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慢病毒介导的人PLK1RNA干扰对食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制
目的 研究靶向人PLK1的RNA干扰对食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 介导PLK1 siRNA表达的重组慢病毒感染食管鳞癌细胞,通过荧光定量 PCR和Western blot 检测PLK1基因的干扰效率;应用裸鼠皮下移植瘤模型,进行慢病毒载体介导PLK1基因的RN干扰治疗,研究PLK1对体内食管鳞癌移植瘤生长的影响,并通过瘤组织免疫组化检测Caspase-3和CD31的表达及计算新生血管密度的方法,探讨PLK1影响移植瘤生长的相关机制.结果 介导PLK1 siRNA表达的重组慢病毒能明显抑制食管鳞癌细胞中PLK1 的表达及裸鼠体内移植瘤的生长.下调的PLK1可能通过调控Caspase-3的表达而诱导食管鳞癌细胞凋亡,通过抑制食管鳞癌的血管生成而抑制了食管鳞癌的恶性进展.结论 PLK1促进了食管鳞癌的恶性生长.PLK1有可能是治疗食管鳞癌的一个新靶点.
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过氧化氢对PC12细胞plk1基因表达的影响
目的 观察过氧化氢对体外培养的PC12细胞plk1基因表达的影响.方法 采用MTT法观察不同浓度过氧化氢对体外培养的PC12细胞作用6h后,对PC12细胞存活率的影响;Western-blot检测不同浓度过氧化氢作用后,PC12细胞plk1基因蛋白表达水平的变化.结果 与对照组比较,过氧化氢剂量依赖性降低PC12细胞的存活率,增强PC12细胞plk1基因蛋白的表达水平.结论 过氧化氢降低PC12细胞的增殖活力,其机制可能是通过增强Plk1蛋白表达水平来实现.
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原花青素对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的细胞周期调控机制
目的 观察原花青素对过氧化氢诱导体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤及细胞周期阻滞的保护作用,并探讨细胞周期调控基因c-Abl和plk1在其中的作用.方法 采用MTT法观察不同浓度原花青素对100μmol/L过氧化氢诱导6h的PC12细胞增殖率的影响.采用流式细胞仪检测原花青素对诱导的PC12细胞周期分布的影响,Western blot检测不同浓度原花青素对诱导的PC12细胞c-Abl和plk1基因蛋白表达水平的影响.结果 与对照组比较,过氧化氢显著降低PC12细胞增殖率(P＜0.01)、显著增高PC12细胞S期分布比例(P＜0.01)、显著诱导c-Abl和plk1基因蛋白水平表达增强(P＜0.01).与过氧化氢诱导组比较,原花青素剂量依赖性提高PC12细胞的增殖率(P＜0.01)、缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞(P＜0.01)、降低c-Abl和plk1基因蛋白水平的表达(P＜0.01).结论 原花青素对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能是通过缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞、降低细胞周期调控相关基因c-Abl和plk1的蛋白表达水平来实现的.
