首页 > 文献资料
-
人端粒酶反义寡核苷酸抑制三种不同分化程度胃癌细胞生长及作用机制研究
目的研究特定序列人端粒酶反义寡核苷酸(AS-ODN)抑制三种分化程度不同的胃癌细胞(MKN-45、SGC-7901、MKN-28)生长的可能性,并阐述其抑制胃癌细胞生长的作用与胃癌细胞分化程度的相关性.方法在指定的作用时间和浓度等条件下,以AS-ODN作用于不同分化程度的三种胃癌细胞,用改良端粒酶活性定量检测法测定AS-ODN片段作用前后胃癌细胞的端粒酶活性;用锥虫蓝染色法观察细胞活力;用倒置显微镜、电镜、流式细胞仪和原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡情况.结果以指定浓度的AS-ODN作用后,MKN-45和SGC-7901细胞出现明显的端粒酶活性和细胞生长抑制(P<0.05),但在同样浓度条件下,MKN-28胃癌细胞只出现端粒酶活性抑制.错义序列对照组则无明显变化.以10 μmol/L的AS-ODN连续作用三种胃癌细胞96 h后,光镜、电镜和TUNEL法检测均发现MKN-45和SGC-7901细胞表现出特有的凋亡征象,流式细胞仪检测证实MKN-45和SGC-7901细胞的平均凋亡率在44.75%和33.56%,错义序列对照组则无明显变化(P<0.05).结论 AS-ODN能有效抑制胃癌细胞生长,其作用机制主要是抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡.AS-ODN对中分化胃癌细胞的生长抑制显著,对低分化胃癌细胞的抑制作用略强于高分化胃癌细胞,提示端粒酶反义核酸的抑制作用不依赖于胃癌细胞的分化程度.
-
端粒酶与宫颈癌的发生、发展
端粒酶在大多数恶性肿瘤中呈高表达.在宫颈癌中的表达率几乎为80%～100%.HPV感染在宫颈癌的发病中起着重要作用.高危型HPV中有两个重要的癌基因E6、E7,宫颈癌中E6、E7的表达与端粒酶的表达有一定的相关性.端粒酶反义寡核苷酸通过抑制端粒酶活性,延长肿瘤细胞的倍增时间,抑制移植瘤的生长,其治疗肿瘤的机制多数文献认为是启动了细胞的凋亡.
-
端粒酶反义寡核苷酸对二甲肼诱导大鼠大肠癌的预防作用
目的:探讨端粒酶反义寡核苷酸对二甲肼诱导大鼠大肠癌的预防作用.方法:用1,2-二甲肼(1,2-DMH)诱导SD大鼠肠癌发生的模型,观察端粒酶反义寡核苷酸对端粒酶活性及二甲肼诱癌率的影响.结果:本研究使用二甲肼成功地诱导了大鼠大肠癌发生模型,阴性对照组未见肿瘤发生,阳性诱癌组诱癌率为57.69%,反义寡核苷酸保护组诱癌率为26.92%,明显低于阳性诱癌组(P<0.01);同时反义寡核苷酸保护组端粒酶活性低于阳性诱癌组(P<0.05).结论:端粒酶反义寡核苷酸在体内能抑制端粒酶活性,对DMH诱导的肠癌有预防作用,可望成为预防和治疗大肠癌的有效药物.
-
端粒酶反义寡核苷酸抗肿瘤的实验研究
一、材料与方法 1. 肝癌细胞株SMMC-7721引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。 2. 试剂：端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸（ASODN-t）及无关寡聚核苷酸（N-ODN）由上海生工生物工程公司合成，全硫代修饰。 3. 对细胞抑制作用的观察：取2×107/L肝癌细胞接种于96孔的细胞培养板中，每孔100μl，设3个复孔。分别加入ASODN-t，调节浓度使ASODN-t终浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L，N-ODN的终浓度为3μmol/L，培养24、48、72、96h，于结束前4h加入5g/L MTT 20μl，继续培养4h，再加入SDS溶液100μl，终止反应。用酶联免疫检测仪检测各孔在波长570nm的吸光度A值。
