首页 > 文献资料
-
性成熟前期染砷对雌性SD大鼠生殖功能影响
目的 探讨性成熟前期亚砷酸钠(NaAsO2)染毒致雌性SD大鼠子宫、卵巢结构改变及性激素水平变化影响.方法 SD大鼠40只,随机分为4组,即对照组、低、中、高剂量砷组,分别灌胃给予双蒸水、1.25、2.50、5.00 mg/kg NaAsO2,4周后,断颈处死,双侧卵巢及子宫做苏木素-伊红染色观察卵巢及子宫组织形态学变化;采用放射免疫法测定血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇、孕酮含量;酶联免疫法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期蛋白D1(cyclin Dl)、孕激素受体(PR)含量.结果 随NaAsO2剂量增加,染砷组大鼠卵巢内总卵泡数减少、细胞发育不良、成熟卵泡减少及畸形发育;子宫内膜变薄,腺体减少,腺腔变窄,腺上皮细胞由长柱状变成短柱状,间质增宽;与对照组比较,中、高剂量砷组大鼠血清中FSH、LH、雌二醇含量[分别为(3.23±0.20)、(3.21 ±0.18)IU/L、(2.64±0.27)、(2.62 ±0.25) ng/mL、(56.69 ±6.37)、(55.95±7.25) pg/mL]明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,中、高剂量砷组大鼠血清中VEGF、cyclin D1、PR蛋白含量[分别为(13.54±1.98)、(12.44±2.06) ng/L、(1.089 ±0.133)、(1.040±0.136) μg/L、(324.27±19.77)、(320.46±18.01) ng/L]下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 性成熟前期染毒NaAsO2可引起SD雌性大鼠卵巢与子宫结构改变,其机制可能与NaAsO2导致大鼠雌二醇水平下降,下丘脑分泌FSH、LH减少有关.
-
亚砷酸钠对HaCaT细胞增殖周期及ROS生成影响
目的 探讨亚砷酸钠( NaAsO2)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖、细胞周期及活性氧(ROS)生成影响.方法 以0、25、50 μmol/L NaAsO2作用于HaCaT细胞6h后,以Alamar Blue还原法检测细胞增殖水平；以流式细胞仪检测细胞周期及ROS水平.结果 25、50 μmol/L NaAsO2组细胞增殖水平分别为(93.5±1.18)％、(82.9±2.64)％,明显低于对照组( 100 ±0.51)％ (P ＜0.05)；G2/M期细胞数分别为(19.15±0.29)％、(18.12±1.35)％,明显高于对照组(15.24 ±0.04)％ (P ＜0.05)；ROS水平分别为(128.61±6.23)％、(152.92 ±7.25)％,明显高于对照组( 100.00±3.45)％(P＜0.05).结论 NaAsO2作用可引起HaCaT细胞ROS含量增高,同时G2/M期细胞数增多,但G2/M期细胞比例增高并不是由细胞增殖作用所引起.
关键词： 亚砷酸钠(NaAsO2) 细胞增殖 细胞周期 -
无机砷对肝细胞转录因子Nrf2及其调控蛋白表达影响
目的 探讨不同时间和不同浓度亚砷酸钠( NaAsO2)暴露对Chang肝细胞株NF-E2相关因子2(Nrf2)、及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1( NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响.方法 25 μmol/L NaAsO2作用Chang肝细胞2、4、6、12和24h;或不同浓度的NaAsO2(10、25和50 μmol/L)作用Chang 肝细胞6h,免疫印迹法(western blot)检测细胞内Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达情况.结果 25 μmol/L的NaAsO2可以明显诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达(P ＜0.01)；Nrf2蛋白2h开始明显诱导,4h表达水平高,此后随暴露时间的延长虽然表达有所下降,但持续至24 h仍明显高于对照组；NQO1的蛋白表达水平也从4h开始增加并持续至24 h;HO-1的蛋白表达则从6h开始明显诱导,且随暴露时间的继续延长表达持续上升,具有明显的时间-效应关系；10、25和50 μmol/L NaAsO2染毒6h,Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达均随染毒剂量的增加而大量诱导,具有明显的剂量-效应关系(P＜0.01).结论 NaAsO2暴露能够诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1蛋白表达增强,且具有一定的剂量-效应关系.
-
低剂量长期砷暴露对HaCat细胞周期及周期蛋白影响
目的 探讨低剂量长期砷暴露对人皮肤角质形成细胞系HaCat细胞周期及周期蛋白D1(cyclin D1)和p21影响.方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.1μmol/L的NaAsO2 15周后,用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞周期分布；用western blot法检测细胞cyclin D1和p21的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,NaAsO2染毒组细胞的G0/G1期细胞数明显增高,S期细胞数明显降低,而G2/M期无明显变化；0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内cyclin D1表达水平分别为(152.40 ±8.17)％、(145.59 ±2.89)％,与对照组[(99.99±1.13)％]比较,均明显增高；0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内p21表达水平分别为(64.06± 1.62)％、(39.57±1.82)％,均明显低于对照组的(99.9±2.83)％,呈剂量效应关系(P＜0.05).结论 长期低剂量砷暴露可诱导HaCat细胞周期异常,cyclin D1表达上升,p21表达下降.
