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慢病毒介导CD-TK融合基因转染神经干细胞后杀伤C6胶质瘤的研究
[目的]观察慢病毒介导的CD-TK融合基因转染神经干细胞(NSCs)对C6胶质瘤生长的抑制作用以及疗效.[方法]利用慢病毒介导的大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(CD)和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)融合基因转染NSCs,植入C6胶质瘤模型.用流式细胞仪技术检测C6胶质瘤生长凋亡情况.[结果]成功构建CD-TK基因转染NSCs模型.实验组坏死细胞(17.80%)、早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞(33.30%)较对照组增加.CDglyTK-NSC+GCV/5-Fc治疗组肿瘤体积为9.36±2.35mm3,小于其他处理组及对照组的肿瘤体积(P<0.05).[结论]转染NSCs的CD-TK基因对C6胶质瘤细胞有抑制作用,抗肿瘤效果明显,优于单一的自杀基因系统.
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腺病毒介导CD-TK融合基因对肾癌细胞的杀伤作用
肾癌是常见的泌尿系肿瘤,发病率仅次于膀胱肿瘤.自杀基因治疗在晚期肿瘤的综合治疗中发挥了重要作用.单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因/无环鸟昔(GCV)及大肠杆菌胞嘧啶脱胺酶(CD)基因/5-氟胞嘧啶(5-FC)系统治疗机制不同,联合可产生协同效应.本研究旨在探讨联合TK/GCV、ClD/5-FC系统在肾癌治疗中的价值.
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慢病毒介导CD-TK融合基因转染对神经干细胞体外增殖的影响
目的 探讨慢病毒介导胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)及胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase,TK)融合基因转染对神经干细胞体外增殖的影响.方法 原代培养新生Wistar大鼠室下区神经干细胞并鉴定,经传代纯化后,用CD-TK基因包装的慢病毒处理3~5 d.MTT实验检测神经干细胞增殖活性,免疫荧光技术检测转染后神经干细胞GFAP、NSE表达.结果 MTT结果显示CD-TK融合基因转染对神经干细胞增殖无影响(P>0.05).免疫荧光结果显示:神经干细胞Nestin标记阳性;CD-TK融合基因转染后,神经干细胞NSE及GFAP均表达阳性.结论 CD-TK融合基因转染对神经干细胞增殖无影响.