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抗CK20单克隆抗体文献资料
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CK20单克隆抗体研制及鉴定
目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,后用双向琼脂扩散法、Western blot和间接ELISA法鉴定抗体的特异性、Ig亚型和效价.结果:获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,染色体众数为101(99~103),其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1:106,属IgG1亚型.结论:成功获得了CK20单克隆抗体,命名为L20031030,其特异性强,效价高.
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CK20单克隆抗体的制备及鉴定
0 引言研究CK20表达用于诊断和评估膀胱肿瘤,已成为国内外研究热点之一. 但目前国内的抗CK20 mAb一直依赖进口,价格昂贵且不便运输,严重影响其推广应用和研究. 我们于2002年成功地从膀胱癌T24细胞系中提取CK20抗原[1],我们采用CK20抗原通过杂交瘤技术制备抗CK20 mAb,为进一步研制CK20 mAb胶体金试剂盒筛查膀胱癌奠定基础.