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STAT1与CD74/CD44协同方式调控结肠癌细胞上皮-间质转化机制研究
目的 研究信号转导子和转录激活子1(STAT1)与CD74/CD44在结肠癌细胞上皮-间质转化调控中的相互作用关系.方法 构建基因STAT1和CD74/CD44真核表达质粒以及上皮-间质转化酪氨酸激酶受体(DDR)启动子荧光素酶报告基因表达质粒.真核表达质粒经转染结肠癌细胞后,利用免疫共沉淀技术观察基因STAT1和CD74/CD44两者是否有相互作用.将DDR2启动子荧光酶报告基因表达质粒与真核表达质粒STAT1或CD74/CD44分别转染及共转染结肠癌细胞,通过荧光素酶分析技术分析基因STAT1和CD74/CD44对DDR2启动子是否存在协同激活作用.结果 STAT1与CD74/CD44,CD74/CD44与STAT1均可产生免疫共沉淀.荧光素酶分析技术表明,上皮-间质转化DDR2启动子荧光表达质粒与两者共转染比分别单独转染STAT1和CD74/CD44对DDR2启动子的激活作用更强.结论 STAT1和CD74/CD44之间具有相互作用,在结肠癌发生与发展过程中起着重要的协同作用.
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过表达STAT1与CD74CD44促进结肠癌细胞粘附和迁移的相关性
目的 探讨信号转导和转录激活子1(STAT1)与CD74/CD44在结肠癌中异常表达与肿瘤转移的相关性.方法 培养结肠癌细胞株Ls-174-T,待其生长至对数生长期,传至第3代收集肿瘤细胞,各细胞分为3份.1份行RT-PCR、Western blotting方法检测STAT1与CD74/CD44表达情况;1份检测定量粘附细胞数;1份以划痕实验检测细胞迁移能力.统计分析比较STAT1与CD74/CD44在结肠癌细胞中的异常表达情况及与肿瘤迁移和粘附能力的相关性.结果 RT-PCR、Western blotting结肠癌组织中STAT1与CD74/CD44的蛋白及mRNA表达显著高于正常结肠组织,两组相比具有统计学差异(P＜0.05).MTT法检测结果显示,不同作用时间(0、6、12、24、48 h)不同剂量STAT1与CD74/CD44过表达质粒(0.000、0.001、0.010、0.060、0.100 mg/ml)干预后,结肠癌细胞体外粘附能力明显加强,与对照组(0.000 mg/ml各组)相比,差异有统计学意义;Transwell结果显示,不同作用时间(0、6、12、24、48 h)不同剂量STAT1与CD74/CD44过表达质粒(0.000、0.001、0.010、0.060、0.100 mg/ml)干预后,结肠癌细胞体外迁移能力随着时间及剂量的增加而明显加强,与对照组(0.000mg/ml各组)相比,差异有统计学意义.结论 STAT1与CD74/CD44在结肠癌细胞中高表达,从而调节结肠癌细胞粘附和迁移能力的作用,表明STAT1与CD74/CD44在结肠癌发生进展中可能与肿瘤的侵袭和转移密切相关.
关键词： 转录激活子1(STAT1) CD74/CD44 结肠癌细胞 细胞粘附 迁移 -
STAT1与CD74/CD44在结肠癌细胞中协同调控上皮-间质转化机制研究
目的:研究信号转导和转录激活子1(STAT1)与CD74/CD44在结肠癌细胞上皮-间质转化调控中的相互作用关系.方法:构建基因STAT1和CD74/CD44真核表达质粒以及上皮-间质转化酪氨酸激酶受体-2(DDR2)启动子荧光素酶报告基因表达质粒,真核表达质粒经转染后,利用免疫共沉淀技术探讨基因STAT1和CD74/CD44的相互作用,通过荧光素酶分析技术分析基因STAT1和CD74/CD44对上皮-间质转化酪氨酸激酶受体-2(DDR2)启动子是否存在协同激活作用.结果:STAT1可将CD74/CD44沉淀下来,CD74/CD44可将STAT1沉淀下来,上皮-间质转化酪氨酸激酶受体-2(DDR2)启动子荧光表达质粒与两者共转染比单独转染STAT1或CD74/CD44对上皮-间质转化酪氨酸激酶受体-2(DDR2)启动子的激活作用更强.结论:STAT1和CD74/CD44之间具有相互作用,在结肠癌发生及发展过程中起着重要的协同作用.
