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可溶性PD-1酶联检测试剂盒的研制及其应用
目的:建立人的可溶性PD-1(sPD-1)酶标检测试剂盒并探讨其检测的临床意义.方法:在已成功获得两株识别位点不同的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2和5F10)的基础上,采用该室制备的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2)作为包被抗体,应用本室制备的单抗5F10经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sPD-1酶标检测方法,并对健康供血员、甲亢、血液病患者的血清中sPD-1的含量进行了检测.结果:成功研制了人sPD-1酶联检测试剂盒,其灵敏度为200.00pg/ml.该试剂盒4℃放置1个月,离散度(CV%)＜±5.17,回收率为95%～115%,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性.用该试剂盒测得血清中sPD-1的正常值为1.103±0.240 ng/ml,再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量明显高于正常对照组,而甲亢和器官移植病人血清中sPD-1的含量和正常值相比没有显著差异(P＜0.05).结论:成功研制了检测人sPD-1酶标检测试剂盒,并首次发现再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量较高,该试剂盒在临床病人sPD-1的检测中具有潜在的应有价值.
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对HBsAg酶联免疫吸附试剂盒二次利用的探讨
目的探讨HBsAg酶联免疫吸附试剂盒二次利用的可行性.方法利用乙型肝炎表面抗原酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒使用后的反应板进行二次利用. 结果对363份HBsAg阳性标本和159份HBsAg阴性标本,用首次使用的反应板和二次利用的反应板进行了对比检测,阳性符合率为100%,阴性符合率为98.7%(χ2=0.019,P＞0.05).二次利用前、后的实验结果差异无显著性意义. 结论对乙肝表面抗原酶联免疫吸附试剂盒可以进行二次利用,是一项保质保量的开源节流的方法.并可推广到HBsAb、HBeAg等双抗体夹心法的检测中.
