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甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞损伤作用
目的 观察甲基苯丙胺(Meth)通过电压门控钾离子通道亚型1.3、1.5(Kv1.3、Kv1.5)对大鼠胎鼠小胶质细胞的损伤作用.方法 SD胎鼠原代培养小胶质细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡；采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法观察Kv1.3、Kv1.5表达变化.结果 Meth呈浓度依赖性降低小胶质细胞活力,增加小胶质细胞凋亡；Kv1.3的抑制剂MgTx对Meth所致小胶质细胞损伤有部分保护作用；与对照组(1.047±0.165)比较,300 μmol/L Meth组小胶质细胞Kv1.3 mR-NA表达(7.453±0.675)增高(P＜0.05),MgTx组Kv1.3 mRNA表达(1.684±0.875)低于Meth 300 μmol/L组(P ＜0.05)；Meth对Kv1.5 mRNA表达无影响.结论 Meth可引起小胶质细胞损伤,其机制可能与Kv1.3表达变化有关.
关键词： 甲基苯丙胺(Meth) 小胶质细胞 损伤 原代培养 钾通道 -
甲基苯丙胺对瞬时外向钾电流影响
目的 观察甲基苯丙胺(Meth)对瞬时外向钾电流的影响及原因.方法 将怀孕18 d SD大鼠胎鼠海马神经元分为对照组和Meth处理组,利用全细胞膜片钳方法记录外向瞬时钾电流变化;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察Meth引起的细胞损伤作用;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察瞬时外向电流成分中Kv1.4、4.1、4.2和4.3表达,并通过western-blot方法观察Kv4.2蛋白表达.结果 与对照组[(87.4±12.5)pA/pF]比较,Meth能引起瞬时外向钾电流增大[(120.1±19.6)pA/pF] (P ＜0.01),与对照组(1.00±0.18)比较,Meth处理组凋亡率为对照组的(7.11±0.95)倍(P＜0.01),钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)明显抑制神经元凋亡(P＜0.01);Kv4.2可能是外向电流成分中主要贡献者,Meth能上调Kv4.2通道蛋白表达;与Kv4.2上调密切相关的Kchip2/3、Kchip4、CaMK2蛋白表达增高.结论 Meth引起的瞬时钾电流增大可能通过Kv4.2上调来实现,但其机制仍需进一步探讨.
关键词： 甲基苯丙胺(Meth) 瞬时外向钾电流 Kv4.2 细胞凋亡
