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性早熟女童血清中双酚A、辛基酚、4-壬基酚测定和分析
目的 探讨双酚A(BPA)、辛基酚(OP)、4-壬基酚(4-NP)与性早熟女童发病的关系.方法 收集2005年3～10月在复旦大学附属儿科医院性早熟专科门诊就诊的初诊性早熟女童110例,正常女童100例,运用高效液相色谱法测定患儿和正常女童血清BPA、OP、4-NP的含量,同时测定子宫、卵巢体积及血清中雌二醇含量,将血清中BPA、OP、4-NP含量与靶器官的临床指标作相关性分析.结果 40.9%和33.6%的性早熟女童血渍中分别检测出BPA和OP,而正常女童仅2%和5%分剐检测出BPA和OP,24.5%性早熟女童血清检测出4.NP,3%正常女童血清检测出4-NP;性早熟女童血清中BPA、OP、4-NP构成比均高于正常女童(P<0.01);性早熟女童血清中BPA含量与子宫体积呈正相关(r=0.557,P<0.05),与卵巢体积呈正相关(r=0.469,P<0.01),血清中OP含量与子宫体积呈正相关(r=0.576,P<0.05),与卵巢体积呈正相关(r=0.676,P<0.01).结论 性早熟女童受BPA、OP、4-NP污染的程度均比正常女童严重得多,而且BPA、OP对子宫、卵巢体积有影响,可能与性早熟女童的发病有一定关系.
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4-壬基酚、双酚A对幼雌SD大鼠生殖器官的拟雌激素样作用探讨
目的 检测4-壬基酚(4-NP)、双酚A(BPA)对幼雌SD大鼠的拟雌激素样作用和内分泌干扰作用.方法 以21日龄雌性SD大鼠为实验对象,选取4-NP和BPA为染毒物质,均设高中低剂量,连续喂饲3天.于末次给药后24h处死.以子宫湿重、脏器系数、子宫内膜及平滑肌增生程度和细胞增殖核抗原(PCNA)的蛋白表达作为检测指标,采用单因素方差分析方法进行统计.结果 染毒动物实验结果显示.高中剂量的4-NP(200mg/kg和100mg/kg)和BPA(600mg/kg和400mg/kg)能够使染毒动物的子宫湿重及脏器系数明显增加(P<0.01).并且具有一定的剂量-效应关系;4-NP和BPA高、中、低剂量都能够使子宫内膜上皮增高,平滑肌增厚,PCNA蛋白表达增强(P<0.05).结论 动物染毒实验进一步证实了4-NP、BPA作为环境内分泌干扰物的拟雌激素作用及其剂量-效应关系.
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蔬菜中内分泌干扰物4-壬基酚和双酚A的GC-MS检测方法研究
目的 建立蔬菜中内分泌干扰物4-壬基酚(4-NP)和双酚A(BPA)的GC-MS检测方法.方法 样品粉碎后,超声波振荡提取,BOND ELUT CH固相萃取小柱净化,二氯甲烷洗脱,无水硫酸钠脱水后BSTFA衍生,GC-MS测定.结果 两种目标化合物线性范围为10～500μg/L(r=0.999),4-NP和BPA的检出限分别为0.1μg/kg和0.02μg/kg,样品平均加标回收率为85.0%～105.1%,批内、批间精密度均小于10%.结论 该方法具有良好的批内和批间精密度,灵敏度高,适用于蔬菜中痕量4-NP和BPA检测.
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水中双酚A和辛基酚及4-壬基酚的高效液相色谱荧光检测法
目的 建立同时测定水中双酚A、辛基酚、4-壬基酚的高效液相色谱荧光检测法.方法 样品经液-液萃取,采用XTerra(R) RP18色谱柱(4.6 mm×l50 mm,5μm),以甲醇-水(体积比为80:20)为流动相,高效液相色谱荧光检测器进行检测.结果 双酚A、辛基酚、4-壬基酚的检出限为0.01～0.02μg/L,平均回收率为82.8％～97.8％,相对标准偏差为1.26％～4.14％.结论 该方法操作简便,回收率高,重复性好,适用于水中双酚A、辛基酚、4-壬基酚的同时检测.
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双酚A、4-壬基酚影响胚胎着床的作用机制探讨
目的 探讨双酚A、4-壬基酚影响胚胎着床的作用机制.方法 待测物质双酚A、4-壬基酚在不同浓度下干预细胞培养48h,以雌激素物质17β-雌二醇、乙烯雌酚作为阳性对照,RT-qPCR法检测各物质干预下细胞中孕激素受体(PR)mRNA表达的情况,且建立"S函数"量效曲线.WesternBlotting检测各组PR蛋白分泌的情况.结果 双酚A、4-壬基酚干预下PRmRNA呈现上调性表达,并能建立与17β-雌二醇、乙烯雌酚作用近似的"S函数"量效曲线.双酚A、4-壬基酚与17β-雌二醇、乙烯雌酚分别干预下PR蛋白分泌均增加.结论 双酚A、4-壬基酚可能通过影响PR的表达进而影响胚胎着床.
