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Hedgehog信号通路对塞来昔布介导抗结肠癌效应的影响
目的 研究Hedgehog(Hh)信号通路对环氧合酶2抑制剂塞来昔布介导抗结肠癌效应的影响.方法 以胰腺癌PANC-1细胞为对照,采用MTT检测环巴胺20 μmol/L和塞来昔布80 μmol/L处理后的结肠癌HT-29、LoVo和HCT-116细胞存活率,ELISA法检测胞内胶质瘤相关癌基因同源物1 (GLI1)的含量变化.结果 环巴胺、塞来昔布均能抑制PANC-1细胞生长和GLI1的含量(P＜0.05或P＜0.01).环巴胺处理结肠癌细胞后发现,HT-29和LoVo细胞存活率、GLI1含量降低(P＜0.05或P＜o.01);其中,LoVo细胞的抑制作用更为显著,而HCT-116细胞生长、GLI1含量无明显变化(P＞0.05).塞来昔布处理结肠癌细胞后发现,HT-29和HCT-116细胞存活率、GLI1含量降低(P＜0.05或P＜0.01);其中,HCT-116细胞的抑制作用更为显著,而LoVo细胞生长、GLI1含量无明显变化(P＞0.05).结论 Hh信号在LoVo和HT-29细胞是有活性的,而且该信号对LoVo细胞恶性行为维持是必须的.塞来昔布抗结肠癌细胞的作用是有选择性的,可能是通过SMO非依赖的途径来发挥抗癌作用.
关键词： 结肠癌细胞 Hedgehog信号 塞来昔布 胶质瘤相关癌基因同源物1 -
干预Hedgehog信号对肾小管上皮细胞增殖细胞核抗原表达的影响
目的：探讨Hedgehog（HH）信号通路的活化和抑制对肾小管上皮细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法：根据干预措施将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E分为对照组、活化组（10μg/L Shh）和干预组（10μg/L Shh加5μmol/L环杷明）。细胞培养24 h后，细胞免疫荧光染色检测HH信号关键分子Ptch1、Smo和Gli1，以及细胞增殖标志物PCNA的表达，real-time RT-PCR检测Ptch1和Smo mRNA的表达。结果：免疫荧光染色显示，对照组细胞维持一定的增殖状态，HH信号活性较低，PCNA表达水平较低；当外源性重组蛋白Shh活化NRK-52E细胞24 h后，Smo和Gli1 mRNA和蛋白表达显著升高，Ptch1的表达显著下调，这提示Shh可激活HH信号（P＜0.05）。在此过程中，PCNA表达水平显著升高，NRK-52E细胞数量增加，同时伴随细胞形态的改变；在Shh的基础上加入环杷明干预后，HH信号被抑制（P＜0.05），PCNA表达下降，NRK-52E细胞增殖被抑制，出现凋亡或坏死。结论：HH信号与肾小管上皮细胞的增殖密切相关。通过药物调控HH信号的活化，可影响PCNA的表达，进而影响细胞增殖效应。
关键词： Hedgehog信号 环杷明 肾小管上皮细胞 增殖细胞核抗原 -
白藜芦醇对TGF-β1介导的肾小管上皮细胞表型转化和Hedgehog信号的影响
目的 探讨白藜芦醇(Res)对转化生长因子-β1(TGF-β 1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转化(EMT)的影响及其分子机制.方法 体外培养肾小管上皮细胞,分为对照组、诱导组(TGF-β 1∶5 μ g/L)、干预1组(TGF-β 1+ Res10 μ mol/ml)和干预2组(TGF-β 1+ Res100μ mol/ml).采用细胞免疫荧光和qRT-PCR技术检测EMT、细胞外基质和Hedgehog信号相关分子表达水平.结果 TGF-β 1作用NRK-52E细胞后,不仅促进其受体TGF-β 1R表达(P＜0.05),且肌成纤维细胞标志物(α-SMA)和基质成分Ⅲ型胶原的表达增加,上皮细胞标志物(E-cadherin)表达下降.应用Res干预后,不仅抑制甚至逆转了上述结果,且抑制了TGF-β1介导的MMP-2/TIMP-2比值下降(P＜0 05),促进基质成分降解.此外,Res也抑制TGF-β 1诱导的PCNA表达上调(P＜0.05),以及增殖相关的Hedgehog信号(Shh、Ptch1和Gli1)活化(P＜0.05).结论 Res可能通过拮抗Hedgehog信号来抑制TGF-β1所诱导的NRK-52E细胞增殖、EMT和细胞外基质累积.
关键词： 白藜芦醇 转化生长因子-β1 表型转化 肾小管上皮细胞 Hedgehog信号 -
Hedgehog和TGF-β/Smads信号通路与胰腺癌发生发展的关系
Hedgehog (HH)信号和TGF-β信号通路在肿瘤的发生发展中起着重要的作用,近年来不断有研究指出HH信号通路中的主要效应因子Gli2也是TGF-β/Smads信号通路的靶基因.HH信号通路的异常与胰腺癌的发生密切相关,而TGF-β通路中的信号异常也参与胰腺癌肿瘤的生长、侵袭和转移.该文就这2个信号通路及其与胰腺癌的关系的研究进展作一综述.
