＜0.05),M/Z为8926的蛋白峰与乳腺癌淋巴结转移有一定的关系(P＜0.05).结论 SELDI蛋白质谱技术可能有效地区分乳腺癌患者和健康人,筛选出的蛋白对乳腺癌诊断的灵敏度和特异度较高.SELDI在乳腺癌的诊断及乳腺癌特异性分子生物标志物的筛选方面具有一定的应用价值.
关键词： 乳腺肿瘤 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 蛋白质组学 -
应用SELDI-TOF-MS技术筛选肺鳞癌和肺腺癌患者差异蛋白的研究
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选出不同病理类型肺癌患者血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺癌组织中的差异蛋白,并探讨其临床意义.方法 选用WCX-2芯片、SELDI-TOF-MS技术检测20例肺鳞癌、20例肺腺癌和20例肺良性病变患者血清、BALF和肺组织匀浆的蛋白质谱,用Biomarker Pattern软件分析肺鳞癌和肺腺癌的差异蛋白并初步建立诊断模型.结果 ①肺鳞癌组与肺良性病变组:在血清、BALF、肺组织匀浆中发现存在2、9、8个差异蛋白峰(P＜0.05),分别选用其中质荷比为5 124.24、7 967.29联合10 843.45、7914.59联合8709.66的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断肺鳞癌的灵敏度分别为85％、80％、75％,特异度分别为65％、80％、90％,正确率分别为75％、80％、83％,阳性预测值分别为71％、80％、88％,阴性预测值分别为81％、80％、78％,其相对应ROC曲线下面积分别为0.750、0.916、0.930.②肺腺癌组与肺良性病变组:在血清、BALF、肺组织匀浆中发现存在8、9、7个差异蛋白峰(P＜0.05),分别选用其中质荷比为9295.79、7923.01、2452.49的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断肺腺癌的灵敏度分别为75％、80％、70％,特异度分别为65％、90％、85％,正确率分别为70％、85％、78％,阳性预测值分别为68％、89％,82％,阴性预测值分别为72％、82％、71％,其相对应ROC曲线下面积分别为0.844、0.933、0.825.结论 肺鳞癌和肺腺癌BALF及肺组织匀浆中的差异蛋白较血清多,诊断效率比血清高,肺鳞癌BALF中质荷比为7967.29和10843.45的差异蛋白峰联合、肺组织匀浆中质荷比为7914.59和8709.66的差异蛋白峰联合建模及肺腺癌BALF中质荷比为7923.01的差异蛋白峰建立分类树诊断模型,其诊断的灵敏度、特异度和正确率可达到75％～90％,有可能作为诊断肺鳞癌和肺腺癌的标志蛋白.
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慢性阻塞性肺疾病的血清蛋白质组学研究
目的 利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption ionizationtime-of-flight mass spectrometrv,SELDI-TOF-MS)技术研究慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)血清蛋白质指纹图谱.方法 应用SELDI-TOF-MS技术检测30例COPD患者和18名健康人血清蛋白质质谱,筛选出COPD血清差异蛋白.结果 COPD患者血清蛋白图谱与对照组相比,存在25个差异表达蛋白(P<0.05),包括9个高表达蛋白,其中质荷比为2 152、3 287、3 533、3 614、4 924、5 887、6 729的7个蛋白质其含量由对照组、COPD稳定期、COPD急性加重期依次升高(P<0.05);16个低表达蛋白,其中质荷比为4 313、4 380、8 634、8 765、8 842、13 878、14 086的7个蛋白质其含量由对照组、COPD稳定期、COPD急性加蕈期依次升高(P<0.05).经蛋白质数据库搜索,初步确立特定相对分子质量所对应的蛋白.结论 SELDI-TOF-MS技术为研究COPD提供了可行的技术平台,COPD患者血清和对照组血清中存在明显差异蛋白,这些差异蛋白可能与COPD的发生发展密切相关.
