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海藻酸钠/壳聚糖复合凝胶的制备与细胞毒性评价
背景：海藻酸钠和壳聚糖分别是聚阳离子和聚阴离子的天然高分子材料，二者可以互为交联剂形成复合凝胶，避免使用普通交联剂产生的细胞毒性。
目的：制备海藻酸钠壳聚糖复合凝胶并评价其体外细胞毒性。
方法：以0.25 mol/L乙酸溶解壳聚糖，制成质量浓度30 g/L溶液，再以0.1 mol/L的NaOH中和酸性得到壳聚糖絮状沉淀，将壳聚糖絮状沉淀与质量浓度3%海藻酸钠等比例混合，高频振动混匀，使二者形成复合凝胶。使用傅里叶变换红外光谱、扫描电镜分析观察凝胶成分和交联纤维网络结构。分别以海藻酸钠壳聚糖复合凝胶24，72 h浸提液、聚乙烯24，72 h浸提液及苯酚溶液培养L-929细胞，体外检测其细胞毒性。
结果与结论：傅里叶变换红外光谱检测到海藻酸钠壳聚糖复合凝胶特征性峰值改变，扫描电镜显示其内部形成丰富间隙的空间网络结构。浸提液法检测海藻酸钠壳聚糖复合凝胶的细胞毒性为合格，表明海藻酸钠/壳聚糖复合凝胶具有成为组织工程支架材料的良好条件。 -
海藻酸钠复合凝胶改善老龄急性心肌梗死大鼠心脏功能的实验研究
目的 观察包覆了胰岛素样生长因子1(IGF-1)和糖原合成酶激酶-3抑制剂(商品名:BIO)的海藻酸钠复合凝胶对老龄急性心肌梗死大鼠心脏功能的改善情况.方法 首先构建部分氧化的海藻酸钠凝胶,并通过纳米粒子接枝的方式在其中包覆IGF-1和BIO形成复合凝胶.然后制作老龄急性心肌梗死模型大鼠并随机分为3组:复合凝胶组(40例)、 海藻酸钠凝胶组(40例)、 盐水对照组(20例),并在每组大鼠的心肌梗死区注射相应材料.6周后通过超声心动图检测各组大鼠的心脏功能,后处死大鼠通过组织学方法评估各组心脏之间心室重构、 血管生成及胶原分泌的差异.结果 复合凝胶组和海藻酸钠组各项超声心动图指标均优于盐水对照组,复合凝胶组又优于海藻酸钠组,差异均有统计学意义(P<0.05);复合凝胶组和海藻酸钠组组织学检测中左室肌面积、 整个左室面积、 相对瘢痕厚度、 平均瘢痕厚度和扩张指数均优于盐水对照组,复合凝胶组又优于海藻酸钠组,差异均有统计学意义(P<0.05),其他指标在各组间差异无统计学意义(P>0.05);复合凝胶组和海藻酸钠组血管生成情况、 胶原分泌情况均优于盐水对照组,复合凝胶组又优于海藻酸钠组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 海藻酸钠复合凝胶能够明显改善老龄急性心肌梗死大鼠的心脏功能.
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局部应用NGF-胰岛素复合凝胶对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复的影响
目的 制备NGF-胰岛素复合凝胶并观察其对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响. 方法 以卡波姆980为基质,分别加入NGF 4 000 U、胰岛素800 U,制备胰岛素凝胶、NGF凝胶、NGF-胰岛素复合凝胶.观察NGF-胰岛素复合凝胶性状,并行体外药物释放检测.75只SPF级雄性Wistar大鼠,体重200～250 g,随机分为正常对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、局部胰岛素凝胶治疗组(C组)、局部NGF凝胶治疗组(D组)、局部NGF-胰岛素复合凝胶治疗组(E组),每组15只.B、C、D、E组大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(55 mg/kg)制备1型糖尿病模型,A组注射相同剂量柠檬酸钠缓冲液.造模成功后,采用恒温水浴箱法于各组大鼠背部制备深Ⅱ度烫伤模型.A、B组创面外敷空白凝胶基质,C、D、E组对应外敷胰岛素凝胶、NGF凝胶、NGF-胰岛素复合凝胶,每天换药1次.烫伤后观察各组大鼠存活情况,于3、7、11、15、21d观察创面愈合情况并计算创面愈合率,各时间点每组处死3只大鼠取皮肤全层标本行组织学及免疫组织化学染色观察. 结果 制各的NGF-胰岛素复合凝胶清亮透明,保湿性及黏附性良好,易于涂抹及清洗.体外释放检测示NGF-胰岛素复合凝胶释药时间可达24 h以上,且30 d内稳定性良好.各组大鼠均存活至实验完成.烫伤后3d各组创面无缩小,7、11、15、21d时E组创面愈合率高,B组低,与其余各组比较以及E、B组间比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).组织学观察示各时间点E组肉芽组织和胶原纤维生长均优于其余各组.免疫组织化学染色示各组CD34、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)均于3d开始表达,且随时间延长阳性细胞逐渐增多；各时间点E组微血管密度及PCNA高,B组低,与其余各组比较以及E、B组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 局部应用NGF-胰岛素复合凝胶可显著促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合.
