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人畸胎瘤衍化生长因子原核表达载体的构建及表达
目的:构建人畸胎瘤衍化生长因子(teratocarcinoma-derived growth factor-1,TDGF-1)原核表达载体,进一步探讨其生物学作用及机制.方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,利用TDGF-1特异性引物通过RT-PCR方法扩增TDGF-1 cDNA,克隆入pHB载体中,构建重组载体pHB-TDGF-1.将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,并通过SDS-PAGE及免疫印迹法对表达产物进行鉴定.结果:酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,所构建的重组载体可在大肠杆菌中高效表达TDGF-1.结论:该研究成功构建了人TDGF-1原核表达载体,并能够在大肠杆菌中有效表达TDGF-1,为进一步研究TDGF-1的生物学功能及其机制奠定了基础.
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PEBP4、CR-1在食管癌中表达的临床意义
目的：探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4（ PEBP4）、畸胎瘤衍化生长因子（ CR-1）在食管癌组织中表达的临床意义。方法选取食管癌组织（癌组织组）及正常食管黏膜组织（正常组）各30份，分别采用免疫组化法、蛋白质印迹法检测各组PEBP4、CR-1表达水平。结果癌组织组PEBP4表达阳性率为83．3％，显著高于正常组的20．0％（ P＜0．05）；有淋巴结转移及远处转移的癌灶PEBP4表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶（P＜0．05）。癌组织组CR-1表达阳性率为86．7％，显著高于正常组的16．7％（P＜0．05）；有淋巴结转移及远处转移的癌灶CR-1表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶（ P＜0．05）。癌组织组CR-1 mRNA及其蛋白相对表达水平均显著高于正常组（ P＜0．05）。结论食管癌组织中PEBP4、CR-1阳性表达率较高，对食管癌的早期诊断及预后判断有较高临床价值。
关键词： 食管癌 磷脂酰乙醇胺结合蛋白4 畸胎瘤衍化生长因子 免疫组化法 蛋白质印迹法