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TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白
目的:建立一种快速方便提取大肠杆菌膜蛋白的方法.方法:收集临床分离的大肠杆菌,利用TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白,Bradford法测定蛋白浓度,运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)进行质谱分析,采用CiphergenProteinchip软件采集数据.重复测定20次大肠杆菌的混合标本,评价TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白的重复性.结果:TritonX-114去污剂法成功提取出了大肠杆菌膜蛋白.重复测定20次大肠杆菌的混合标本,蛋白峰的分子量变异系数均小于0.05%.结论:T r i t o n X-114去污剂法可以快速方便的提取大肠杆菌膜蛋白,并具有很好的重复性,这不仅对大肠杆菌耐药机制和治疗方法的研究起着重要作用,也为膜蛋白的快速提取提供了新的思路.
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肝硬化患者血清蛋白组学研究
目的 比较肝硬化组与健康对照组以及肝硬化A、B、C级之间的血清蛋白组学,寻找用于肝硬化早期诊断、疗效预测的特异性蛋白标志物.方法 应用美国CipherGen公司表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪和蛋白芯片获得肝硬化患者及健康人血清中的蛋白质指纹图谱,用Biomarker Wizard软件进行分析,筛选出差异表达的蛋白峰.结果 肝硬化组与健康对照组共有16种蛋白质差异有统计学意义,A级与B级、C级之间的差异蛋白分别为1、9种,B级与C级之间无差异蛋白表达.结论 表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDITOF-MS)在肝硬化的诊断及病情判断等方面具有一定价值.
关键词： 肝硬化 蛋白质组学 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
纤维蛋白原在大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中的变化
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术探讨大鼠肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤后血清中纤维蛋白原的变化.方法 制备大鼠肾脏I/R模型,分为再灌注6,12,24 h组.选取各组血清样本,经SELDI-TOF MS分析检测,并对各组具有差异的多肽指纹图谱鉴定分析并用Proteinchip Software3.1进行校正.使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)进行蛋白质数据库检索以确定其性质,并使用ELISA的方法检测其在各组中的含量.结果 ①血清经SELDI-TOF MS分析后,在m/z为2 081D处,检测得到具有统计学意义的蛋白差异峰;②采用蛋白质数据库检索,鉴定为大鼠纤维蛋白原片段;③ELISA测得纤维蛋白原在各组大鼠血浆中含量的变化与SELDI-TOF MS检测结果基本一致.结论 纤维蛋白原在肾脏缺血/再灌注损伤中可能起重要作用.
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采用蛋白指纹图谱技术筛选大肠癌肝转移特异性相关蛋白
目的:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术从大肠癌及大肠癌肝转移患者中筛选出大肠癌肝转移患者血清特异性相关蛋白.方法:实验于2005-07/2006-09分别在南方医院消化中心实验室与解放军第一五○医院实验室完成.应用美国CipherGan公司IMAC3(lmmobitized Metal Affinity Capture,金属亲和表面)芯片和蛋白芯片仪检测44例大肠癌患者及36例大肠癌肝转移患者血清中的蛋白质相对含量.设定所有血清样本检测的蛋白质相对分子质量区间在1 500～20 000.利用PBSⅡ型蛋白质芯片阅读仪对IMAC 3芯片进行检测,所得到的蛋白质以波谱的形式表示.采用Biomarker Wizard软件对2组血清在相同质荷比的蛋白质含量数据进行方差分析,将分析所得到的含量有显著性差异(P＜0.05)的蛋白质建立数据库,导入Biomarker Pattern智能统计分析软件,选择相应条件,对其进行分组统计,从而得到能够正确分组的特异性蛋白标志物并构建大肠癌肝转移的诊断模型.采用酶联免疫法检测相同血清标本中的CEA水平,与构建的诊断模型在大肠癌肝转移诊断中作比较.结果:①44例大肠癌患者与36例大肠癌肝转移患者的血清蛋白质在质荷比为2 685.64～11 813间有16个蛋白质含量有显著差异.②大肠癌组在质荷比为5 909处的蛋白质的相对含量高于大肠癌肝转移组[(30.1±9.6)%,(14.5±10.4)%,P≤0.01].③其中44例大肠癌患者中有38例患者被正确分组,36例大肠癌肝转移患者被正确识别,准确率为92.5%(74/80),灵敏度和特异性分别为100%(36/36),86.4%(38/44).结论:表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术快速、准确、灵敏度、特异性高,通过蛋白芯片仪发现的特异性相关蛋白,有望成为大肠癌肝转移诊断中有应用价值的临床检测指标.
