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首乌、川芎、甘草、侧柏叶对体外培养人头皮毛囊的影响
目的 探讨首乌、川芎等中药水提取物混合剂对体外培养人头皮毛囊生长的影响.方法 将体外培养的人头皮毛囊分别设为对照组和不同浓度的中药组.显微镜下观察各组毛囊毛发生长情况.结果 首乌、川芎、甘草、侧柏叶提取物混合剂中剂量组(100 μg/mL和200 μg/mL)可加速毛发生长,延长毛发生长长度和生长时间.高剂量组(1 000μμg/mL和2 000/μgmL)抑制毛发生长,同时缩短毛发生长时间.低剂量组(2 μg/mL和20 μg/mL)对毛发生长无明显作用.结论 中剂量首乌、川芎等提取物混合剂对体外培养的人头皮毛囊生长有促进作用.
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银屑病皮损免疫病理表型特征及其体外维持
目的研究银屑病皮损免疫表型及其体外维持.方法检测代表银屑病病理特征的蛋白分子,并观察培养后这些分子的变化.结果银屑病皮损中角蛋白16、17、转谷酰酶I、ICAM-1、HLA-DR、β1整合素及OKM-5增强表达,培养48h后和培养前基本相同.结论上述蛋白分子的共同表达构成了银屑病皮损的免疫表型,这种表型在跨膜皮肤器官模型中48h培养可得到良好的维持.
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角膜保存方法现状及进展
角膜内皮细胞(corneal endothelial cell, CEC) 是保证角膜正常生理功能的基础,角膜移植术后患者的视力恢复与角膜内皮细胞的活性有很大关系,保持供体角膜正常的自净状态和角膜内皮细胞的功能状态具有重要的临床意义.国内外目前有多种经典的角膜保存方法,明显延长了角膜保存的时间,提高了供体角膜的质量.本文将就供体角膜的保存方法的现状及其进展进行综述.
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器官培养角膜保存的现状及展望
器官培养角膜保存法经过不断改进和发展,临床应用取得了满意的效果,故越来越受到研究者的关注,现就该保存法近年来的发展作一综述,并对目前仍需解决的问题及其前景进行分析和展望.
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静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究
目的:观察静压力对体外培养髁突软骨细胞表达TGF-β1的影响.方法:解剖、培养SD大鼠髁突软骨,应用静压力加载装置对实验组软骨加载强度为10 kPa的持续静压力1 h.对照组除软骨不加力外,其它培养条件与实验组相同,加力完成后2 组同时收集样本.用免疫组化技术检测2-实验组和对照组髁突软骨TGF-β1的含量和分布,用彩色病理图像分析仪检测髁突软骨各层TGF-β1表达的强度.结果:实验组的髁突软骨各层细胞TGF-β1表达均增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).其中成软骨细胞层改变明显(P＜0.01).结论:静压力促进髁突软骨各层细胞TGF-β1表达增强,其中成软骨细胞层表达增强为明显.
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小鼠牙胚发育在下颌弓培养模型中的动态观察
目的:建立研究牙胚发生、早期发育的研究模型.方法:取11 dpc胎鼠下颌弓,用Trowell培养系统进行培养.培养1、3、5、7、9、11d后进行常规HE染色,观察牙胚的发生发育过程.结果:下颌弓生长良好,可动态地观察到牙胚发生以及发育至帽状期的过程.结论:小鼠下颌弓体外培养模型是研究牙胚形态发生和早期发育的有效工具.
