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大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养：第3代细胞增殖快纯度高
背景：进行组织工程研究的首要环节是培养出大量生物活性好、增殖速度快、细胞纯度高的种子细胞。目的：分析全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性。
方法：采用全骨髓贴壁法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞，绘制第3代细胞生长曲线，观察各代细胞形态学变化，流式细胞分析法测定第2代、第3代细胞表面标志物(CD29、CD90、CD34、CD45)的表达。
结果与结论：经全骨髓贴壁法培养3代以内骨髓间充质干细胞均具有典型成纤维样细胞形态而且贴壁生长；第2代骨髓间充质干细胞表型CD29、 CD90、CD34、CD45表达分别为91.5%，96.2%，1.3%，8.0%，第3代骨髓间充质干细胞分别为98.2%，98.1%，0.6%，2.0%；细胞生长曲线结果表明，以细胞浓度8×107 L-1接种，细胞增殖速度快，获得的细胞总数多。综合形态学及细胞鉴定结果，第3代大鼠骨髓间充质干细胞活性好、增殖速度快、细胞纯度高，适合作为组织工程研究的种子细胞。 -
全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及优势
背景：骨髓来源的间充质干细胞含量极低，体外纯化、扩增活性好、分化潜能高的骨髓间充质干细胞，对进一步研究至关重要。
目的：进一步验证全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化骨髓间充质干细胞的生物学特性、表型及多向分化潜能。
方法：通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞，进行形态学观察，流式细胞仪检测细胞标记物表达，分别进行成骨、成脂诱导分化。
结果与结论：成功纯化、扩增了高细胞活性、高分化潜能的骨髓间充质干细胞。所得细胞呈成纤维细胞样；表达CD29、CD90，不表达CD45；成骨、成脂诱导分化后，茜素红染色、油红O染色阳性。证实全骨髓贴壁法操作简单、对细胞活性损伤小，可以得到高纯度、高活性、高分化潜能、生物学形态和特征稳定的骨髓间充质干细胞。 -
优化骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的研究
目的:探讨全骨髓贴壁培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的优化方法.方法:全骨髓贴壁法分离、体外培养原代大鼠骨髓MSC,种植后3h首次换液,培养前72 h内频繁换液；通过流式细胞学方法检测原代培养细胞的MSC特征性表面标记的表达及比例；通过体外培养诱导成脂、成骨、成软骨分化,确立原代培养骨髓MSC的多向分化潜能.结果:早期、频繁换液的方法分离培养大鼠骨髓MSC,P0 MSC以单克隆生长,呈典型漩涡状排列,细胞形态均一;P1细胞均一表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45；原代培养骨髓MSC具有成脂、成骨、成软骨分化潜能.结论:全骨髓贴壁法分离培养大鼠原代骨髓MSC,早期、频繁换液有助于在早期获得高纯度细胞,原代细胞具有多向分化潜能.早期、频繁换液的全骨髓贴壁法是体外分离培养骨髓MSC的优化方法.
