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金丝桃苷增强人γδT细胞增殖及杀伤功能研究
目的：研究金丝桃苷对人γδT细胞增殖及功能的影响。方法：以异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的金丝桃苷处理，CCK-8法检测细胞增殖。 LDH法检测金丝桃苷对前列腺癌细胞DU-145的杀伤活性。流式细胞仪检测处理前后γδT细胞上穿孔素、颗粒酶、CD107 a、IFN-γ的表达情况。结果：异戊烯焦磷法能在体外成功培养出高纯度的γδT细胞。金丝桃苷在μg／ml范围内可显著促进γδT细胞增殖。金丝桃苷作用于γδT 细胞后杀伤DU-145的能力明显增强，且在3.13～12.5μg／ml浓度时γδT 细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达显著升高，与对照组相比有统计学差异。金丝桃苷对γδT细胞上CD107 a的表达无明显影响。结论：金丝桃苷通过增强γδT细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达来增强其杀伤DU-145的作用。
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脂质体法pcDNA3-ELAC2质粒转染乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231以及前列腺癌细胞Du-145
目的:构建稳定、高效表达ELAC2基因的乳腺癌细胞模型MCF-7/ELAC2、MDA-MB-231/ELAC2,以及前列腺癌细胞模型Du-145/ELAC2,为探索ELAC2基因的生物学功能奠定实验基础.方法:将构建pcDNA3-ELAC2的质粒采用脂质体法转染乳腺癌细胞和前列腺癌细胞,用RT-PCR和Western Blot分别检测ELAC2基因在细胞中的mRNA表达和蛋白表达.结果:pcDNA3-ELAC2质粒构建成功并顺利导入乳腺癌细胞和前列腺癌细胞中,且检测到ELAC2基因的mRNA和蛋白高表达.结论:构建的pcDNA3-ELAC2重组质粒能够在转染的乳腺癌细胞和前列腺癌细胞中稳定、持续和高效地表达,为进一步研究ELAC2基因的生物学功能提供了理想的实验模型.
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依立雄胺对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU-145的作用
目的 为研究依立雄胺治疗前列腺癌的可能性及可能机制,探讨依立雄胺体外对人激素非依赖型前列腺癌细胞(DU-145)生长的作用.方法 用2.5,5,10,20和40μM的依立雄胺作用DU-145细胞3天后,用普通倒置显微镜进行细胞形态学观察；用黄酰罗丹明B法(SRB法)评价依立雄胺对前列腺癌细胞株DU-145的体外增殖抑制作用绘制的生长曲线；应用流式细胞仪评价依立雄胺对对前列腺癌细胞株DU-145的周期阻滞作用.结果 40 μM和20 μM的依立雄胺作用DU-145细胞3d后,可使其明显的皱缩凋亡；依立雄胺对DU-145呈现明显的浓度依赖的体外增殖抑制作用；通过流式细胞仪分析发现,依立雄胺对DU-145呈现明显的浓度依赖的周期阻滞作用.