-
亚砷酸钠对小胶质细胞增殖活力和NO分泌的影响
分别用浓度0、1、2、4、8、10、20 μmol/L的亚砷酸钠(NaAsO2)处理小鼠小胶质细胞(BV-2),24 h后四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖活力,硝酸还原酶法检测培养液中NO含量.结果显示,BV-2细胞染毒24 h后,所有砷处理组的细胞增殖活力均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).各砷处理组的细胞培养液中NO含量均显著低于对照组,P＜0.01.提示砷可对小胶质细胞产生毒性作用.
关键词： 亚砷酸钠(NaAsO2) 小胶质细胞 增殖活力 一氧化氮(NO) -
急性砷暴露小鼠尿砷甲基化代谢的研究
目的 探讨急性砷暴露小鼠尿砷排泄及其甲基化代谢模式.方法 健康雌性昆明种小鼠一次性灌胃染毒亚砷酸钠(NaAsO2),染毒剂量为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/kg,染毒时间为12、24、48、72 h.染毒结束前一天将小鼠放入代谢笼并收集24h尿样(12 h组收集12 h尿样).采用超低温捕集-氢化物发生-原子吸收分光光度法分别测定尿中的无机砷(inorganic arsenic,iAs)、一甲基砷(monomethylated arsenic,MMA)和二甲基砷(dimethylated arsenic,DMA)含量,并计算iAs％、MMA％、DMA％、一甲基化率(primary methylation index,PMI)和二甲基化率(secondary methylation index,SMI).结果 急性砷暴露小鼠,随着染砷剂量增加,尿总砷(T-As)含量、iAs％、MMA％明显增加,DMA％和SMI逐渐降低,PMI基本保持不变；而一次性砷染毒后,随时间的延长,尿T-As含量、iAs％、MMA％逐渐降低,DMA％、PMI和SMI明显增加.24 h内尿砷大部分排泄,其百分含量及甲基化率都基本在同一水平,48 h和72 h的尿砷排泄量很少,其百分含量及甲基化率都基本一致.结论 急性砷暴露小鼠尿砷排泄具有明显的剂量-效应和时间-效应关系；高砷暴露可以抑制砷的甲基化代谢；24 h内尿砷含量可作为判断急性砷中毒体内砷负荷的指标.
关键词： 亚砷酸钠(NaAsO2) 尿 甲基化 -
低剂量长期砷暴露对HaCat细胞增殖及凋亡水平的影响
目的 探讨低剂量长期砷暴露对HaCat细胞增殖及凋亡水平的影响.方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.10 μmol/L的NaAsO215周后,用直接细胞计数法计数对照组及染砷组细胞数,检测细胞增殖水平；用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞凋亡发生水平.结果 各染砷组细胞增殖速率与对照组相比均显著增高(P＜0.05),且0.10μmoL/L组细胞增殖率(245.00±8.66)％显著高于0.05 μmol/L组(165.00±15.00)％(P＜0.05),细胞增殖水平与染砷剂量间呈显著剂量-效应关系；0.05 μmol/L组(0.28±0.08)％及0.10 μmol/L组(0.34±0.09)％细胞凋亡率均明显低于对昭组(0.74±0.18)％(P＜0.05).结论 长期低剂量砷暴露可使HaCat细胞的增殖能力明显增强,并诱导细胞凋亡率显著降低.
关键词： 亚砷酸钠(NaAsO2) HaCat细胞株 细胞增殖 细胞凋亡 -
tBHQ对NaAsO2诱导HaCaT细胞凋亡的拮抗作用
目的 探讨叔丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO2,sodium arsenite)诱导人角质上皮HaCaT细胞凋亡的拮抗作用.方法 tBHQ(10、25、50μmol/L)预处理12h,再与NaAsO2(5、10、30 μmol/L)共同处理HaCaT细胞24 h.用Annxin V/PI染色流式细胞术法检测细胞凋亡率；DAPI染色观察细胞形态学改变；JC-1法测定线粒体膜电位.结果 将实验数据进行ANOVA分析处理后表明,5,10、30 μmol/L NaAsO2单独作用时,细胞凋亡率与对照组相比显著升高,而线粒体膜电位则显著下降(P＜0.05或P＜0.01),形态学观察可见高强度DAPI染色细胞数目增加和凋亡小体出现；当给予tBHQ(10、25、50 μmol/L)预处理后,NaAsO2致HaCaT细胞凋亡率升高和线粒体膜电位下降均明显受到抑制(P＜0.05),形态学观察可见高强度DAPI染色细胞数目和细胞核碎片明显减少.结论 实验结果表明tBHQ可能通过线粒体凋亡途径抑制NaAsO2引起的HaCaT细胞凋亡.
