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  • 用抑制性差减杂交法和基因芯片鉴定蚊虫抗药性和敏感性相关基因

    作者:田海生;朱昌亮;李秀兰;马磊;高晓红;吴观陵

    由于杀虫剂的广泛、大量和长期使用,媒介昆虫对杀虫剂逐步产生了抗药性(抗性).对媒介昆虫抗性的分子机理研究具有重要的理论意义和潜在的应用价值.抗药性和(或)敏感性相关基因的分离将为抗性分子机理的深入研究打下基础.近年来,国外研究者采用经典的"功能克隆法"克隆到一些抗药性相关基因.然而,在事先无目的蛋白或其相应基因定位的情况下分离这些基因是相当困难的.近建立的抑制性差减杂交法(suppression subtractive hybridization, SSH)这一"表型克隆"新策略,无需事先知道起作用基因的背景资料,仅凭表型直接分离基因,为抗性基因的分离提供了有效手段.本研究将SSH与具有高通量鉴定能力的基因芯片(gene chip)技术结合,极大地提高了相关基因的分离速度和效率,部分结果并经逆Northern(reverse northern)进行了进一步验证.

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