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人参皂苷 Rd的抗癌机制研究进展
人参皂苷Rd是二醇型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物之一，是三七、人参、绞股蓝等的提取物，具有广泛的生物活性。对心脑血管、神经系统、免疫系统及抗肿瘤方面等作用独特。由于人参皂苷Rd的药理作用的多样性和安全性，已成为人们关注的焦点，但因人参皂苷Rd的结构复杂，化学合成至今尚未成功，需从植物药中提取以满足医疗和科研的需要，但因植物中人参皂苷Rd的量较低，从植物中提取的方法难以满足需要。因此，国内外着重对有效获取人参皂苷Rd方面进行了大量研究，而忽略了其本身的抗癌功效。肿瘤防治现已成为世界性难题，据专家预测，由于我国目前环境污染和吸烟问题仍然严重，在2025年前癌症总的发病率不大可能下降，所以癌症是一个必须面对的多发病、常见病，而人参皂苷Rd由于其天然、价廉、低毒性，且在诱导癌细胞凋亡方面疗效显著，为抗癌药物新药开发提供了新的道路。故本文对人参皂苷Rd的抗癌机制研究进行了详细综述，旨在为人参皂苷Rd防治肿瘤及放化疗毒副反应提供理论依据。
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脂质体转染TRPM7siRNA对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响
目的 利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响.方法 通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞佳作用浓度与时间点,将人工合成抑制TRPM7基因的siRNA片段,通过脂质体LipofectamineTM 2000转染到SH-SY5Y细胞内;RT-PCR检测TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒的测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA测定细胞上清中TNF-α、IL-6的含量.结果 转染siRNA后SH-SY5Y细胞的TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达较模型组明显下降,细胞上清中TNF-α、IL-6、LDH的含量表达较模型组明显下降.结论 应用siRNA干扰靶向抑制TRPM7基因,可以下调TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,这一过程可能是通过抑制NF-κB信号转导通路的激活,从而减少炎症因子的释放,进而减轻Aβ对SH-SY5Y细胞的毒性作用.
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脂质体转染TRPM7siRNA对肝星状细胞增殖的影响
目的 通过利用小干扰RNA(siRNA)下调瞬时受体电位通道7(TRPM7)基因的表达,研究TRPM7对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化、增殖的影响.方法 人工合成抑制TRPM7基因的siRNA片段,通过脂质体LipofectamineTM 2000转染到HSC-T6内,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR法检测Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及TRPM7的mRNA表达.结果 转染siRNA后的HSC-T6增殖受到显著抑制,Ⅰ型胶原、α-SMA及TRPM7 mRNA表达显著下降.结论 应用RNA干扰靶向抑制TRPM7基因可显著抑制HSC-T6的活化及增殖,下调TRPM7基因的表达可能是潜在的肝纤维化治疗方法.
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干扰TRPM7对人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响
目的：研究干扰瞬时受体电位通道7（TRPM7）对人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法用转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激人胚肺成纤维细胞WI-38和MRC-5，Western blot检测细胞平滑肌肌动蛋白（α- SMA）和胶原Ⅰ的表达，来评价细胞的转化。用实时聚合酶链反应（Real- time PCR）和Western blot检测细胞中TRPM7的表达。将特异性的TRPM7 siRNA转染到细胞中，并将细胞分为对照组、模型组、TRPM7 siRNA组、转染非特异性siRNA组（Scramble组）。检测转化过程中相关蛋白α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3、p- Smad3及Smad7的表达。结果 TGF-β1（15μg/L）作用24 h后，成功诱导肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。与对照组比较，模型组细胞中TRPM7 mRNA和蛋白高表达，且细胞中α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3及p- Smad3的蛋白表达增多，Smad7表达降低，差异有统计学意义（<0.05）。与模型组比较，TRPM7 siRNA转染组细胞TRPM7 mRNA和蛋白低表达，且α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3及p- Smad3的表达下降，Smad7的表达升高，差异有统计学意义（<0.05）。结论下调TRPM7可在一定程度上干预肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，该作用可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。
