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胶原诱导性关节炎模型大鼠炎性细胞因子表达及白喉乌头的影响
背景：目前治疗类风湿关节炎主要的药物有慢作用抗风湿药、生物制剂及植物药物，植物药因价格便宜、不良反应小而越来越受到瞩目。
目的：观察胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β表达及白喉乌头对其表达的影响。
方法：将45只大鼠随机分为正常对照组8只、造模组37只，造模组于大鼠足跖及尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂建立胶原诱导性关节炎大鼠模型。造模成功后，随机选取24只造模成功大鼠进行后续实验，将其随机分为模型组、雷公藤组和白喉乌头组，每组各8只，每周对3个造模后干预组和正常对照组共4组大鼠进行关节炎评分。经过灌胃给药治疗4周后，通过免疫组织化学染色检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β在滑膜中的表达。
结果与结论：与模型组比较，治疗后白喉乌头组、雷公藤组关节炎评分明显降低(P<0.05)。肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β在模型组滑膜中表达明显高于正常对照组(P <0.05)，在白喉乌头组、雷公藤组中表达低于模型组(P<0.05)。结果证实，白喉乌头治疗类风湿关节炎的机制可能与其抑制肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β表达有关。 -
白喉乌头及其炮制品对佐剂致类风湿性关节炎大鼠的实验研究
目的 探讨白喉乌头及其炮制品对佐剂致类风湿性关节炎大鼠的影响.方法 本研究应用足趾容积测定仪检测致炎前和致炎后第7、14、21、28天大鼠致炎侧的关节肿胀度;通过X光片,观察其骨性变化,并对实验室常规指标进行检测分析;应用HE染色观察SD大鼠滑膜组织的病理学改变,并进行病理学评分;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、皮质醇(Hydrocortisone)水平.结果 造模7d后,与对照组相比,模型组大鼠关节肿胀度显著增加;给药21 d后,与模型组相比,各给药组关节肿胀度显著降低,其中以加辅料共煮法高剂量组肿胀度下降明显(P＜0.01);给药21 d后,给药组白喉乌头生品和加辅料共煮法炮制品与高压蒸法和加热水煮法炮制品间有差异(P＜0.05),但各剂量组间差异无统计学意义;血常规检测结果表明,与对照组相比,模型组各细胞总数明显增加;与模型组相比,各给药组细胞计数显著降低(P＜0.05),且各给药组间细胞计数有统计学差异(P＜0.05),但同一组内不同剂量间无统计学差异;X光片结果,与对照组比较,模型组关节炎大鼠软组织肿胀明显,关节间隙狭窄甚至消失,关节面模糊;各给药组与模型组相比,上述病变症状较轻;各给药组间相比,病变程度亦有差异,但同一组不同剂量间无明显差异;HE染色结果显示,与对照组相比,模型组滑膜细胞过度增生,关节间隙狭窄甚至消失;与模型组相比,给药组加辅料共煮法具有统计学差异;各给药组相比,加辅料共煮法与高压蒸法中剂量组具有统计学差异,与其他组间无统计学差异;血清学检测结果显示,与对照组相比,模型组皮质醇水平降低,CRP水平升高;各给药组与模型组相比,皮质醇水平升高、CRP水平降低(P＜0.05);各给药组比较,CRP水平有统计学差异(P＜0.05),其中加辅料共煮法高剂量组与其他给药组差异较显著.结论 白喉乌头及其炮制品对佐剂致类风湿性关节炎大鼠有不同程度的治疗作用,且综合上述各指标的检测结果显示,白喉乌头以加辅料共煮方法制备的炮制品在治疗类风湿性关节炎方面效果较显著.
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HPLC法同时测定白喉乌头中高乌甲素、乌头碱、新乌头碱
目的 采用HPLC法同时测定白喉乌头中氢溴酸高乌甲素及乌头碱、新乌头碱的量.方法 采用XBridgeTMC15生物碱专用色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05％冰醋酸(三乙胺,调pH为7.25)-乙腈为流动相梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温30℃,检测波长为235 nm,进样量10 μL.结果 白喉乌头中同时含有氢溴酸高乌甲素、乌头碱、新乌头碱生物碱类成分,其中氢溴酸高乌甲素的量相对较高,有一定的应用开发前景.结论 本办法结果可靠,操作简便,稳定性好.
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白喉乌头研究进展
对近年来关于白喉乌头资源调查、生药和显微鉴别、化学成分、急性毒性和炮制、指纹图谱研究情况做一总结，为使其成为一种具有法定标准的药材奠定基础，进而充分发挥其药效。
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新疆地区白喉乌头资源调查
目的:调查新疆白喉乌头的分布及资源概况,为其合理开发利用提供依据.方法:采取查阅文献、标本与实地调查的方法.结果:初步调查新疆北疆地区的伊犁、阿勒泰、塔城、博州,东疆地区的昌吉州、哈密、吐鲁番,南疆地区的巴音郭楞、阿克苏,乌鲁木齐周边地区的南山、达板城、呼图壁、柴窝堡、石河子、克拉玛依等地白喉乌头的分布状况和蕴藏量,并对其植物性状进行了鉴定和描述.结论:新疆北疆地区中伊犁和阿勒泰白喉乌头分布广,蕴藏量丰富,值得进一步合理开发和利用.
