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IGF-1R基因通过调控BMP2表达影响SMMC7721细胞的增殖和凋亡
背景与目的：胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是一种重要的肽类激素，通过与其受体(IGF-1 receptor，IGF-1R)和胰岛素受体(insulin receptor，IR)结合并激活下游信号通路发挥生物学作用，骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)因可促进多种肿瘤细胞的增殖和侵袭而日益成为肿瘤分子研究领域的热点。该研究通过RNA干扰(RNAi)技术沉默IGF-1R基因，探讨其对肝癌SMMC7721细胞中BMP2表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法：构建靶向IGF-1R基因的RNAi真核表达质粒，转染至肝癌SMMC7721细胞，用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测IGF-1R和BMP2基因表达抑制效应，MTT实验检测IGF-1R基因沉默后细胞生长曲线，流式细胞术检测IGF-1R基因沉默后细胞凋亡情况。结果：成功构建靶向IGF-1R基因的真核表达质粒， IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2转染至肝癌SMMC7721细胞后，对IGF-1R基因的mRNA抑制效率分别达到68.9%和80.7%(P<0.05)，对BMP2基因的mRNA抑制效率分别达到79.5%和83.3%(P<0.05)，对IGF-1R蛋白表达抑制率分别为46.1%和62.1%，对BMP2蛋白表达抑制率分别为42.5%和60.9%(P<0.05)。根据MTT实验结果，绘制的生长曲线显示，IGF-1R基因沉默后SMMC7721细胞增殖速率明显低于对照组(P<0.05)，细胞凋亡比例高于对照组(P<0.05)。结论：IGF-1R基因沉默表达能介导BMP2基因不同水平下调表达，抑制SMMC7721细胞增殖，并促进细胞发生凋亡。
关键词： IGF-1R基因 BMP2基因 肝癌SMMC7721细胞 细胞增殖 细胞 凋亡 -
大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响
目的：探讨大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响。方法将肝癌SMMC7721细胞分成6组：阴性对照组不加药；根据添加大豆黄酮浓度的不同，分成100μg/mL 组、200μg/mL 组、300μg/mL 组、400μg/mL 组、500μg/mL组，培养24 h、48 h、72 h后MTT法检测细胞的抑制率、测定每组细胞中己糖激酶和碱性磷酸酶活性和CD133表达水平并进行比较。结果大豆黄酮浓度越高，对肝癌细胞的抑制作用越强；随着处理时间的延长，抑制作用有所下降；尤其在400μg/mL浓度组和500μg/mL浓度组，时间效应更明显。与对照组相比，经不同浓度大豆黄酮处理的肝癌细胞己糖激酶活性和碱性磷酸酶活性均显著降低（P＜0.01），肿瘤干细胞CD133表达明显下降（P＜0.01），并且浓度越高下降幅度越大。结论大豆黄酮能够抑制肝癌SMMC7721细胞的增殖，并降低肿瘤干细胞CD133的表达。
关键词： 大豆黄酮 肝癌SMMC7721细胞 CD133 -
BMP-2对人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、MMP-9表达的影响
目的:探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对肝癌SMMC7721细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达及分泌的影响.方法:分别采用半定量逆转录聚合酶链反应、Western blot及ELISA法检测BMP-2干预SMMC7721细胞后MMP-2、9 mRNA、蛋白表达和浓度水平的变化.结果:BMP-2呈剂量和时间依赖性促进人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、9 mRNA、蛋白表达和分泌.结论:BMP-2可以上调MMP-2、9在肝癌SMMC7721细胞的表达水平,从而促进肝癌细胞的生长和侵袭能力.
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GCDCA对肝癌SMMC7721细胞诱导分化的影响
目的 探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycodeoxycholic acid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721诱导分化的影响.方法 采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞48,72,96 h,采用放射免疫法检测肝癌SMMC7721细胞的甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)分泌量,同时利用免疫组化分析肝癌SMMC7721细胞AFP表达的影响.结果 GCDCA能显著抑制肝癌细胞SMMC7721AFP的分泌,降低其表达,且能大大提高ALB的分泌.其效果GCDCA 200 μmol/L处理组优于GCDCA 100 μmol/L处理组,均有时效和量效的关系.结论 GCDCA能抑制肝癌SMMC7721细胞AFP的表达和分泌,提高ALB的分泌,具有诱导肝癌细胞SMMC7721细胞良性分化的能力.
关键词： 甘氨鹅脱氧胆酸 肝癌SMMC7721细胞 清蛋白 甲胎蛋白 诱导分化 -
甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌SMMC7721细胞凋亡诱导的影响
目的 探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响.方法 采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞24,48,72 h,进行MTT实验,计算肝癌细胞的生长抑制率;采用流式细胞仪检测GCDCA对SMMC7721细胞凋亡的影响.结果 不同浓度的GCDCA对肝癌细胞SMMC7721均有一定程度的生长抑制作用,高浓度的GCDCA(300 μmol/L)处理组对SMMC7721细胞有较强的毒性损伤.低浓度的GCDCA(200 μmol/L)处理组能明显诱导细胞凋亡,凋亡率随处理时间的延长而增加.结论 GCDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用并能诱导SMMC7721细胞凋亡.
关键词： 甘氨鹅脱氧胆酸 肝癌SMMC7721细胞 细胞凋亡 增殖抑制
