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盐生隐杆藻藻胆蛋白的分离纯化和特性研究
盐生隐杆藻的水溶性色素提取物经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow、羟基磷灰石和Sephacryl S-200柱层析,纯化出两种藻胆蛋白:藻蓝蛋白(C-PC)和别藻蓝蛋白(APC),纯度(A620/A2so)分别为5.5和5.O.紫外-可见分光光度计测得C-PC和APC的大可见吸收峰分别为617 nm和651 nm,其室温荧光发射峰分别为645 nm和664 nm.SDS-PAGE显示,C-PC和APC均有α和β亚基.C-PC的α和β亚基分子质量分别为15 667 u和18 197 u;APC的α和β亚基分子质量分别为14 894 u和17 378 u.根据SDS-PAGE推算,C-PC和APC单体的分子质量分别为33 864 u和32 272 u,质谱测得C-PC和APC单体的分子质量分别为38 014 u和36 432 u.经等电聚焦测定C-PC和APC的等电点分别约为4.6和4.8.氨基酸分析结果表明,c-PC和APC分别含有17种氨基酸.
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重组别藻蓝蛋白对小鼠H22肿瘤生长及COX-2、VEGF和PCNA表达的影响
目的 观察重组别藻蓝蛋白(rAPC)对接种H22细胞小鼠的肿瘤生长及环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,并初步探讨其可能的机制.方法 昆明小鼠随机分为5组(n=10),即模型组,rAPC低、中、高剂量组(25、50、100 mg·kg-1·d-1),环磷酰胺组(CY对照组).各组小鼠左前腋下皮下接种H22肝癌细胞,第2天除模型组外,其余4组分别以不同剂量的rAPC、CY灌胃, 15 d后处死,剥离出肿瘤,称质量,计算抑瘤率; 用免疫组化法测定肿瘤组织中COX-2、VEGF和PCNA的表达.结果 rAPC低、中、高剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较模型组缓慢,差异有显著性(F=8.926,q=3.794～7.684,P<0.05、0.01),其抑瘤率分别为25.2%、36.7%、43.1%.rAPC各剂量组COX-2、VEGF阳性表达均低于模型组(F=23.651、7.244,q=3.985～11.307,P<0.01); rAPC中、高剂量组PCNA 阳性表达较模型组显著减少(F=164.380,q=1.513～31.265,P<0.01).结论 rAPC可以抑制小鼠H22肿瘤的生长及COX-2、VEGF和PCNA的表达.
