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LKB1协同二甲双胍影响宫颈癌HeLa细胞的增殖与凋亡及其可能的机制
目的:探索肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1或serine-threonine kinase 11,STK11)基因协同二甲双胍对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的机制.方法:构建含有LKB1基因的重组质粒LKB1-pEGFP-n1并转染HeLa细胞,MTT检测LKB1基因对经二甲双胍处理的HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响,Western blotting 检测对LKB1-AMPK信号通路相关蛋白AMPK、ACC和Rb磷酸化水平的影响.结果:LKB1-pEGFP-n1和空载体pEGFP-n1成功转染HeLa细胞,LKB1-pEGFP-n1转染细胞内稳定表达LKB1.二甲双胍处理LKB1-pEGFP-n1转染细胞的IC50显著低于pEGFP-n1转染细胞[(2.9±0.4)vs(7.8±1.3)mmol/L;t=-6.9921,P=0.002 2]及野生型HeLa细胞[(2.9±0.4)vs(9.6±1.5) mmol/L;t=-7.527 1,P=0.001 7].经二甲双胍处理后,LKB1-pEGFP-n1转染细胞周期阻滞于G1期,而pEGFP-n1转染和野生型细胞周期无显著变化.二甲双胍作用剂量为15 mmol/L时,LKB1-pEGFP-n1转染细胞凋亡率较pEGFP-n1转染及野生型HeLa细胞显著增多[(28.6±2.3)％vs (9.6±1.6)％、(17.8±1.9)％,均P＜0.05].LKB1-pEGFP-n1转染细胞内AMPKα和ACC的磷酸化水平较pEGFP-n1转染和野生型细胞升高,Rb磷酸化水平降低.结论:LKB1能够协同二甲双胍影响HeLa细胞的增殖与凋亡,其可能通过LKB1-AMPK信号通路发挥作用.
