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维甲酸调控线粒体途径对甲状腺滤泡状癌ASC的影响
目的:研究维甲酸(retinoic acid,RA)对甲状腺滤泡状癌细胞FIE-133ASC调控的影响,并探讨线粒体作用机制与凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated specklike protein containing a CARD,ASC)的关系.方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测RA在不同时间(12、24、36、48h)下对甲状腺滤泡状癌细胞FIE-133存活率的影响,透射电镜观察细胞线粒体超微形态结构的改变,蛋白印迹法检测经RA作用前后ASC蛋白的表达.结果:RA对FIE-133细胞生长的抑制有时间依赖性,电镜下甲状腺滤泡状癌细胞线粒体结果发生剧烈改变,ASC表达明显增加.结论:RA对甲状腺滤泡状癌细胞FIE-133的生长具有抑制作用,这一抑制作用是由于线粒体凋亡通路调节ASC表达的影响使细胞凋亡功能得以恢复.
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曲格列酮抑制甲状腺滤泡状癌细胞生长
目的 研究曲格列酮对甲状腺滤泡状癌细胞FTC-133生长的影响.方法 将甲状腺滤泡状癌细胞FTC-133与不同浓度的曲格列酮共培养,4-甲基偶氮四唑蓝( MTT)法观察其对FTC-133细胞增殖的影响,流式细胞仪DNA定量法分析曲格列酮对FTC-133细胞细胞周期的影响,半定量RT-PCR法测定曲格列酮对甲状腺滤泡状癌细胞p27 mRNA表达的影响.结果 曲格列酮可以抑制FTC-133细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性(P＜0.05);曲格列酮作用后,甲状腺滤泡状癌细胞FTC-133的G0/G1细胞的比例增加(P＜0.05);p27mRNA的表达显著升高(P＜0.05).结论 曲格列酮可以抑制甲状腺滤泡状癌细胞从G1期向S期的转化,从而抑制其增殖,曲格列酮可能成为治疗甲状腺滤泡状癌的一种选择.
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维甲酸对甲状腺癌ASC蛋白的影响
目的 探索维甲酸诱导甲状腺癌细胞的凋亡情况及凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达.方法 甲状腺滤泡状癌细胞株FIE-133(A组),乳头状甲状腺癌细胞株W3(B组),未分化甲状腺癌细胞株8505C(C组),3组细胞用维甲酸刺激24h共同培养.流式细胞术观察细胞活性,RT-PCR和Western blotting检测ASC mRNA及蛋白的表达.采用双向电泳分离蛋白质,采用PDQuest2 -DE软件分析维甲酸+A组与A组细胞2组间差异表达的蛋白质斑点,并用Western blotting进一步验证.结果 流式细胞术结果,维甲酸均导致3组细胞凋亡,A组的凋亡率强于B、C2组(P＜0.01).RT-PCR和Western blotting检测的ASC mRNA及蛋白的表达,A、B、C3组均有表达,A组强于B、C2组(P＜0.05).维甲酸作用A组,质谱鉴定了ASC蛋白,Western blotting验证蛋白质ASC与双向电泳的结果一致.结论 为维甲酸治疗甲状腺癌的蛋白质研究提供实验资料.
