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鼻咽癌细胞ClC-3在细胞周期中的表达
用免疫荧光、激光共聚焦显微镜图像分析及膜片钳等技术研究了鼻咽癌上皮CNE-2Z细胞容积激活性氯通道候选基因C1C-3的表达及其在细胞周期中与容积激活性氯电流及细胞容积调节性回缩(regulatoryvolumedecrease,RVD)的关系.结果显示,CNE-2Z细胞表达ClC-3.ClC-3蛋白主要位于细胞内而不是在细胞膜上,其表达水平及其在细胞中的分布呈细胞周期依赖性.G1期细胞的ClC-3表达水平较低而S期则较高,M期细胞的表达水平中等.在细胞周期中,ClC-3表达水平与细胞RVD能力及容积激活性氯电流水平呈反比.上述观察结果提示,ClC-3可能参与细胞周期的调节,但CNE-2Z细胞中的ClC-3可能不是与RVD有关的氯通道.
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转染 ClC-3 siRNA 的大鼠成骨细胞增殖、分化观察
目的：观察转染ClC-3 siRNA的大鼠成骨细胞增殖、分化情况。方法原代提取成骨细胞，将细胞分为四组，Control组细胞不做任何处理，NC组细胞转染无序siRNA，Lipo组细胞转染LipofectamineTM 2000转染试剂， ClC-3 siRNA组细胞转染ClC-3 siRNA，各组细胞加载流体剪切力行力学刺激。采用MMT法检测各组细胞培养24、48、72 h时的光密度值；同时检测各组细胞碱性磷酸酶水平及成骨细胞钙化结节形成能力。结果与Control组相比，ClC-3 siRNA组细胞各时点光密度值降低（P均＜0．01）。 ClC-3 siRNA组、Lipo组、NC组、Control组成骨细胞碱性磷酸酶水平分别为（32．434±2．130）、（46．199±1．900）、（47．347±2．500）、（49．540±1．550） U／mL，钙化结节形成能力分别为25．02％±3．46％、36．83％±4．54％、38．45％±4．84％、40．57％±2．22％，ClC-3 siRNA组与Control组相比，P均＜0．01。结论转染ClC-3 siRNA可抑制大鼠成骨细胞的增殖、分化。
