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新型生物组织成像技术-光学CT对牙釉质早期脱矿检出效能的实验评价
在7颗新鲜拔除的离体人恒牙釉质光滑面制备2 mm×3 mm实验窗,选用pH 4.5的化学酸蚀液在开窗区制备0,12,24,48,72,96,120 h不同时间的早期脱矿人工龋模型,采用自行研发的口腔光学CT系统进行人恒牙早期牙釉质人工龋的体外检出实验研究,设立同一牙齿样本的临床显微摄影和扫描电镜观测对照,以扫描电镜超微组织学检出结果为金标准,评价光学CT体外检出牙釉质早期脱矿的效能.口腔光学CT系统可同时无创获得牙齿表面和截面的脱矿信息,准确检测到脱矿12 h以内微米量级的早期牙釉质表面组织学水平的改变,早于裸眼观察和临床显微摄影.光学CT对于不同酸蚀期实验窗早期脱矿的检出与扫描电镜表征完全一致.口腔光学CT可以牙齿表面快速扫描的方式,非接触、准确、量化地检出牙釉质早期人工脱矿,检出敏感度高,重复性好,可无创获得脱矿部位微米量级量化分析数据.
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山莨菪碱减轻TNF-α所致内皮细胞凋亡
目的:从转录因子水平观察山莨菪碱能否减轻TNF-α所致内皮细胞的凋亡,并探讨其机制是否与其抑制NF-κB活化有关.方法:培养小牛肺动脉内皮细胞(BPAEC),将山莨菪碱(0.2 mg/mL)加入细胞培养基中,30 min后再加入TNF-α(2500 U/mL)损伤24 h,采用Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并进行显微照相.采用Sellin法抽提细胞上清片段DNA及琼脂糖电泳,观察是否出现DNA梯状条带,用二苯胺法测定上清液及沉淀物中DNA含量,计算细胞DNA断裂百分率.BPAEC表达I-κBα及iNOS的Western blot印迹分析及用凝胶滞留法EMSA检测NF-κB活性.结果:山莨菪碱能明显减轻TNF-α所致的BPAEC凋亡,表现为荧光显微镜下凋亡细胞减少,未见明显梯状条带,DNA断裂百分率也明显减少.山莨菪碱抑制TNF-α所致的I-κBα的含量下降及NF-κB的活化,并抑制TNF-α所致的NF-κB从胞浆向胞核的移位.另外山莨菪碱能减少因TNF-α刺激所引起的BPAEC表达iNOS的增加.结论:山莨菪碱减轻TNF-α所致的内皮细胞凋亡,可能与山莨菪碱抑制NF-κB激活,从而抑制iNOS合成有关.
