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局部应用NGF-胰岛素复合凝胶对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复的影响
目的 制备NGF-胰岛素复合凝胶并观察其对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响. 方法 以卡波姆980为基质,分别加入NGF 4 000 U、胰岛素800 U,制备胰岛素凝胶、NGF凝胶、NGF-胰岛素复合凝胶.观察NGF-胰岛素复合凝胶性状,并行体外药物释放检测.75只SPF级雄性Wistar大鼠,体重200～250 g,随机分为正常对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、局部胰岛素凝胶治疗组(C组)、局部NGF凝胶治疗组(D组)、局部NGF-胰岛素复合凝胶治疗组(E组),每组15只.B、C、D、E组大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(55 mg/kg)制备1型糖尿病模型,A组注射相同剂量柠檬酸钠缓冲液.造模成功后,采用恒温水浴箱法于各组大鼠背部制备深Ⅱ度烫伤模型.A、B组创面外敷空白凝胶基质,C、D、E组对应外敷胰岛素凝胶、NGF凝胶、NGF-胰岛素复合凝胶,每天换药1次.烫伤后观察各组大鼠存活情况,于3、7、11、15、21d观察创面愈合情况并计算创面愈合率,各时间点每组处死3只大鼠取皮肤全层标本行组织学及免疫组织化学染色观察. 结果 制各的NGF-胰岛素复合凝胶清亮透明,保湿性及黏附性良好,易于涂抹及清洗.体外释放检测示NGF-胰岛素复合凝胶释药时间可达24 h以上,且30 d内稳定性良好.各组大鼠均存活至实验完成.烫伤后3d各组创面无缩小,7、11、15、21d时E组创面愈合率高,B组低,与其余各组比较以及E、B组间比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).组织学观察示各时间点E组肉芽组织和胶原纤维生长均优于其余各组.免疫组织化学染色示各组CD34、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)均于3d开始表达,且随时间延长阳性细胞逐渐增多；各时间点E组微血管密度及PCNA高,B组低,与其余各组比较以及E、B组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 局部应用NGF-胰岛素复合凝胶可显著促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合.
