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猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体的制备与鉴定
目的:建立抗血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP-1)脂多糖(LPS)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后建立该菌的分型诊断技术奠定基础.方法:腹腔注射APP-1标准株的甲醛固定抗原免疫BALB/c 小鼠,ELISA检测血清中LPS抗体滴度并选择值高的小鼠用于细胞融合,且于融合前3天加强免疫1 次.常规方法进行融合,HT、HAT 培养液选择培养融合后的细胞, ELISA检测细胞培养上清中的LPS抗体, 阳性杂交瘤细胞用有限稀释法克隆传代.结果:获得3 株稳定分泌抗APP-1 LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其小鼠腹水单克隆抗体效价1∶ 16 000～1∶ 32 000.结论:已成功建立3 株稳定分泌抗APP-1 LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其产生的单克隆抗体与呼吸道其它常见致病菌及APP-3,5,7,9,型无交叉反应.
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猪胸膜肺炎放线杆菌血清1和5型交叉免疫保护研究
目的 探讨猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)不同血清型间交叉免疫保护的关系.方法 以1型和5型APP参考菌株为实验对象,分别测定半数致死量(LD50),制备灭活细菌抗原和活菌抗原,免疫昆明小鼠,检测ELISA抗体水平及交叉免疫反应,并分别以10 LD50 1型和5型APP菌进行攻击,观察小鼠保护力.结果 1型和5型APP菌对小鼠的半数致死量分别为8.0×105.3和5.1×103.83 CFU/LD50,死菌抗原和活菌抗原免疫小鼠均可产生高滴度抗体,且1型与5型间存在较强的交叉免疫反应.死菌抗原和活菌抗原免疫小鼠均能对本型APP菌攻击产生保护,保护率在80%以上.1型活菌免疫小鼠对5型菌攻击保护率为70%,5型活菌免疫小鼠对1型菌攻击保护率为90%,1型、5型死菌免疫小鼠对5型、1型菌交叉攻击均无保护作用.结论 1型、5型APP活菌和死菌免疫小鼠均可对本型菌攻击产生保护,两型间存在较强的交叉免疫反应,但只有活菌免疫可以产生较好的交叉免疫保护,死菌免疫不能产生交叉免疫保护.
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猪胸膜肺炎放线杆菌分子生物学研究进展
猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuro-pneumoniae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎(Por-cine infectious pleuropneumonia)的致病菌,属于巴氏杆菌科嗜血杆菌属.猪胸膜肺炎放线杆菌是一种革兰氏阴性杆菌,具有很高的致病性,由本菌引起的猪接触性传染性胸膜肺炎是猪的呼吸道传染病,各种年龄的猪均易感,本病在临床上常见,一旦发生感染则很难从猪场中根除.
