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黄芩素对多西他赛体外抗前列腺癌活性的影响
目的 探讨黄芩素对多西他赛体外抗前列腺癌活性的影响和机制.方法 将人前列腺癌细胞系LNCaP按不同处理方式分为对照组(空质粒转染处理)、黄芩素组(单用10 mmol/L黄芩素处理)、多西他赛组(单用1 nmol/L多西他赛处理)、多西他赛+黄芩素组(用1 nmol/L多西他赛和10 mmol/L黄芩素处理)和多西他赛+黄芩素+鼠双微体2(MDM2)质粒组(用MDM2质粒转染后再用1 nmol/L多西他赛和10 mmol/L黄芩素处理).采用噻唑蓝(MTT)实验检测LNCaP细胞的活力,流式细胞术检测LNCaP细胞的凋亡情况,免疫印迹法检测LNCaP细胞中MDM2、蛋白53(p53)、佛波醇-12-肉豆酸酯-13-乙酰基诱导蛋白1(PMAIP1,又称Noxa)、受p53基因上调表达的凋亡调控基因(Puma)蛋白的表达水平以及细胞色素c的释放水平、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9和Caspase-3的活化水平.结果 多西他赛+黄芩素组对LNCaP细胞活力的抑制率和LNCaP细胞凋亡率均明显高于多西他赛+黄芩素+MDM2质粒组、多西他赛组、黄芩素组和对照组(P<0.05).黄芩素组和多西他赛+黄芩素组LNCaP细胞MDM2 mRNA和MDM2蛋白水平均明显低于多西他赛+黄芩素+MDM2质粒组、多西他赛组和对照组(P<0.05).多西他赛+黄芩素组p53、Puma和Noxa蛋白的表达水平、细胞色素c释放水平及Caspase-9、Caspase-3活化水平均明显高于多西他赛+黄芩素+MDM2质粒组、多西他赛组、黄芩素组和对照组(P<0.05),而相对线粒体膜电位则明显低于其他各组(P<0.05).结论 黄芩素能通过MDM2/p53途径提高多西他赛的体外抗前列腺癌活性.
