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木鳖子醇提物诱导小鼠黑素瘤B16细胞分化的作用机制
目的:探讨木鳖子醇提物(ethanol extract of cochinchina momordica seed,CMSEE)诱导黑素瘤B16细胞分化的作用机制.方法:CMSEE处理B16细胞后,瑞氏染色法观察B16细胞的形态变化；比色法检测B16细胞的黑素含量.Western blotting检测经CMSEE和p38、ERK通路抑制剂SB203580、SD98059分别处理后B16细胞中p-p38、p-ERK表达的变化.结果:CMSEE可诱导B16细胞分化,使细胞的黑素量含量明显升高(P＜0.01),10、20、40 μg/ml CMSEE处理组B16细胞的黑素量D值分别为(0.057±0.007)、(0.173 ±0.005)和(0.249±0.002),而对照组为(0.037±0.002).20 μg/ml CMSEE处理B16细胞后,p-p38蛋白表达水平明显升高,处理60 min时的相对表达量高,为对照组的5.6倍；而p-ERK表达水平明显降低(P＜0.01),处理60 min时的相对表达量为对照组的25％倍.p38通路抑制剂SB203580可阻断CMSEE对B16细胞的分化诱导作用,而ERK通路抑制剂SD98059可增强CMSEE对B16细胞的分化诱导作用.结论:p38通路和ERK通路的活化参与了CMSEE对B16细胞的分化诱导作用.
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木鳖子醇提物对黑素瘤B16细胞增殖的抑制及其可能机制
目的:观察木鳖子醇提物(ethanol extract from cochinchina momordica seed, CMSEE)对黑素瘤B16细胞增殖的影响,初步探讨其作用机制.方法:MTT法和克隆集落形成实验检测CMSEE对小鼠黑素瘤B16细胞生长的影响,倒置相差显微镜和瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学变化,流式细胞技术(FCM)检测B16细胞周期分布和凋亡率的变化,比色法检测CMSEE对B16细胞黑素生成和酪氨酸酶活性的影响,RT-PCR法检测CMSEE对B16细胞中C-myc、P38和Tyr基因表达的影响.结果:CMSEE(10～100 mg/L)明显抑制B16细胞的增殖(P<0.05, P<0.01),呈质量浓度和时间依赖性.10～40 mg/L CMSEE处理后,B16细胞呈现典型的细胞分化形态,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,黑素产生和酪氨酸酶活性增加(P<0.01),C-myc基因表达下调,P38和Tyr基因表达上调;100 mg/LCMSEE处理后的B16细胞呈现凋亡形态变化[凋亡率达(37.2±3.29)%],黑素生成减少(P<0.05),酪氨酸酶活性降低(P<0.01).结论:CMSEE体外对B16细胞增殖有明显的抑制作用,其机制与其低剂量诱导分化和高剂量诱导凋亡有关.
