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Runx3过表达对慢性乙型肝炎患者Th1、Th2型细胞因子表达的影响
目的：探讨 Runx3过表达对 CHB 患者 Th1、Th2型细胞因子表达水平的影响。方法重组慢病毒载体pGC-FU-Runx3与阴性对照慢病毒载体 pGC-FU 分别转染29例 CHB 患者外周血 CD4＋ T 细胞，收集培养3 d、5 d 和7 d的细胞培养上清液，应用 ELISA 检测 Th1型细胞因子 IFN-γ、IL-2和 Th2型细胞因子 IL-4、IL-10的表达水平。结果与pGC-FU 转染组比较，pGC-FU-Runx3转染组 Th1型细胞因子 IFN-γ的表达水平在3 d（P ＜0．05）、5 d（P ＜0．01）和7 d （P ＜0．01）时均明显升高；IL-2的表达水平在3 d 时差异无统计学意义（P ＞0．05），但在5 d（P ＜0．05）和7 d（P ＜0．01）时均明显升高。与 pGC-FU 转染组比较，pGC-FU-Runx3转染组 Th2型细胞因子 IL-4的表达水平在3 d 时差异无统计学意义（P ＞0．05），但在5 d（P ＜0．01）和7 d（P ＜0．05）时均明显降低；IL-10的表达水平在3 d 时差异无统计学意义（P ＞0．05），但在5 d（P ＜0．05）和7 d（P ＜0．05）时均明显降低。与 pGC-FU 转染组比较，pGC-FU-Runx3转染组 IFN-γ／IL-4比值在3 d（P ＜0．01）、5 d（P ＜0．01）和7 d（P ＜0．01）时均明显增大。结论 Runx3过表达可以促进 CHB 患者 Th1型细胞因子的分泌，抑制 Th2型细胞因子的分泌，使其 Th1／Th2失平衡得到改善。
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硼替佐米对小鼠骨髓移植后Th1／Th2／Th17细胞亚群分化的影响
目的：观察硼替佐米对小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）后辅助性 T 细胞（Th）1／Th2／Th17细胞亚群分化及其主要的效应性细胞因子[γ－干扰素（IFN－γ）、白细胞介素（IL）－4、IL－17A]表达的影响。方法建立小鼠 aGVHD 动物模型，将小鼠随机分3组：正常对照组、移植对照组、移植＋硼替佐米组。观察各组小鼠的生存时间、aGVHD 表现和嵌合度，流式细胞术检测第7天外周血 Th1／Th2／Th17细胞亚群的表达，ELISA 法检测血清中 IFN－γ、IL－4、IL－17A 水平。结果移植对照组小鼠出现典型的 aGVHD 症状，2周内死于 aGVHD，平均存活时间为11 d，移植＋硼替佐米组小鼠aGVHD 症状明显减轻，平均生存时间较移植对照组显著延长，60 d 时生存率为60％。移植对照组小鼠 Th1／Th17细胞亚群明显升高（ P ＜0．01），Th2细胞亚群比例降低（ P ＜0．01）。输注硼替佐米后 Th1／Th17细胞亚群比例降低，但仍高于正常对照（P ＜0．05），Th2细胞亚群比例上升，与正常对照差异无统计学意义。移植对照组小鼠血清 IFN－γ和 IL－17A 水平明显升高（ P ＜0．01），IL－4水平显著降低（ P ＜0．01）。输注硼替佐米后 IFN－γ和 IL－17A 水平降低，但仍高于正常对照（P ＜0．05），IL－4水平上升，低于正常对照（P ＜0．05）。结论移植后早期输注硼替佐米可通过下调 Th1／Th17细胞分化比例及 IFN－γ和 IL－17A 的表达来减轻小鼠异基因移植后的 aGVHD，提高生存率。
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辅助性T细胞1、2及白细胞介素4、12在椎间盘突出症患者髓核组织中的表达
目的：探讨辅助性 T 细胞1（Th1），辅助性 T 细胞2（Th2）及细胞因子白细胞介素12（IL-12）和白细胞介素4（IL-4）在椎间盘突出症患者髓核组织中的表达水平和临床意义。方法选取接受手术治疗的腰椎间盘突出症患者30例作为观察组，同时选取腰椎骨折需摘除椎间盘的患者10例作为对照组，运用流式细胞术检测 Th 细胞亚群中 Th1和 Th2的分布情况；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定髓核组织中 Th1型细胞因子干扰素γ（IFN-γ）和 IL-12的表达水平及 Th2型细胞因子 IL-4的表达水平；运用 RT-PCR 检测 Th1细胞转录因子 STAT4以及 Th2的转录因子 STAT6的表达水平。结果与对照组比较，Th1、Th2细胞在观察组髓核中，细胞数量明显增加[（6．