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宫颈癌与HPV16 E6及hWAPL的相关性研究
目的：检测宫颈不同级别病变组织中人乳头瘤病毒16 E6（HPV16 E6）及人半翼基因（hWAPL）的表达，分析宫颈癌与HPV16 E6及hWAPL蛋白的相关性，为早期诊断宫颈癌提供依据。方法采用免疫组化方法检测宫颈不同级别病变组织的石蜡包埋块，其中宫颈上皮细胞内瘤变（CIN）Ⅰ或CIN Ⅱ49例，CIN Ⅲ或原位癌33例，宫颈浸润癌（ICC）28例，正常宫颈上皮组织16例。结果 HPV16E6与hWAPL在正常宫颈组、CINⅠ或Ⅱ组、CINⅢ组和ICC组的组织中阳性表达率呈逐渐增高趋势，HPV16E6与hWAPL在CINⅢ组和ICC组的阳性表达率与正常宫颈组、CINⅠ或Ⅱ组差异有统计学意义（P＜0．05）。CINⅢ组和ICC组HPV16E6蛋白阳性表达率差异有统计学意义（P＜0．05），而hWAPL蛋白的阳性表达率无明显差异（P＝0．372）。HPV16E6与hWAPL的表达强度在ICC组、CINⅢ组明显高于CINⅠ或Ⅱ组和正常宫颈组（P＜0．05），而ICC组与CINⅢ组之间无明显差异（P＞0．05）。64例HPV16E6阳性者中57例（89．06％）hWAPL蛋白表达阳性，62例阴性者中15例（24．19％）hWAPL蛋白表达阳性。经统计学处理，二者有明显相关性（P＜0．05），而且HPV16E6感染强度与hWAPL表达呈正相关（r＝0．595， P＜0．001）。结论 hWAPL基因是宫颈癌特异性高表达基因，具有癌基因特性，可能是宫颈癌发生机制中的重要环节，而且可能成为新的检测指标，用于宫颈鳞癌的基因诊断、治疗及明确病变程度。
关键词： 人乳头瘤病毒16E6 人半翼基因 宫颈癌 免疫组化 -
人乳头瘤病毒16 E6基因沉默对鼻咽癌细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响
目的 观察针对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E6基因的RNA干扰(RNA inteffering,RNAi)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响,探讨HPV16 E6基因作为鼻咽癌基因治疗标靶的可行性.方法 根据基因库上的HPV16 E6 mRNA序列,设计合成针对HPV16 E6的siRNA,转染HNE-1细胞,采用RT-PCR及Western blot分析E6基因的表达,利用侵袭实验检测细胞的侵袭能力,MTT法检测细胞的生长增殖,流式细胞术检测细胞周期.结果 针对HPV16 E6的siRNA下调鼻咽癌HNE-1细胞株E6 mRNA和蛋白表达水平,分别下调66.3%、56.7%(P<0.05);侵袭实验结果 显示,siRNA转染组的穿膜细胞数为(45.3±4.0),显著低于阴性对照组[(147.7±4.7),P<0.05];转染组细胞的增殖受到抑制,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术显示细胞阻滞于G0/G1期.结论 siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16 E6基因的表达,进而影响HNE-1细胞的侵袭转移能力,并抑制肿瘤细胞的生长增殖,使细胞周期重新分布.
关键词： 小干扰RNA 人乳头瘤病毒16E6 侵袭 增殖 细胞周期