关键词： 器官培养 牙胚 牙发生 Trowell器官培养系统 -
应用牙器官培养模型评价粘结剂的生物相容性
目的:应用大鼠全牙器官培养模型对两种牙科粘结剂进行生物相容性评价.方法:在新鲜拔除的4周龄SD大鼠切牙唇面制洞,随机分成3组:对照组(不涂粘结剂)；AP组(涂Adper Prompt粘结剂)和PB组(涂Prime &Bond NT粘结剂),3组洞壁做相应处理后光照10 s后填入树脂,分别于术后即刻和体外全牙培养1周两个时间点,40 g/L多聚甲醛(PBS)固定,100 g/L甲酸脱矿,常规切片,HE染色进行组织学观察,并采集图像进行细胞计数及统计学分析.结果:术后即刻与对照组相比,PB组制洞部位下方的牙髓细胞发生聚集,AP组则表现为成牙本质细胞的细胞数减少,两种细胞均发生形态改变.术后培养1周时与对照组相比,AP组制洞部位下方的牙髓内牙髓细胞坏死,而PB组则表现为成牙本质细胞的细胞数目减少,两种细胞均发生形态改变.结论:两种牙科粘结剂均对牙髓组织有毒性作用,早期AP的毒性大于PB.
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黏结剂直接盖髓体外实验研究
目的:采用器官培养模型方法,评价自酸蚀黏结剂直接盖髓后的牙髓反应.方法:取临床上因正畸拔除的健康完整新鲜前磨牙30个,随机分为3组,制备<牙合>面洞,机械露髓,分别用自酸蚀黏结剂Xeno Ⅲ和氢氧化钙Dycal盖髓,复合树脂充填窝洞,余1组不做任何处理作正常对照,然后将牙齿纵向切割成2mm厚的牙片,DMEM体外培养3、7、14 d,分别进行HE检测和免疫组化检测.结果:HE显示术后3 d各组均表现为成牙本质细胞排列紊乱、毛细血管扩张;术后7、14 d牙髓逐渐恢复正常,3组均无牙本质桥形成,对照组釉质、牙本质、牙髓呈有序结构.免疫组化结果显示:术后3 d两组成牙本质细胞、露髓孔下方部分牙髓组织中DSPP均呈阳性表达,7、14 d表达同正常对照组.结论:自酸蚀黏结剂Xeno Ⅲ和氢氧化钙在短期内对牙髓组织刺激反应相似.
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L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对人牙本质形成的影响研究
目的:采用人牙齿切片体外器官培养的方法研究L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对牙本质形成的影响.方法:收集年轻人健康前磨牙,用慢速切锯制备2 mm厚的牙齿横切片,将在L型钙离子通道αl亚基D亚型多克隆抗体中浸泡过的琼脂糖微球与在PBS液中浸泡过的琼脂糖微球对称放置在牙片上,将切片用含琼脂糖的半固体培养基包被后采用Trowel器官培养方法培养1周,观察其对牙本质形成和矿化的影响.结果:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体组四环素线状荧光带较对照组变细,von Kossa染色前期牙本质处球状矿化也较对照组减少,I型胶原免疫组化染色显示实验组与对照组无明显区别.结论:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体能够影响牙本质的矿化,但对牙本质基质的合成和分泌无明显影响.该结果提示成牙本质细胞膜上的L型钙离子通道α1亚基D亚型对牙本质矿化过程中的钙离子转运有重要作用.
关键词： 器官培养 L型钙离子通道α1亚基D亚型 矿化 牙本质形成 -
氟化物作用下体外培养人牙胚内釉上皮细胞中Smad4表达的变化
目的:观察不同浓度的氟化物对体外培养的人牙胚内釉上皮细胞中Smad4表达的影响,从细胞内信号转导水平探讨发生氟牙症可能的细胞内机制.方法:Trowell法体外培养人牙胚,用10 mg/L和 25 mg/L的氟分别刺激培养的牙胚,免疫组化观察结果.结果:免疫组化结果经图像分析显示10 mg/L组从第8天,25 mg/L组从第4天开始内釉上皮细胞中Smad4的表达低于对照组.结论:观察到,氟化物能抑制体外培养的人牙胚内釉上皮细胞中Smad4表达.提示:氟可能通过抑制Smad4分子来干扰上皮和间充质之间正常的信号转导,进而使釉质的分化发育受到影响.这有可能即是氟牙症发生的细胞内机制之一.
