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黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞活性的影响及其机制探讨
目的:探讨黄芪甲苷对小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1细胞活性的影响及其作用机制.方法:体外培养MC3T3-E1细胞,用不同浓度的黄芪甲苷进行预处理后,MTT法测定细胞增殖情况,碱性磷酸酶法(ALP)测定细胞分化情况,Western blotting分析转化生长因子TGF-β1、成骨细胞信号转导蛋白Smad2/3表达水平;应用小干扰RNA (siRNA)转染法观察TGF-β1 siRNA对MC3T3-E1细胞增殖及活性的影响,加入抗Smad2/3抗体,探讨Smad2/3在黄芪甲苷介导的细胞增殖分化中的作用.结果:黄芪甲苷在一定浓度范围内剂量依赖性促进MC3T3-E1细胞的增殖和分化能力.进一步机制分析表明,黄芪甲苷处理可诱导TGF-β1蛋白表达,TGF-β1siRNA处理后,黄芪甲苷诱导的MC3T3-E1细胞的增殖和分化能力明显下降;此外,黄芪甲苷可显著性诱导Smad2/3表达,经TGF-β1 siRNA处理后,黄芪甲苷诱导的Smad2/3表达显著下降;加入Smad2/3抗体后,黄芪甲苷诱导的MC3T3-E1细胞的增殖和分化能力明显下降.结论:黄芪甲苷可通过刺激TGF-β1-Smad2/3通路的活化促进成骨细胞的增殖和分化,从而有利于骨形成.因此,本研究将为骨折愈合的治疗提供新的研究方向.
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TGF-β1在兔胆管电热损伤早期修复中的表达及意义
随着全球腹腔镜胆囊切除术开展应用,腹腔镜胆管损伤发生率近有逐渐上升的趋势,中华医学外科学会腹腔镜外科学组的一项调查显示我国腹腔镜胆囊切除术(LC)的胆管损伤(BDI)发生率为0.24％[1],腹腔镜胆管损伤是一种电热力损伤,其损伤特点是电刀凝伤多,毁损范围大,且术中不易被发现,常表现为穿孔性损伤和延迟性狭窄[2].
关键词： 电热损伤 早期修复 转化生长因子TGF-β1 胆管狭窄 -
转化生长因子-β1对大鼠肌成纤维细胞增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响
目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肌成纤维细胞(MFB)增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响.方法 TGF-β1(0.33～81 pmol/L)在不同作用时间(5～120min)的条件下诱导MFB细胞活化,采用免疫吸附和Western blot方法观察TGF-β1对MFB细胞内pSmad2C、pSmad2L、pSmad3L及Smad2/3蛋白表达的影响;采用MTT方法观察TGF-β1对MFB细胞增殖的影响.结果 在0.33～9 pmol/L浓度范围内,TGF-β1均呈浓度依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以9 pmol/L明显,TGF-β1在27、81 pmol/L浓度时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达无明显变化.在TGF-β1为9 pmol/L浓度条件下,30～60 min孵育时间对MFB细胞增殖无明显影响,但可呈时间依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以30 min明显,TGF-β1在60、120 min时间时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达量无明显变化.结论 TGF-β1诱导MFB细胞内Smads磷酸化先于刺激细胞增殖.
关键词： 成纤维细胞(MFB) 信号转导 Smad 转化生长因子TGF-β1 -
转化生长因子TGF-β1-509(C/T)基因多态性与不明原因复发性自然流产的易感性研究
目的 探讨转化生长因子TGF-β1-509 (C/T)基因多态性与不明原因复发性自然流产的关系.方法 运用PCR-RFLP技术检测59例不明原因复发性自然流产患者(URSA组)及252例正常孕妇(对照组)TGF-β1-509 (C/T)基因多态性.结果 URSA组TGF-β1-509 CC,CT,TT三种基因型频率(％)分别为16.95、67.80、15.25;对照组分别为14.29、46.42、39.29.URSA组转化生长因子TGF-β1-509C、T基因频率(％)分别为50.85、49.15;对照组分别为32.81、67.19.URSA组CT基因型频率明显高于对照组(x2=8.732,P=0.003);而TT基因型频率则明显低于对照组(x2=12.18,P＜0.001).URSA组C等位基因明显高于对照组,T等位基因明显低于对照组(x2=13.846,P＜0.001).结论 转化生长因子TGF-β1-509(C/T)基因多态性与URSA的遗传易感性有关,CT基因型可能为URSA的易感因素之一,TT基因型可能为URSA的保护因素之一.
关键词： 不明原因复发性流产 遗传多态性 转化生长因子TGF-β1 -
TGF-β1、p53在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义
TGF-β1是至今发现的细胞因子中少数几个负调节因子之一,但人类上皮性来源的癌细胞存在逃逸TGF-β1使其增殖的负调控现象[1].突变型p53[2,3]可减弱TGF-β1对上皮细胞的抑制作用,从而诱发恶性肿瘤.本文应用免疫组化SABC法(StreptAvidin-BiotinComplex)研究TGF-β1和p53蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达,旨在探讨两者的相互关系以及与病理分级、临床分期和预后的相关性.
关键词： 转化生长因子TGF-β1 抑癌基因p53 卵巢肿瘤 免疫组织化学 -
系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织TGF-β1的表达与临床病理意义
目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-pl,TGF-β1)蛋白在系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)肾组织中的表达及其临床意义.方法 应用即用型免疫组化方法(Elivision二步法)检测MsPGN 25例、微小、病变(MCNS)10例、局灶性节段肾小球硬化(FSGS)8例、对照组5例,观察TGF-β1蛋白在系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织中的表达情况.结果 (1)在不同病理类型患儿肾小球上皮细胞及肾小管间质细胞均有不同程度的TGF-β1蛋白的阳性表达,TGF-β1的表达以FSGS为强,其次为MsPGN,MCNS.与正常肾组织比较差异有统计学意义(P<0.001);(2)MsPGN组TGF-β1蛋白表达随着系膜增生程度明显增加(P<0.01);(3) MsPGN组随肾小管间质损伤和炎症细胞浸润程度及纤维化程度加重.TGF-β1蛋白表达明显增加(P<0.01),(4)MsPGN肾组织TGF-β1表达水平与蛋白尿严重程度相关.结论 MsPGN肾组织内TGF-β1的表达增强,并与肾脏病理损伤程度密切相关.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 儿童 转化生长因子TGF-β1 肾小管间质损伤 -
TGF-β1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响
目的:研究转化生长因子(TGF-β1)在体外对根尖牙乳头干细胞(SCAP)增殖和分化的影响.方法:采用酶消化法获得原代培养人SCAP,并对获得克隆化的SCAP进行免疫组化染色和多向分化能力的初步鉴定.用MTT比色法观察不同浓度的TGF-β1对细胞增殖情况,并通过检测ALP活性和矿化诱导后COL1、DSPP、OCN mRNA表达,分析TGF-β1对SCAP分化能力的影响.结果:5、10、20、40ng/mL组的TGF-β1在SCAP培养1周内可显著促进细胞增殖(P＜0.05)；在TGF-β1作用8 d后,细胞ALP活性增强(P＜0.05)；SCAP矿化诱导2周后,TGF-β1组中COL1、OCN、DSPP的mRNA表达上调(P＜0.05).结论:TGF-β1促进SCAP细胞增殖,并通过提高ALP活性和上调COL1,OCN、DSPP mRNA的表达促进SCAP分化.
关键词： 转化生长因子TGF-β1 干细胞 根尖牙乳头 增殖 分化