关键词： 大肠癌 肝转移 生物标志物 蛋白指纹图谱 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
大肠埃希菌蛋白指纹图谱的建立
目的 建立大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)蛋白指纹图谱,为E.coli感染快速诊断奠定基础.方法 收集临床分离E.coli 88株,提取细菌DNA,PCR检测E.coli 16S rRNA.蛋白提取液提取细菌蛋白,干化学法测蛋白浓度,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测E.coli蛋白,采用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据.重复测定20次E.coli混合标本,评价SELDI检测E.coli蛋白分子量的重复性.结果 E.coli标准菌株ATCC 25922和临床分离株均可检出16S rRNA.AU芯片能捕获近30个E.coli蛋白峰,其中19个蛋白峰构成E.coli特征性蛋白指纹图谱,各蛋白峰在临床分离E.coli间分子量变异系数≤0.2%.SELDI重复检测20次E.coli混合标本显示同一蛋白峰的分子量变异系数≤0.05%.结论 E.coli在分子量3～20 kD范围内具有特征性蛋白指纹图谱,为快速诊断E.coli感染提供了新思路.
关键词： 大肠埃希菌 蛋白指纹 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 -
SELDI-TOF-MS筛选慢性阻塞性肺疾病血清标志蛋白的初步研究
目的:利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选慢性阻塞性肺疾病(COPD)血清特异标志物.方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测30例COPD稳定期患者和30例健康对照者血清蛋白指纹图谱,采用Biomarker pattern软件进行分析,建立COPD的诊断模型.结果:COPD患者血清蛋白图谱与对照组相比,在相对分子质量2 000-15 000范围内共检测到75个蛋白峰,发现19个有统计学差异的蛋白峰(P＜0.05).通过对COPD组与对照组间的数据作进一步分析,经BPS软件分析,建立质荷比(M/Z)3 167、4 645的差异蛋白组成的诊断模型,其诊断敏感度为96.67％,特异度为96.67％.结论:SELDI-TOF-MS技术是一种快速、简单易行、用量少和高通量的分析方法.能直接筛选出COPD血清中特异表达标志物,用特异表达标志物建立的诊断模型能有效区分COPD患者与健康对照者,有望成为COPD诊断的辅助指标.
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用飞行质谱技术筛选肝棘球蚴病患者血清蛋白质组学标记物
目的 筛选肝棘球蚴病患者血清蛋白质组学标记物,建立血清蛋白质指纹图诊断模型,评价其应用价值.方法 肝棘球蚴病患者68例,对照组73例(其他肝病患者33例,健康人40例),将全部样品分为训练组(37例)和测试组(67例).用弱阳离子交换蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测肝棘球蚴病患者和对照者的血清蛋白质谱.分别比较训练组中37例肝棘球蚴患者和37例对照者、5例肝囊型棘球蚴病(HCE)患者和5例肝泡球蚴病(HAE)患者、8例肝棘球蚴病患者手术前后两组血清蛋白质峰的差异.利用ZJU-PDAS软件进行数据处理,通过支持向量机(SVM)运算建立蛋白质指纹图诊断模型,并用测试组标本采用盲法对模型的灵敏度和特异度进行验证.结果 肝棘球蚴病组和对照组共筛选出9个差异蛋白峰,其中相对分子质量为1044、1047、1073、1075、1338、6453、6649、8714 m/z的8个蛋白质峰在病例组中下调,相对分子质量为5651 m/z的蛋白峰在病例组中上调(P<0.05),盲法验证表明所建模型对肝棘球蚴病诊断的灵敏度为77.4%(24/31),特异度为66.7%(24/36);阳性预测值为66.7%(24/36),阴性预测值为77.4%(24/31).HCE和HAE患者之间筛选出2个差异表达蛋白峰,质荷比分别为8716和2751 m/z(P<0.05);8例肝棘球蚴病患者手术前后两组共筛选出6个差异表达蛋白质峰,相对分子质量分别为1297、1505、1525、1534、5921,5941 m/z(P<0.05).结论 SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法能筛选出肝棘球蚴病患者血清蛋白质组学标记物,对肝棘球蚴病诊断及预后判断具有潜在的应用价值.
