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外源性单磷酸鸟苷环二聚体对变形链球菌基因表达的影响
背景 前期研究证实变形链球菌内部存在单磷酸鸟苷环二聚体信号通路,该通路介导变形链球菌的生物膜形成及在体外牙釉质表面的黏附.目的 以基因芯片技术分析单磷酸鸟苷环二聚体对变形链球菌生物学特性的影响.方法 以外源性单磷酸鸟苷环二聚体干预变形链球菌UA159,提取其总RNA,并以标准菌株的总RNA 作为对照,与变形链球菌全基因组芯片杂交,筛选差异基因.结果 与结论 外源性单磷酸鸟苷环二聚体干预后,变形链球菌中glgA、glgB、msmF、gftA、lacG、lepB、rgpAc、bacC 、apt69 个基因表达上调,Hrc、ProC、HprT、Pdp、Glk、cdsA 共6 个基因表达下调.所获得的差异基因主要与细胞趋向性和生物膜形成、信号转导、糖代谢、等途径相关.说明单磷酸鸟苷环二聚体影响变形链球菌的致龋性.
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外源性单磷酸鸟苷环二聚体抑制变形链球菌生物膜的形成能力
背景:有研究发现外源性的单磷酸鸟苷环二聚体(bis-(3'-5')-cyclic dimeric guanosinemonophosphate,c-di-GMP)能够抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成,且作用呈剂量依赖性.目的:观察外源性c-di-GMP对变形链球菌生物膜形成能力的影响.方法:将不同浓度(0,2,20,200,400 μmol/L)外源性c-di-GMP作用于变形链球菌生物膜48 h,使用酶标仪测定吸光度值,观测生物膜形成量的改变,以生理盐水作为阴性对照.同时在离体牙的新鲜釉质片上形成变形链球菌生物膜,以 200 μmol/L的c-di-GMP与生理盐水分别作用于生物膜48 h,扫描电镜观察结构的改变.结果与结论:与阴性对照组比较,c-di-GMP明显抑制了变形链球菌生物膜的形成,而且这种抑制成剂量依赖关系,当c-di-GMP浓度为200 μmol/L时,变形链球菌生物膜的形成能力下降了65%左右,达到400 μmol/L时,生物膜的形成能力几乎被完全抑制(P < 0.05).扫描电镜结果显示,c-di-GMP处理组细菌排列无明显规律,细胞外基质减少.表明c-di-GMP可以抑制变形链球菌的生物膜形成能力.
