首页 > 文献资料
-
Dicer基因对卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移能力的影响
目的 探讨Dicer基因抑制对卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移能力的影响,明确Dicer基因在卵巢癌生物学行为中的作用.方法 利用脂质体分别将Dicer基因的小干扰RNA(Dicer-siRNA)及阴性对照(negative control-siRNA,SKOV3-siNC)转染SKOV3细胞.采用实时荧光定量PCR及蛋白印迹法检测SKOV3细胞Dicer的mRNA及蛋白的表达,MTT法检测SK-OV3细胞的生长活性,Brdu实验检测SKOV3细胞的增殖活性.Transwell小室测定SKOV3细胞体外迁移能力.结果 实时定量PCR及蛋白免疫印迹实验结果显示,干扰组(SKOV3-siDicer)Dicer mRNA及蛋白表达下降,差异有统计学意义(P＜0.001).MTT法检测表明,在种板后第3、第4、第5天与对照组细胞比较,siDicer转染的SKOV3细胞增殖能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05).Brdu实验发现,与对照组细胞比较,siDicer转染的SKOV3细胞增殖能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05),细胞的增殖活性平均上升了29％.与对照组siNC-SKOV3细胞的穿膜细胞数相比,抑制Dicer表达的siDicer-SKOV3细胞的穿膜细胞数增加(4.28±0.16)倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Dicer基因具有抑制卵巢癌细胞增殖和迁移的能力.
-
Dicer在舌癌细胞中的表达及意义
目的 探讨Dicer基因在口腔上皮细胞和舌鳞癌细胞中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学技术(SV-0002两步法)、蛋白印迹分析(Western blot)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测人口腔上皮细胞和舌鳞细胞株Tca-8113、UM-l中Dicer的蛋白质和mRNA表达.结果 Dicer在口腔上皮细胞中的蛋白质和mRNA表达高于Tca-8113和UM-1,Tca-8113的蛋白质表达水平高于UM-1.结论 Dicer在舌鳞细胞株中的表达较正常口腔上皮细胞者下降,且其低表达可能促进了舌鳞癌的发展.
-
靶向Dicer的RNA干扰对卵巢癌细胞生物学功能的影响
目的 探讨Dicer抑制对卵巢癌细胞A2780增殖和迁移能力的影响,以进一步明确Dicer在卵巢癌生物学行为中的作用.方法 合成Dicer的小干扰RNA(Dicer siRNA)转染A2780细胞并筛选有效siRNA,实时定量PCR(RT-PCR)检测Dicer的mRNA的表达,蛋白印迹法检测Dicer蛋白的表达,MTT检测细胞生长活力,Transwell小室检测细胞迁移能力,流式细胞仪测定细胞周期.结果 与未转染组相比,siRNA1658转染组Dicer基因mRNA的表达低,为(0.194±0.002),明显低于siRNA1897转染组的(0.535±0.015),差异有统计学意义(P<0.001),但与siRNA334组的(0.251±0.014)相比,差异无统计学意义(P>0.05).实时定量PCR结果显示,以未转染A2780细胞Dicer mRNA表达水平为100%,siDicer-A2780细胞Dicer的mRNA水平相对下降(0.157±0.012),差异有统计学意义(P<0.001).以未转染A2780细胞Dicer的蛋白表达水平为100%,siDicer-A2780细胞Dicer的蛋白水平相对下降(0.153±0.021),差异有统计学意义(P<0.001).在种板后第3天、第4天、第5天,与对照组细胞比较,siDicer转染的A2780细胞增殖能力增强(P均<0.05).与对照组转染siNC的细胞相比,转染siDicer 96 h后,siDicer-A2780细胞的增殖活性平均上升了23%.细胞周期分析结果显示siDicer-A2780细胞中G0/G1期占(44.26±0.48)%,S期占(25.05±1.20)%,G2/M期占(21.53±0.77)%;对照组siNC-A2780细胞中G0/G1期占(52.79±1.11)%,S期占(20.01±1.22)%,G2/M期占(19.80±0.24)%.siDicer-A2780细胞S期和G2/M细胞较对照组明显增加(P均<0.05),而G0/G1期细胞则减少(P<0.001).与对照组siNC-A2780细胞的穿膜细胞数相比,抑制Dicer表达的siDicer-A2780 细胞的穿膜细胞数增加(3.99±0.29)倍(P<0.001).结论 Dicer基因具有抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭的能力.
-
Dicer基因多态性与肿瘤易感性的meta分析
目的：探讨MicroRNA合成通路相关基因Dicer基因rs1057035 T＞C多态性与肿瘤易感性的关系。方法根据关键词全面搜索中英文数据库，依据纳入和排除标准筛选合适文献并提取所需数据，用RevM an5．1软件对数据进行合并分析，计算合并的优势比（OR）及其95％置信区间（95％ C I）。结果经筛选总共纳入10篇与Dicer基因多态性与肿瘤易感性相关的病例对照研究，meta分析结果显示Dicer基因3′端非编码区多态性位点 rs1057035突变碱基C能够降低肿瘤的罹患风险，OR＝0．92，95％ C I为0．87～0．97，P＝0．003。结论 Dicer基因rs1057035 T＞C可能与肿瘤的易感性存在相关性。
-
人类ARGONAUTE和DICER基因家族在结肠癌中的表达分析
目的 研究分析人类ARGONAUTE和DICER基因家族在结肠癌中的表达意义.方法 通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)测定人类ARGONAUTE和DICER基因家族在结肠癌组织和癌旁组织中的表达.结果 与癌旁组织比较,结肠癌组织中AGO2表达明显上调,其他AGO基因表达均明显下调,DICER家族表达均明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ARGONAUTE和DICER家族的异常表达表明其可能参与结肠癌的发生、发展.
-
miRNA成熟关键基因DROSHA和DICER的多态性与无精症的相关性
目的 探讨miRNA成熟关键基因DICER和DROSHA多态性与男性无精症的相关性.方法 应用PCR-限制性片段长度多态性技术,检测330例原发性无精症和282名正常生育男性DICER基因rs3742330和DROSHA基因rs10719多态位点的基因型和等位基因频率.结果 病例组中DICER基因rs3742330位点A等位基因频率显著高于对照组(72.0％ vs.64.4％),差异有统计学意义(P=0.004),病例组DICER基因rs3742330位点AA基因型频率高于对照组(53.0％vs.41.8％,95 ％CI:1.071～3.124),差异有统计学意义(P=0.027),而DROS HA基因rs10719位点等位基因频率及基因型频率在两组间的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DICER基因rs3742330位点多态性与无精症有关联,rs3742330 AA基因型可能与无精症的发生存在关联.
-
Dicer基因在女性生殖中的作用及研究进展
Dicer蛋白可引起微小RNA(micro RNA,miRNA)和小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的产生,通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径进行转录或转录后基因调控.Dicer基因在卵母细胞成熟、发育和胚胎植入、早期胚胎发育、性激素分泌等生殖事件中发挥作用.Dicer功能缺陷可导致女性生殖系统结构和功能异常.本文就Dicer基因在女性生殖系统中的作用及研究进展作一综述.