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非霍奇金淋巴瘤血清蛋白质质谱分析
目的:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术检测血清蛋白指纹图,通过差异蛋白组学筛选非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkin's lymphoma,NHL)特有的蛋白标记物,找出佳的标志蛋白组合模式建立非霍奇金淋巴瘤诊断模型.方法:用Ciphergen公司生产的PBSⅡ/C型蛋白质指纹图谱仪和Au-Chpi金芯片采集50例NHL患者(NHL组)、50例淋巴结炎患者(淋巴结炎组)、50例健康志愿者(对照组)血清蛋白质指纹图谱,采用Biomaker Wizard3.1版分析软件筛选差异蛋白,建立NHL诊断模型.结果:NHL患者、淋巴结炎患者、健康志愿者血清蛋白质指纹图谱之间有4个标志蛋白在NHL患者血清中高表达,3个标志蛋白在NHL血清中低表达.分析系统筛选出质荷比(M/ Z)4966、9278、6633、4222、9216、9237和7714标志蛋白建立NHL诊断模型,该模型对NHL的诊断灵敏度和特异性分别为92％和98％.结论:NHL与淋巴结炎组、对照组比较血清蛋白质表达具有显著差异,筛选其中差异蛋白质可用于建立NHL预测模型.
关键词： 非霍奇金淋巴瘤 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 蛋白组学 -
应用SELDI-TOF-MS技术筛查精神分裂症血清蛋白标志物
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛查精神分裂症患者血清蛋白标志物. 方法采集的 120 份血清样本(疾病组精神分裂症患者 44 例,健康对照组40 名,疾病对照组抑郁症患者36例),利用SELDI-TOF-MS及固定金属亲和表面蛋白芯片(IMAC30),检测血清蛋白质谱数据.将获得的蛋白质谱图进行数据校正和分析,筛选精神分裂症差异蛋白.建立人工神经网络模型并进行序列分析,鉴定蛋白.结果 找到15个差异峰,其中质荷比(m/z)为 1 207和 1 467两个蛋白质峰作为输入节点建立的模型,其诊断效能高.上述两个肽均为锰过氧化物歧化酶的N端片段,序列分别为DSGEGDFLAEGGGVR和EGDFLAEGGGVR.与抑郁症组及健康对照组相比,精神分裂症患者血清锰过氧化物歧化酶蛋白显著低表达.结论 精神分裂症患者血清存在特异性蛋白, 锰过氧化物歧化酶作为潜在的特异性蛋白标志物,值得进行进一步研究.
关键词： 精神分裂症 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 血清 蛋白标志物 -
表面增强激光解析电离飞行时间质谱快速鉴定血液大肠埃希菌感染
目的 探讨用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌.方法 用SELDI-TOF-MS建立大肠埃希菌的蛋白质指纹模型.临床分离的168株菌经SELDI-TOF-MS检测,数据与大肠埃希菌模型进行相似度比较,对该模型进行评价.SELDI-TOF-MS检测88株微生物血培养分析仪阳性报警的革兰阴性杆菌,与大肠埃希菌蛋白质指纹模型进行相似度比较,对其中的大肠埃希菌进行鉴定.结果 19株建模组菌株经PCR及测序鉴定均为大肠埃希菌,并建立了该菌的蛋白质指纹模型；用168株验证组菌株对该模型进行验证,对大肠埃希菌鉴定的符合率为100％ (60/60)；用该模型对88株引起血流感染的革兰阴性杆菌进行鉴定,鉴定结果与传统微生物学鉴定结果具有较高的一致性(K=0.905).结论 SELDI-TOF-MS可快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌,为血流感染细菌的快速诊断提供了新技术.
关键词： 大肠埃希菌 血流感染 表面增强激光解析电离飞行时间质谱