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甲状旁腺激素对体外培养的大鼠牙胚分化的影响
目的:观察甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)对体外培养17d的胎鼠下颌第一磨牙牙胚分化发育的影响,探讨PTH在成牙本质细胞分化和牙本质形成中的作用.方法:器官培养、组织学观察和透射电镜观察.结果:体外培养的牙胚可出现成牙本质细胞分化和牙本质形成.PTH可促进成牙本质细胞的分化,细胞分化的程度和速度均高于对照组;在PTH的作用下,细胞的超微结构观察发现细胞分化良好,明显处于功能活跃状态.结论:牙胚培养在观察生长因子对牙齿发育的作用研究是有效的,PTH在牙齿发育中具有一定的促进作用.
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牙本质牙髓复合体的形成研究(三)牙本质牙髓复合体的离体形成研究
细胞培养、器官培养、干细胞及组织工程等生物工程新技术的迅猛发展为牙本质牙髓复合体的形成研究提供了新的平台,使体外构建生物活性组织或器官成为可能.本文主要阐述了采用这些新技术进行牙本质牙髓复合体离体形成研究的进展.
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人牙胚体外器官培养模型的建立
目的: 建立人牙胚体外器官培养模型. 方法: 分泌前期人牙胚采用Trowell型支架培养法,RPMI 1640培养基(含200 g*L-1FBS, 200 mg*L-1谷氨酰胺,200 mg*L-1 L-抗坏血酸,1×10-7 mol*L-1维甲酸,100 kU*L-1青霉素,100 kU*L-1链霉素),在37℃,50 mL*L-1 CO2+950 mL*L-1空气条件下进行培养,每48 h更换一次培养基.体外培养.2,4,6和8 d随机抽取牙胚进行组织学观察. 结果: 培养的牙胚组织结构关系与对照组一致,牙尖部形态进一步突出,细胞形态典型.在8 d时,牙尖之间部分造釉器细胞和成牙本质细胞开始出现坏死. 结论: 为体外研究人类牙齿正常发育及各种因素对牙齿发育的影响提供了一个实用的模型.
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佛波酯对体外培养大鼠前庭上皮PKC表达的影响
目的观察体外培养条件下蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在佛波酯(phogrbol 12-myristate 13-acetate, PMA)诱导下大鼠前庭上皮的表达和分布特点. 方法取新生大鼠椭圆囊,建立体外前庭器官培养模型,采用免疫组织细胞化学的方法,以PKCβ,γ抗体为标记物,检测PMA诱导后前庭上皮PKCβ,γ的表达变化和分布特点. 结果 PKCβ,γ在正常培养新生大鼠前庭上皮细胞的细胞膜及细胞质中有弱表达. PMA作用后,其表达逐渐增多,PKCβ1主要位于细胞膜,在30 min时表达强,其后逐渐减少,45 min仍高于正常(P<0.01). PKCβ2不但位于细胞膜,而且在纤毛亦明显表达; PKCγ在PMA诱导后胞质表达增加. 在毛细胞层和支持细胞层均有,主要位于毛细胞层. 结论体外前庭器官培养在PMA诱导后, PKC各亚型激活的形式及程度不同.
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氟化物对体外器官培养人牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响
目的观察氟对牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响.方法采用人牙胚体外器官培养模型,组织学观察低浓度(10 mg*L-1)和高浓度(25 mg*L-1)氟对细胞增殖的影响;免疫组织化学及图像分析技术检测氟对细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞增殖核抗原(PCNA)表达的影响.结果氟处理组细胞增殖受抑,cyclinD1和PCNA的表达显著降低(P＜0.01).结论氟化物可能通过抑制cyclinD1和PCNA的表达引起细胞增殖抑制,导致牙胚发育异常.
