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Gab2通过GSK-3β/Snail信号通路促进乳腺癌的上皮-间质转化
背景与目的：越来越多的证据显示，Grb2协同结合蛋白2(Grb2 binding protein-2，Gab2)与肿瘤的侵袭转移相关，但Gab2与乳腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)的关系尚不清楚。本研究旨在探讨Gab2对乳腺癌EMT标志物的影响，明确Gab2在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法：采用免疫组织化学染色法检测80例乳腺癌组织中Gab2及EMT标记物上皮性钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况并分析其相关性，用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测乳腺组织Gab2的表达情况，采用小干扰RNA(siRNA)技术降低乳腺癌细胞系MDA-MB-231中Gab2的表达，采用划痕实验检测表皮生长因子(epithelial growth factor，EGF)刺激后转染细胞的侵袭能力变化，用Western blot检测敲低Gab2后MDA-MB-231细胞中E-cadherin及vimentin的表达情况，同时检测p-GSK-3β的表达情况、转录因子Snail转核情况。结果：Gab2在乳腺癌组织中的表达与E-cadherin的表达呈负相关，而与vimentin的表达呈正相关(P<0.05)；乳腺癌组织中Gab2的表达量明显高于正常乳腺组织；siRNA质粒转染后，SiGab2/MDA-MB-231细胞组中Gab2蛋白的表达量明显降低，结果显示转染成功，划痕实验显示细胞的侵袭能力减弱，表明Gab2影响乳腺癌细胞系的侵袭能力；敲低Gab2后，MDA-MB-231细胞中的E-cadherin的表达明显升高，而vimentin的表达明显降低；GSK-3β的磷酸化受到抑制，而Snail在敲低Gab2的细胞核中的表达明显下调。结论：Gab2可以通过GSK-3β/Snail信号通路促进乳腺癌的EMT，从而促进乳腺癌的侵袭和转移。
关键词： 乳腺癌 侵袭 Grb2协同结合蛋白2 上皮-间质转化 信号通路 -
Gab2在人骨肉瘤细胞U2-OS中的表达及意义
目的：探讨Grb2协同结合蛋白2（ Gab2）在人骨肉瘤细胞系中的表达及其与人骨肉瘤细胞侵袭转移的关系。方法：应用小RNA干扰技术，将合成的小RNA干扰质粒转染给人骨肉瘤U2-OS细胞，采用Western blotting和RT-PCR法检测转染后Gab2的蛋白和mRNA表达水平；体外细胞趋化运动实验和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果：Gab2在人骨肉瘤U2-OS细胞系中高表达，且转染Gab2 siRNA后的细胞（ SiGab2／U2-OS）中Gab2蛋白及mRNA的表达水平低于转染scramble siRNA细胞（ Scr／U2-OS）和U2-OS；趋化运动实验发现在10μg／L表皮生长因子（ EGF）的诱导下SiGab2／U2-OS细胞的迁移能力较U2-OS和Scr／U2-OS细胞明显下降，差异有统计学意义（P＜0.01）；SiGab2／U2-OS细胞侵袭并穿透Matrigel 膜基质的细胞数量均比Scr／U2-OS细胞和U2-OS细胞少，SiGab2／U2-OS细胞的体外侵袭能力显著降低（P＜0.01）。结论：利用siRNA干扰技术降低Gab2的表达对人骨肉瘤U2-OS细胞的迁移和侵袭能力有明显的抑制作用。
关键词： Grb2协同结合蛋白2 小干扰RNA 细胞侵袭 U2-OS细胞