24±2．89）比（25．12±3．20），t ＝16．26，P ＜0．05；（2．68±0．58）比（8．16±1.20），t ＝3．84，P ＜0．05]；Th1型细胞因子 IL-12和 IFN-γ在观察组体内表达水平高于对照组[（23．47±5.61）比（7．65±3．21），t ＝8．422，P ＜0．05；（1．52±0．87）比（5．34±1．39）pg／mL，t ＝8．135，P ＜0．05]；而在对照组织中未检测到 Th2型细胞因子 IL-4的表达；而在观察组中，IL-4在某些髓核组织中有一定的表达。且IL-12、IFN-γ和 IL-4在椎间盘突出症患者体内的表达呈负相关（r ＝－0．57，P ＜0．05；r ＝－0．23，P ＜0．05）；STAT4的表达水平在观察组患者髓核内明显高于对照组[（3．21±0．49）比（1．12±0．24），t ＝13．15，P ＜0.05]，差异有统计学意义（P ＜0．01），而 STAT6在腰椎间盘突出症患者与对照组差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论Th1和 Th2细胞及其分泌的细胞因子在椎间盘突出症的发病机制中可能有重要的作用。
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海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠PRL、ACTH及辅助性T细胞亚群的影响
目的:观察海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠内分泌激素物质PRL、ACTH及辅助性T细胞亚群的影响.方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6 h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流武细胞术检测Th1/Th2比例;采用放免法检测血浆和脑垂体中PRL、ACTH含量.结果:模型组外周血和脑垂体中PRL含量较正常组逐渐增加,ACTH含量较正常组逐渐降低,第18天、25天与正常组比较有显著性差异(P＜0.05);Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关;海珠益肝胶囊能够降低外周血和脑垂体中PRL含量,增加ACTH含量,与模型组第25天比较,差别有统计学意义(P＜0.01),能够恢复PRL与ACTH的平衡;能降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P＜0.05).结论:在小鼠免疫性肝损伤过程中,存在PRL与ACTH的分泌紊乱及Th1/Th2细胞失衡,海珠益肝胶囊能够恢复PRL/ACTH、Th1/Th2细胞的平衡,对肝组织损害具有保护和改善作用,可能是其免疫药理机制之一.
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胸腺肽 α1 体外刺激胃癌患者外周血单个核细胞对淋巴细胞亚群影响
目的 观察胸腺肽α1(thymosin α1,Tα1)体外刺激培养胃癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对淋巴细胞亚群分化及分泌细胞因子谱的影响,分析Tα1对肿瘤患者免疫功能的影响. 方法 分离32例胃癌患者及18例健康自愿者PBMCs,50、10、1 μg/ml Tα1体外刺激培养2 d;流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞百分比、CD4+/CD8+变化及分泌Th1/Th2细胞因子谱变化. 结果 Tα1体外刺激PBMCs后,胃癌患者及健康自愿者的CD4+、CD8+ T细胞水平及CD4+/CD8+比值均无明显变化;健康自愿者CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞水平无明显变化,胃癌患者CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞水平明显提高(P<0.05);1 μg/ml Tα1促进胃癌患者PBMCs分泌IL-1β、TNF-α,10 μg/ml促进胃癌患者PBMCs分泌IL-6(P<0.05),健康自愿者PBMCs分泌细胞因子谱变化不明显(P>0.05). 结论 Tα1体外刺激胃癌患者PBMCs,提高CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞亚群水平,可能对肿瘤患者抗肿瘤免疫起抑制效应.
