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骨桥蛋白及其受体在黄韧带骨化症黄韧带细胞中的表达及其意义
背景：黄韧带骨化症的机制尚不明确，骨桥蛋白可能是其骨化过程中重要的影响因素。目的：观察骨桥蛋白及其受体CD44、整合素β3在人黄韧带细胞及人骨化黄韧带细胞中的表达及其意义。方法：胸/腰椎后路减压术中取人骨化节段黄韧带组织和非黄韧带骨化黄韧带组织各8例，均来自成人，两组组织进行体外细胞分离、培养及鉴定，分别行骨桥蛋白、CD44、整合素β3免疫组织化学染色，用倒置相差显微镜观察结果，提取总RNA行半定量PCR检测。结果与结论：免疫细胞化学染色结果显示，黄韧带组织组中骨化节段黄韧带细胞骨桥蛋白、CD44、整合素β3表达强度均大于非黄韧带骨化组(P <0.01)。PCR检测结果显示，黄韧带组织组中骨化节段黄韧带细胞骨桥蛋白、CD44、整合素β3 mRNA表达强度明显强于非黄韧带骨化组(P<0.05)。结果表明，黄韧带骨化时黄韧带细胞中骨桥蛋白及其受体CD44、整合素β3基因表达均升高。
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丝裂原活化蛋白激酶信号通路在骨桥蛋白介导黄韧带骨化中的作用
背景:丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是生物体内重要的信号转导系统之一.课题组前期动物实验提示骨桥蛋白可介导黄韧带骨化的发生.目的:观察MAPK信号通路在骨桥蛋白介导黄韧带骨化中的作用.方法:将16例患者后路椎板切除手术中取得黄韧带标本分为黄韧带骨化以及非骨化两组,每组8例.通过免疫组织化学染色观察骨桥蛋白及其受体CD44、整合素的表达;利用骨桥蛋白对黄韧带细胞进行诱导,并利用蛋白印记方法检测丝裂素活化蛋白激酶信号通路分子的磷酸化激活情况,随后再利用SB203580和U0126阻滞剂分别阻断丝裂素活化蛋白激酶相应信号通路观察骨桥蛋白的诱导情况.结果与结论;①骨桥蛋白及其受体CD44及整合素的表达:骨化组的标本中均检测到骨桥蛋白及其受体CD44的表达,但未检测到整合素的表达,非骨化组中则未见到骨桥蛋白及其受体的表达;②MAPK信号通路变化:在骨桥蛋白的诱导作用下黄韧带细胞中骨化指标碱性磷酸酶及骨钙素表达增加(P＜0.05),同时骨桥蛋白能激活丝裂素活化蛋白激酶信号通路中的p38及ERKI/2信号分子的磷酸化(P＜0.05),但JNK氨基末端激酶的磷酸化激活并不明显.利用SB203580阻滞剂阻断p38的磷酸化可明显阻断骨桥蛋白诱导的黄韧带细胞的骨向分化(P＜0.05),而U0126阻滞剂阻断效果不明显;③结果证实,MAPK信号通路在骨桥蛋白介导黄韧带骨化中其重要作用,p38是诱导黄韧带细胞骨向分化的关键因子.
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牵张应力对人黄韧带细胞成骨分化的影响
目的 探讨牵张应力在胸椎黄韧带骨化症中的作用.方法 牵张应力作用于胸椎黄韧带细胞后,通过PNPP法、Real-time PCR等实验方法,观察牵张应力对黄韧带细胞成骨分化的影响.结果 牵张应力可以促进黄韧带细胞碱性磷酸酶活性增强,骨钙素的表达增高.结论 牵张应力可促进胸椎黄韧带骨化症黄韧带细胞向成骨方向分化.