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不同产地哈药白喉乌头基因多态性的ISSR分析
目的:探讨白喉乌头种群间的遗传多样性和变异情况,并为乌头类药材之间的准确鉴定提供本质特征.方法:利用植物基因组提取试剂盒提取DNA,采用紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度,使用60个引物分别对10个不同产地的白喉乌头野生种群样本的基因进行ISSR分析,应用POPGEN32和NTSYS-PC对所得数据进行处理,得出不同产地白喉乌头的遗传相似系数和遗传距离,采用非加权平均法(UPGMA)进行聚类分析.结果:从60个引物中筛选出11个条带清晰、多态性明显并且重复性好的引物用于扩增,共扩增得到101个条带,其中多样性条带89条,多态位点百分率(PPB)为88.1％,Shannon多样性指数(I)为0.5298,遗传相似系数(H)为0.3648,观察等位基因数(Na)和有效等位基因数(Ne)分别为1.8911和1.6555,遗传一致度在0.4950～0.6931之间,遗传距离范围在0.3666 ～0.7031之间;根据ISSR聚类结果可将10个不同产地的白喉乌头聚为5大类群.结论:白喉乌头种质资源间具有很高的多态性,遗传变异较大;可为种质资源遗传多样性提供分子水平的依据,为构建DNA指纹图谱奠定基础.
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分光光度法测定新疆不同产地白喉乌头不同部位总生物碱的含量
目的:测定新疆不同产地白喉乌头不同部位总生物碱的含量.方法:采用分光光度法,以乌头碱为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,缓冲溶液pH 3条件下,三氯甲烷萃取45 min,于415 nm波长处测定其吸光度.结果:乌头碱在1.26～ 16.80 mg/L浓度范围内线性关系良好,回归方程y=22.506x-2.3916,r =0.9998;平均加样回收率为100.06％,RSD为1.66％.结论:新疆白喉乌头总生物碱的含量较高,其中以根部含量高,茎叶和花果实中总生物碱含量略低,但也均高于已有法定药材标准的草乌中总生物碱的含量,值得进一步合理开发利用.
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白喉乌头中生物碱的研究
目的 研究白喉乌头Aconitum leucostomum Worosch.中的生物碱.方法 采用柱色谱法分离纯化得到单体化合物,通过多种波谱方法鉴定其结构.结果 分离得到了10个生物碱,分别为:高乌甲素(I)、dehydroacosanine(Ⅱ)、冉乌碱(Ⅲ)、宋果灵(Ⅳ)、乌头碱(Ⅴ)、新乌头碱(Ⅵ)、去氧刺乌头碱(Ⅶ)、spicatine A(Ⅷ)、印乌碱(Ⅸ)、puberuline C(Ⅹ).结论 化合物Ⅴ～Ⅹ为首次从该植物中分离得到.
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新疆白喉乌头及其炮制品对小鼠的急性毒性实验研究
目的 研究新疆白喉乌头及其不同炮制品水煎液对小鼠的急性毒性.方法 通过对小鼠腹腔注射白喉乌头及其3种不同炮制品(2010版<药典>法炮制品、文献法炮制品、哈萨克族法炮制品)水煎液,观察并记录小鼠7 d内的活动情况及中毒反应;采用改良寇氏法(Karber法)计算白喉乌头及其炮制品对小鼠的半数致死量(LD50).结果 新疆白喉乌头生品及2010版<药典>法炮制品(药典法)、文献法炮制品(文献法)、哈萨克族法炮制品(哈萨克族法)的对小鼠的LD50依次为1.558、7.706、4.196、10.402 g/kg,毒性大小顺序为生品>文献法炮制品><药典>法炮制品>哈萨克族法炮制品;白喉乌头及其3种炮制品对小鼠的毒性表现基本相似,都有部分小鼠出现自由活动量减少,运动失调,抽搐,惊厥,反应低下,后肢强直,呼吸频率加快,心跳过快,腹泻,眼球突出,死前角弓反张等毒性症状.结论 新疆白喉乌头生品毒性较大,可通过炮制降低毒性,其中以<药典>法和哈萨克族法炮制品的毒性较小,初步表明哈萨克族法对白喉乌头的减毒作用好,有关白喉乌头炮制减毒的机制还有待于进行更深入研究.
关键词： 白喉乌头 炮制品 急性毒性 半数致死量(LD50) -
HPLC法测定新疆白喉乌头不同部位氢溴酸高乌甲素的含量
目的：比较新疆尼勒克地区白喉乌头不同部位（根、茎、叶）中氢溴酸高乌甲素的含量。方法采用X Bridge C18生物碱专用色谱柱（250 mm ×4．6 mm ，5μm），以0．04 mol/L醋酸铵-乙腈（63∶37）为流动相等度洗脱，流速0．8 mL/min ，柱温40℃，检测波长为252 nm ，进样量10μL高效液相色谱法测定白喉乌头根、茎、叶中氢溴酸高乌甲素含量。结果白喉乌头中氢溴酸高乌甲素在根中含量为0．2038mg/g，在叶中的含量为0．0611mg/g，在茎中的含量为0．0111 mg/g。结论白喉乌头根中氢溴酸高乌甲素含量高于叶和茎中，为白喉乌头资源的进一步利用奠定了一定基础。
