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PDX-1基因转染人脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病
背景:近年研究发现脂肪间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,在血糖平衡及激素产生方面也具有重要作用.目的:观察PDX-1基因转染脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞的分化能力及移植后对糖尿病大鼠的治疗效果.方法:采用腺病毒转染方法将PDX-1基因转入人脂肪间充质干细胞,双硫腙染色鉴定细胞分化情况,ELISA法检测细胞胰岛素分泌水平.从20只雄性SD大鼠中随机取4只作为对照组,注射生理盐水,其余16只按65 mg/kg的剂量注射链脲霉素建立糖尿病模型,再随机等分为移植组和糖尿病组,移植组大鼠尾静脉注射PDX-1基因转染脂肪间充质干细胞.结果与结论:①转染后15 d,转染组胰岛素阳性细胞数量、胰岛素分泌量均高于未转染组(P<0.05);②移植组大鼠空腹血糖水平显著下降(P<0.05),体质量明显增加(P<0.05),而糖尿病大鼠空腹血糖维持在较高水平,且体质量显著下降;③结果提示,导入PDX-1基因对人脂肪间充质干细胞分化为胰岛样细胞具有促进作用,PDX-1转染脂肪间充质干细胞移植能有效治疗大鼠糖尿病,但具体机制尚待进一步研究.
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PDX-1在人脂肪间充质干细胞分化为胰岛分泌细胞中的作用
目的:探讨胰十二指肠同源盒基因1(PDX-1)在人脂肪间充质干细胞(ADSC)分化为胰岛分泌细胞中的作用。方法取复苏冻存的 ADSC,随机分为实验组与对照组,实验组采用腺病毒转染方法将 PDX-1转入 ADSC,对照组无腺病毒感染。Western blotting 法检测实验组转染结果,ELISA 法检测两组细胞胰岛素分泌量,RT-PCR 法检测两组胰岛分泌相关基因 Ngn3和 Islet-1表达。结果转染 PDX-1的 ADSC 于48 h 后可检测到 PDX-1基因的转录,而对照组则无 PDX-1基因的转录。转染后15 d,实验组和对照组细胞在低糖环境下分泌的胰岛素量分别为(6.98±0.74)、(6.78±0.54)ng/mL,两组比较,P >0.05;高糖环境下分泌的胰岛素量分别为(13.38±0.62)、(6.50±0.66)ng/mL,两组比较,P <0.05。对照组中 Ngn3和 Islet-1不表达,实验组与对照组 Islet-1相对表达量分别为5.150±0.177、1.000±0.089,Ngn3相对表达量分别为5.819±1.629、1.000±0.120,两组比较,P 均<0.05。结论PDX-1基因对人脂肪间充质干细胞分化为胰岛样细胞有促进作用。
关键词: 糖尿病 脂肪间充质干细胞 腺病毒 胰十二指肠同源盒基因1 胰岛分泌细胞