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青环海蛇毒素抗毒血清的制备和效价的实验研究
目的制备我国沿海常见的青环海蛇毒素抗毒血清,为治疗海蛇咬伤提供特效解毒剂.方法青环海蛇毒素经减毒灭菌处理后,对10只新西兰兔进行免疫,免疫过程中通过免疫双向扩散试验和酶联免疫吸附试验进行效价评价,达到高效价后动物取血,进行试血试验.结果动物经19周免疫后,终免疫效价为免疫双向扩散试验1∶8可见明显沉淀线,酶联免疫吸附试验效价达到1 280 000,试血实验1 ml血清可中和 0.40 mg青环海蛇毒素,0.34 mg平颏海蛇毒素.结论确定了一套快速、高效的抗青环海蛇毒素血清方案,研制出高效价的抗毒血清.为治疗海蛇咬伤提供了生产特效抗毒血清的实验基础.
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青环海蛇中有效物质1-甲基海因的含量测定
目的 建立HPLC法测定青环海蛇中有效物质1-甲基海因的含量.方法 Dikma inertsil SIL-100A(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为正己烷-乙醇(82:18,V/V),检测波长为218 nm,流速为1.0 ml·min~(-1),柱温为25℃.结果 1-甲基海因质量在0.448～1.568 μg之间线性良好,r＝0.999 5;平均加样回收率为99.34%,RSD为2.12%.结论 该测定方法简便快捷、准确性好、精密度高,可用于青环海蛇中有效物质1-甲基海因的含量测定,为海蛇质量标准的建立提供依据.
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海蛇咬伤及抗海蛇毒血清的研制与应用
海蛇咬伤是我国东南沿海地区严重的一种海洋生物伤.海蛇为爬行纲蛇目海蛇科的一类毒蛇,世界上现有记录的海蛇分为2亚科16属约50种,主要分布于太平洋及印度洋热带与亚热带的暖水海域.我国记录的有10属16种,分布于辽宁、山东、江苏、浙江、台湾、福建、广东、广西、海南诸省区的海区[1],以北部湾的海蛇资源为丰富.海蛇均为毒蛇,其毒性远大于陆地毒蛇,人的中毒致死量为3.5mg左右[2],一般纯海蛇毒的LD50均小于0.10mg/kg,如常见的青环海蛇为0.05mg/kg,平颏海蛇为0.06mg/kg.
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"精制多价抗海蛇毒血清"的制作
目的海蛇均为前沟牙毒蛇,分布于太平洋及印度洋沿岸,大西洋没有海蛇.中国产海蛇16种,分布于北起辽宁、南至海南及广西沿海,分布较广、数量较多及蛇伤发病率较高的海蛇为青环海蛇(Hydrophis cyanocinctus)和平颏海蛇(Laticauda semifasciata).调查结果表明,被海蛇咬伤如不及时处理,通常有50%的患者死亡.在中国广西北海市每年均有被海蛇咬伤中毒致死的病例.为研制中国、日本及东南亚沿海国家主要有毒海蛇青环海蛇和平颏海蛇咬伤的有效治疗药"多价抗海蛇毒血清",填补急救医学空白.
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青环海蛇免疫调节作用活性部位的筛选
目的 筛选青环海蛇免疫调节作用的活性部位.方法 采用碳廓清率试验法和免疫器官重量测定方法.结果 乙酸乙酯部分和水溶性部分的脾指数和胸腺指数与对照组比均有升高(P＜0.01或P＜0.05),校正廓清指数与对照组相比也有升高(P＜0.01或P＜0.05). 结论 乙酸乙酯部分和水溶性部分为青环海蛇免疫调节活性部住.
