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Lactobacillus casei胞外多糖对体外培养的巨噬细胞分泌TNF-α、NO及IL-10的影响
目的:探究干酪乳杆菌胞外多糖(EPS)对体外培养的小鼠腹腔来源巨噬细胞分泌炎症相关因子的影响.方法:采用倒置显微镜,观察干酪乳杆菌EPS对腹腔来源巨噬细胞形态的影响;采用双抗体夹心ELISA和Griess法,分析干酪乳杆菌EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌促炎症因子TNF-α、NO及抗炎症因子IL-10的变化.结果:EPS能够抑制由脂多糖导致的巨噬细胞形态的变化,与空白组相比,350、400和450 μg/ml EPS均能提高TNF-α、NO及IL-10的分泌量.脂多糖(Lipopolysac-charide,LPS)能诱导TNF-α和NO的分泌,抑制IL-10的分泌.350、400和450 μg/ml EPS能抑制由10μg/ml脂多糖诱导的TNF-α和NO的分泌,促进LPS抑制的巨噬细胞分泌IL-10,且呈剂量依赖关系.结论:干酪乳杆菌EPS能双向调节体外培养的腹腔巨噬细胞分泌炎症相关因子功能.
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L.casei EPS体外促进Balb/c小鼠小肠上皮细胞增殖及其分泌IL-8、IL-10和TGF-β
目的 以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)为研究对象,研究其在体外对Balb/c小鼠小肠上皮细胞(small intestinal epithelial cell,IECs)增殖及其分泌IL-8、IL-10和TGF-β的影响.方法 利用嗜热菌蛋白酶消化联合差速贴壁以及免疫细胞化学鉴定的方法对Balb/c小鼠IECs进行分离和鉴定,获得实验用的IECs.用不同质量浓度的L.caseiEPS与IECs共培养,分别观察0.5、1、2h和4h后IECs的增殖情况.当用不同质量浓度的L.casei EPS处理IECs 2 h后,采用双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清液中细胞因子IL-8、IL-10和TGF-β的质量浓度.结果 嗜热菌蛋白酶消化联合差速贴壁的方法能够获得纯度高与活性好的IECs;L.casei EPS能够促进IECs的增殖,显著上调上清液中IL-8、IL-10和TGF-β的分泌水平(P＜0.05),EPS质量浓度在0～150 μg/ml范围内呈剂量依赖关系,并且在150 μg/ml的质量浓度时达到大值.结论 L.casei EPS能够促进IECs的增殖及IL-8、IL-10和TGF-β的分泌水平.
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Lactobacillus casei胞外多糖对Balb/c小鼠FKN和MIP-3α及其骨髓来源树突状细胞受体的影响
目的 探讨干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)胞外多糖影响树突状细胞迁移的机制.方法 利用细胞因子诱导的方法获得骨髓来源树突状细胞(BMDCs).体外实验为干酪乳杆菌胞外多糖(EPS)处理DCs 24 h后,采用双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清液中趋化因子受体CCR6和CX3CR1的数量;体内实验为胞外多糖腹腔注射Balb/c小鼠12h后用采用双抗体夹心ELISA法检测小鼠血液中趋化因子FKN和MIP-3α的分泌量.结果 体外实验中,经胞外多糖处理的DCs受体CCR6和CX3CR1数量增加极显著(P＜0.01),并且与胞外多精的浓度呈剂量依赖性;体内实验中,经胞外多糖处理的小鼠血液中FKN和MIP-3α含量增加极显著(P＜0.01),并且在50 mg/kg注射量时达到大.结论 胞外多糖能够增加血清中FKN和MIP- 3α的含量,并能增加BMDCs受体CCR6和CX3CR1的数量.