关键词： 胰腺肿瘤 Hedgehog信号 TGF-β信号 -
缺血再灌注对大鼠部分肝切除术后肝脏Hedgehog信号的影响
目的 观察缺血再灌注对大鼠部分肝切除术后肝脏Hedgehog (Hh)信号的影响.方法 切除肝脏左叶和中叶以建立SD大鼠部分肝切除模型.18只雄性SD大鼠随机均分为3组:假手术组(A)、部分肝切除术组(B)、部分肝切除术+缺血再灌注组(C).A、B和C组于术后48 h取血液和肝组织,检测血浆谷丙转氨酶(ALT)和肝组织细胞核抗原(Ki-67)、Sonic hedgehog(Shh),Indian hedgehog(Ihh)和脑胶质瘤相关的致癌基因2(Gli-2)的表达.结果 C组ALT浓度高于A和B组(P＜0.01),B组ALT浓度高于A组(P＞0.05).苏木素-伊红(HE)染色显示B组可见较多肝细胞脂肪变性和少数处于不同分裂期的肝细胞；C组可见较多肝细胞脂肪变性和多数处于不同分裂期的肝细胞.B、C组Ki-67、Shh和Ihh、Gli-2表达高于A组(P＜0.01),C组高于B组(P＜0.05).结论 大鼠部分肝切除术后Hh信号通路可能被激活,从而促进肝脏再生修复.肝脏缺血再灌注可能促进部分肝切除术后Hh信号通路的激活.
关键词： 部分肝切除术 缺血再灌注 Hedgehog信号 -
Hedgehog信号通路在食管癌中研究进展
Hedgehog信号通路在人类胚胎发育过程中发挥重要作用,可以调控细胞增殖和组织分化,大量研究表明,食管癌的发生、发展和异常激活的Hedgehog信号通路密切相关.本文从Hedgehog信号通路在食管癌的细胞增殖、血管形成、浸润转移等方面出发,将近年来Hedgehog信号通路和食管癌中发生、发展的研究进展进行报道.
关键词： Hedgehog信号 通路 食管癌 综述 -
旋转微重力细胞培养系统下Indianhedgehog转染兔BMSCs促进成软骨分化并抑制老化的实验研究
目的 探讨模拟微重力环境下,Indianhedgehog (IHH)基因过表达对兔BMSCs成软骨分化的影响.方法 取第2代兔BMSCs,分为旋转微重力细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)组和传统组2个大组,每个大组进一步分为3个亚组,即IHH基因腺病毒载体转染组(RCCS 1组和传统1组)、绿色荧光蛋白腺病毒载体转染组(RCCS 2组和传统2组)及空白对照组(RCCS 3组和传统3组).RCCS组细胞均在模拟微重力环境下进行成软骨细胞诱导分化;常规组在6孔板中进行常规细胞培养及成软骨细胞诱导分化.诱导分化过程中,检测IHH蛋白表达(ELISA法)及ALP活性;实时荧光定量PCR检测软骨及软骨肥大相关基因表达;Wertern blot法检测Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖(aggrecan,ANCN)蛋白表达;并取细胞爬片行甲苯胺蓝染色及膜联蛋白V(AnnexinV)-cy3免疫荧光染色观察.结果 转染后荧光显微镜下RCCS 1、2组可见明显绿色荧光,转染效率约95％.ELISA检测示,RCCS及传统1组IHH蛋白均明显高于2、3组(P＜0.05);传统1组各时间点ALP活性均高于传统2、3组(P＜0.05),RCCS 1组ALP活性仅于诱导分化3、7d稍高于RCCS 2、3组(P＜0.05).实时荧光定量PCR检测示,传统1组在诱导分化早期高表达Ⅱ型胶原、ANCN,但在后期高表达X型胶原、ALP及Annexin V(P＜0.05);RCCS1组在诱导分化各时期均高表达软骨相关基因Ⅱ型胶原、ANCN、SOX9,且低表达软骨肥大相关基因X型胶原、ALP及Annexin V(P＜0.05).Wertern blot法检测示,诱导21 d时传统1组Ⅱ型胶原蛋白表达量明显低于传统2、3组(P＜0.05);RCCS 1组各时间点Ⅱ型胶原、ANCN蛋白表达量均明显高于RCCS 2、3组(P＜0.05).甲苯胺蓝染色示,诱导21d时传统1组染色浅于传统2、3组,RCCS1组各时间点染色均明显深于RCCS 2、3组;Annexin V-cy3免疫荧光染色示,各时间点传统1组红色荧光均强于传统2、3组,RCCS各亚组红色荧光表达均较弱且组间无明显差异.结论 在模拟微重力环境下,IHH基因转染BMSCs可有效促进软骨生成,并抑制软骨老化或向成骨发展,适合软骨组织工程的需要.
