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紫杉醇对SHI-1细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用
目的 观察紫杉醇体外抑制人白血病细胞SHI-1细胞的增殖活性及诱导细胞分化和凋亡的作用,并探讨其凋亡机制.方法 以不同质量浓度(5、0.5、0.05、0.005 mg/L)的紫杉醇与SHI-1细胞在体外共同培养,分别作用0、12、24、36、48 h,通过细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态学、DNA含量测定、AnnexinⅤ/PI、细胞线粒体跨膜电位(Δφm)等分析细胞的凋亡.结果 紫杉醇能促进SHI-1细胞的凋亡;0.05 mg/L紫杉醇处理对SHI-1细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用为显著.结论 紫杉醇能抑制SHI-1细胞增殖活性,诱导细胞分化,促进细胞凋亡,使SHI-1细胞停留在G2/M期.
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全反式维甲酸对SHI-1细胞株糖基转移酶表达的影响
目的:探讨全反式维甲酸对SHI-1细胞株中糖基转移酶表达的影响.方法:采用半定量RT-PCR和Real-Time PCR方法,比较在不同浓度ATRA作用下,SHI-1细胞中不同糖基转移酶家族(多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族、β3N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶家族和O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶家族)的表达情况.结果:在SHI-1细胞株中ppGalNAcT1、T2、T3、T4,β3GnT1、β3GnT5,O-GnT有不同程度的表达,加入全反式维甲酸后β3GnT5表达量下降,pp-GalNAcT2、T4、β3GnT1、O-GnT表达量升高.结论:加入诱导分化剂全反式维甲酸后,SHI-1细胞中的糖基化作用升高.
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全反式维甲酸、1,25二羟维生素D3对白血病细胞株SHI-1中几种糖基转移酶mRNA表达的影响
目的 探讨在全反式维甲酸(ATRA)、1,25二羟维生素D3[1,25-(OH)_2D_3]的作用下,白血病细胞株SHI-1中多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcTs)和某些N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnTs)表达的变化.方法 应用RT-PCR法研究在不同浓度ATRA、1,25-(OH)_2D_3作用下,白血病细胞株SHI-1中ppGalNAcTs、GnTs表达的变化.结果 在SHI-1细胞株中,随着1,25-(OH)_2D_3浓度(10~(-8)～10~(-6) mol/L)的增加,ppGalNAcT1和T2表达增加,T3表达没有变化,T4表达减少;加入ATRA(10~(-8)～10~(-6)mol/L)后,细胞株中ppGalNAcT2、β6GnTV、O-GnT表达量升高.结论 白血病细胞株SHI-1 ppGalNAcTs各型表达水平不同;在不同浓度ATRA、1,25-(OH)_2D_3的作用下,白血病细胞株SHI-1中各型ppGalNAcTs表达变化也不同.在SHI-1细胞株加入ATRA后细胞中β2GnTI、β6GnTV发生显著变化.ppGalNAcT1、ppGalNAcT2、GnTs与白血病细胞株的分化可能有一定关系.
关键词： 全反式维甲酸 1 25-(OH)_2D_3 SHI-1细胞株 糖基转移酶 -
紫杉醇对SHI-1细胞株增殖抑制及凋亡的影响
目的 研究紫杉醇对人急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞凋亡率和细胞周期的影响.方法用不同浓度的紫杉醇作用于SHI-1细胞,分别作用0、12、24、36、48 h,用细胞计数、台盼蓝染色观察细胞形态学改变、DNA含量测定及异硫氰酸荧光黄(annexin-V-FITC)、碘化丙啶(PI)分析细胞凋亡、JC-1染色检测细胞线粒体跨膜电位.结果 紫杉醇能抑制SHI-1细胞增殖活性,呈现作用时间和剂量的量效关系,出现典型的细胞形态的改变,且随着药物浓度的增加和作用时间的延长,抑制作用越明显;紫杉醇对细胞凋亡率和细胞周期均有影响,AnnexinV/PI荧光染色后细胞发生凋亡的特征性改变,随药物浓度增加和作用时间的延长,细胞凋亡率增加,G2/M期比例增高;紫杉醇能使线粒体跨膜电位显著下降;0.05 mg/L处理组对SHI-1细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用为显著.结论紫杉醇能抑制SHI-1细胞增殖活性,诱导其凋亡,使SHI-1细胞停留在G2/M期.
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青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子及其受体表达的影响
目的 研究青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子(VEGF)及其受体( VEGFR)的影响。方法酶联免疫吸附法检测非细胞毒性浓度(5、10、20 ng/ml)青蒿琥酯作用SHI-1细胞后培养上清液VEGF浓度，流式细胞术检测有或无青蒿琥酯作用时，SHI-1细胞表面VEGFR-1及VEGFR-2阳性表达率。结果培养24、48 h后，无青蒿琥酯作用的SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为( 980.3±2.2)、(982.4±2.3) pg/ml，VEGFR-1表达率分别为(5.40±3.11)％和(4.45±2.85)％，VEGFR-2表达率分别为(13.90.± 2.26)％和（13.95±1.96）％。5、10、20 ng/ml青蒿琥酯作用24h后，SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为(234.6±1.8)、(114.9±1.6)、(108.8±1.5) pg/ml，作用48 h后分别为(62.3±1.7)、(60.9±1.6)、(32.7±1.7) pg/ml，与培养相同时间无青蒿琥酯组相比，VEGF浓度明显下降（均P＜ 0.05），且相同浓度青蒿琥酯作用24 h与48 h间差异亦有统计学意义(均P＜ 0.05)。5、10、20 ng/ml青蒿琥酯作用24 h，VEGFR-1阳性率分别为(4.30±2.21)％、(4.20±1.37)％和(3.90±1.86)％，作用48 h后分别为(3.80±2.87)％、(3.60±1.73)％和(3.00±1.82)％，相同作用时间不同浓度青蒿琥酯组间及相同浓度作用不同时间组间VEGFR-1阳性率差异均无统计学意义(均P＞ 0.05)；作用24h后，SHI-1细胞VEGFR-2阳性率分别为(4.40±1.15)％、(3.10±0.68)％和(1.10±0.72)％，作用48 h后分别为(3.00±1.68)％、(2.20±0.93)％和(0.60±0.92)％，3个不同浓度青蒿琥酯作用相同时间后VEGFR-2表达率降低（均P＜ 0.05），相同浓度作用24与48 h间差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）。结论SHI-1细胞株高分泌VEGF，青蒿琥酯可下调VEGF分泌及VEGFR-2的表达，而对VEGFR-1表达的调节作用不显著。
