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结核杆菌诱导人巨噬细胞肿瘤坏死因子受体相关信号传导元件的表达谱
目的调查人巨噬细胞肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关信号传导元件在结核分枝杆菌入侵前后的转录水平和变化幅度.方法利用含有12 800个基因和19 200个基因全长序列或部分序列的基因芯片研究结核分枝杆菌无毒株和有毒株入侵导致的人巨噬细胞U937全基因组在转录水平的表达谱变化的基础上,然后,在Northern验证的基础上,通过生物信息学分析TNFR相关信号传导元件的表达.结果结核分枝杆菌无毒株入侵导致的人巨噬细胞U937中与TNFR有关的表达变化不如有毒株的明显,TNFR被抑制,与TNFR相关的下游基因的表达没有检测到.有毒株导致的变化比较明显,MAP激酶,NF-kappa B,caspase,p53途径等下游元件的表达分别提高2~3倍,内源TNF表达上升2~4倍,TNF的转换酶disintegrin金属蛋白酶表达上升2倍.结论TNFR相关的信号传导途径元件参与了宿主对细菌的免疫反应,这些基因在转录水平被调控.结核分枝杆菌有毒株比无毒株激发的基因表达变化大.造成这种差异的原因有待进一步分析.
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不同表型的结核分枝杆菌诱导 U937细胞凋亡率差异分析
目的:利用流式细胞技术检测耐多药结核分枝杆菌( Multidrug resistant mycobacterium tuberculosis , MDR-TB)临床分离株和结核分枝杆菌一、二线药物敏感株分别感染U937细胞后的凋亡率及其时相性变化。方法用两组细菌分别感染U937细胞,在感染后2、4、8及12 h用流式细胞技术检测各组感染U937细胞的凋亡率,并分析其时相性变化。结果结核分枝杆菌MDR株和敏感株均能诱导U937细胞凋亡,两组细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.01),MDR株诱导U937细胞凋亡率显著低于敏感株诱导的凋亡率,且在诱导后2、4、8及12 h各时间点的凋亡率都显著低于敏感株组,诱导早期凋亡率升高显著,特别是诱导后2 h凋亡率升高显著,4 h以后凋亡率升高逐渐变慢。结论结核分枝杆菌临床分离株感染U937细胞后能快速诱导其凋亡,凋亡率与诱导菌株的耐药表型相关,敏感株诱导的凋亡率显著高于MDR株,诱导早期凋亡率升高显著,4 h以后凋亡率升高减慢。