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壬基酚对体外培养大鼠胚胎发育的毒性研究
目的研究4-壬基酚(4-NP)在体外条件下对大鼠胚胎生长发育的影响,探讨其胚胎毒性作用机制.方法采用植入后全胚胎培养模型,将9.5 d Wistar大鼠胚胎与含4-NP的大鼠即刻离心血清共培养48 h(4-NP终浓度为0,6.25,12.5,25,50,100 mg/L),观察4-NP对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响,并用光镜、电镜检测胚胎和卵黄囊的组织结构.结果 4-NP在25 mg/L以上可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、胚胎生长迟缓及器官形态分化异常,严重者出现神经系统、心脏、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形;100 mg/L的4-NP对体外培养胚胎主要呈致死效应.光镜可见实验组胚胎多个器官组织出现病理改变,光镜和电镜下可见卵黄囊3层结构受损,以上结果均呈明显的剂量-反应关系.结论 4-NP对体外培养的大鼠胚胎具有一定的胚胎毒性.其胚胎毒性机制可能与4-NP对卵黄囊胎盘的结构和功能的破坏及其直接的细胞毒性有关.
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4-壬基酚、双酚A对雌性SD幼鼠生殖器官拟雌激素样作用的联合效应
[目的]检测4-壬基酚(4-NP)、双酚A(BPA)对幼雌SD大鼠拟雌激素样作用的联合效应. [方法]选取4-NP、BPA为染毒物质;以21d雌性SD大鼠为实验对象,共分9组,每组8只.分组为:4-NP高、中、低剂量组(200、100、50mg/kg),BPA高、中、低剂量组(600、400、200mg/kg),混合组(50mg/kg4-NP+200mg/kg BPA),阳性对照组,溶剂对照组.连续喂饲3d,末次给药后24h处死.以子宫湿重、脏器系数、子宫内膜及平滑肌增生程度和细胞增殖核抗原(PCNA)的蛋白表达作为检测指标,采用单因素方差分析方法进行统计. [结果]高、中剂量的4-NP和BPA能够使染毒动物的子宫湿重及脏器系数明显增加(P＜0.01);4-NP和BPA高、中、低剂量都能够使子宫内膜上皮、平滑肌增厚,PCNA蛋白表达增强(P＜0.05),并且具有一定的剂量-效应关系.大无效应剂量的4-NP(50mg/kg)和BPA(200mg/kg)混合喂饲后能够使染毒动物的子宫湿重及脏器系数明显增加;能够使子宫内膜上皮、平滑肌增厚,PCNA蛋白表达增强(P＜0.05).[结论]4-NP、BPA具有拟雌激素样作用,干扰内分泌系统;两种物质混合后可以发挥联合效应.
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双酚A和4-壬基酚对未成年雌性食蟹猴的生殖内分泌毒性作用
目的 研究4-壬基酚(4-NP)和双酚A(BPA)对未成年雌性食蟹猴的拟雌激素作用和内分泌干扰作用.方法 10只16月龄左右的雌性食蟹猴随机分为染毒组和对照组,每组5只.染毒组给予4-壬基酚(4-NP)50 ml/kg+双酚A(BPA)200 mg/kg联合作用,对照组给予溶剂玉米油,给药剂量为5 ml/kg.每日早晨空腹灌胃,连续4周.每周称重一次,染毒结束时,检测血清雌激素水平、阴道脱落细胞成熟指数,取出子宫,测定其子宫湿重、子宫内膜及环形平滑肌厚度、子宫内膜上皮及腺上皮高度.结果 染毒组与对照组比较血清雌激素水平明显升高,阴道脱落细胞成熟指数显著增加(p＜0.05),子宫湿重、子宫内膜及环形平滑肌厚度、子宫内膜上皮细胞及腺上皮高度显著增加,差异极显著(P＜0.01).结论 双酚A和4-壬基酚对未成年雌性食蟹猴具有一定的生殖内分泌毒性作用.
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海口市部分市售蔬菜4-壬基酚、双酚A污染情况初步调查研究
[目的]了解海口市部分蔬菜中4-壬基酚(4-NP)和双酚A(BPA)的污染情况.[方法]到海口市4个城区的农贸市场和超级市场随机获取5种蔬菜,采用GC-MS检测方法进行定性定量检测.[结果]4-NP和BPA在5种蔬菜中均有检出,其中白菜和油菜检出卒为100%,含量分别为1.26～8.58 μg/kg(4-NP)和0.43～5.31 μg/kg(BPA).[结论]由于4-NP和BPA及其下游产物在我国的广泛应用,有可能已对部分蔬菜造成污染,应引起有关部门的注意.
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高效液相色谱法测定大鼠血清中4-壬基酚和双酚A
目的建立高效液相色谱测定血清4-壬基酚和双酚A的方法. 方法大鼠血清样品用正己烷-乙醚混合溶剂(70∶30)提取,采用C18色谱柱分离,以乙腈-乙酸铵缓冲液(pH 4.5)(80∶20)为流动相,在激发波长227 nm、发射波长313 nm处用荧光检测器检测. 结果血清中的待测组分的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,4-壬基酚和双酚A线性范围分别为0.013～5.0 μg/ml,0.004～3.0 μg/ml.本方法的检测限4-壬基酚为13 ng/ml,双酚A为4 ng/ml,加标回收率4-壬基酚为83.8%～100.0%,双酚A为83.3%～100.0%; 日内精密度为1.70%～2.70%,日间精密度为2.06%～9.78%.结论该法适用于血清中双酚A和4-壬基酚质量浓度检测.
