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中和抑制试验文献资料
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PCR微板杂交对金黄色葡萄球菌凝血酶血清型进行分子分型
在临床微生物检验和污染食物的葡萄球菌流行病学调查中,常常需要对分离的金黄色葡萄球菌的凝固酶进行血清分型.尽管凝固酶被分成10个血清型[1],但目前商品化抗血清只能鉴定Ⅰ～Ⅷ型.每个血清型用兔抗血清的中和抑制试验确定, 即金黄色葡萄球菌菌株产生的凝固酶与血清型特异的抗血清在试管里混合后,再加兔血浆, 如果凝固酶的型别与抗血清对应,就不会形成凝块.如果没有抗血清(Ⅰ～Ⅷ型)能够中和凝固酶,则成为不能分型的菌株(nontypeable, NT), 这种常规的鉴定方法强烈依赖凝固酶的活性,因此,低凝固酶活性的菌株可能需要延迟观察时间,等待血浆凝块的发生,而那些具有极高活性的菌株可能引起假结果,因为抗血清不能中和凝固酶的活性.同样的道理,对于NT菌株来说,其凝固酶的活性不能被抗血清中和,凝块是否形成需要用所有八种抗血清证实.因此,为了鉴定NT和高活性的凝固酶的菌株,需要训练有素的工作人员的认真观察.此外,鉴定过程费时费力,且结果的判读常常主观.后来用微板的方法[2] 对常规的方法进行了改进,但与常规方法一样,结果受凝固酶活性的影响较大.本文旨在建立用PCR结合微板杂交技术对凝固酶血清型进行鉴定.
