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073 原花青素的生物活性及作用机制研究进展
葡萄中的原花青素是一种很强的抗氧化剂,具有抗脂质过氧化和清除自由基、降血压、降血脂、消炎、抗肿瘤、预防心血管疾病以及抗辐射、抗衰老、抗疲劳等功效.本文综述了国内外有关葡萄来源的原花青素的生理功能研究进展.
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020原花青素对血脂及氧化低密度脂蛋白的影响
原花青素是植物中广泛存在的多酚类天然抗氧化物质,具有多种生物活性、药理作用和临床疗效.本文综述了原花青素的化学结构及其植物来源,重点介绍原花青素对血脂及氧化低密度脂蛋白的影响.研究证实原花青素可以抑制LDL氧化,具有抗动脉粥样硬化、保护心脑血管功能的效果.
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葡萄籽抗氧化活性物质提取方法的研究进展
葡萄籽是葡萄酒生产过程中的副产物。葡萄的产量居各类水果的前列，随着葡萄产量的增长和酿造工业的发展，产生的葡萄皮渣废料占加工总量的20％～30％。葡萄籽是皮渣的主要组成部分。研究表明，葡萄籽中富含多酚类物质，含量高达50％～70％，包括原花青素、黄酮类、花色苷类、白藜芦醇等活性成分，有抗氧化、清除自由基等功能，具有较高营养和药用价值。目前，葡萄籽主要用于提取葡萄籽油。
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不同干燥方法对莲蓬中原花青素量的影响
本研究旨在考察不同干燥方法对莲蓬中原花青素量的影响,确定其适宜的干燥方法.方法:采集金华武义莲蓬,用不同的干燥法进行干燥,测原花青素量,比较差异.结果:莲蓬中的原花青素含量受干燥方法影响较大,其中晒干法影响大,阴干法次之,烘干法小.结论:提取前的干燥处理宜采用烘干法或阴干法,而不宜直接于日光下暴晒.
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原花青素对大鼠离体肝细胞的影响
原花青素是近年来我国广泛用于保健食品的原料,它以其优越的抗氧化特性而倍受保健食品生产厂家的青睐[1].它的抗氧化作用机制主要是由于清除自由基的功能[2].为从亚细胞水平探讨其作用机制,我们利用特异性标记内质网荧光分子探针--D-273(DIOC6),在ACAS575型激光共聚焦显微镜上,采用离体实验方法,观察了不同浓度的原花青素水溶液对肝细胞内质网的影响.
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原花青素对砷致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用研究
目的 探讨原花青素(PC)对As2O3所致雄性小鼠的生殖毒性的拮抗作用.方法 选用昆明种雄性小鼠60只,随机分配到对照组、As2O3组,PC组、砷+PC低、中、高剂量组；As2O3按4.0 mg/kg·bw染毒剂量灌胃；PC按100、200和400 mg/kg剂量灌胃；连续染毒5周后,取其睾丸、附睾检测生殖相关指标.采用2×2析因设计和单因素方差分析方法进行分析.结果 As2O3组小鼠体重(26.44±1.87)g、睾丸质量(0.219±0.022)g、睾丸指数0.832％±0.105％均低于对照组[(35.73±3.44)g,(0.252±0.034)g,(1.487％±0.398％),差异有统计学意义(P＜0.01)].As2O3与PC对小鼠体重(F=60.480,P＜0.001)、睾丸脏器指数(F=948.611,P＜0.001),精子计数(F=87.322,P＜0.001),精子畸形率(F=171.304,P＜0.001)交互作用有统计学意义,对睾丸质量的交互作用无统计学意义(F=2.398,P=0.130).As2O3+ PC中、高剂量组的体重、睾丸质量、精子计数均高于As2O3组,精子畸形率低于As2O3组.结论 原花青素对砷致雄性小鼠生殖毒性具有拮抗作用,高剂量拮抗作用效果明显.
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黑果枸杞原花青素酶法提取工艺优化及对线虫毒性和寿命影响机制研究
目的 对黑果枸杞原花青素(Lycium ruthenicum Murray,简称原花青素)提取工艺进行了酶法优化,并以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称线虫)作为模式生物,研究黑果枸杞原花青素对线虫的急性毒性效应,以及延长寿命的功效及其初步机制,为原花青素用于功能性保健品开发利用奠定实验基础.方法 采用纤维素酶法结合正交分析优化黑果枸杞原花青素的提取工艺;采用线虫急性毒性试验、寿命实验及氧化应激和热应激实验研究其毒性、寿命影响及其可能机制.结果 正交分析表明,黑果枸杞原花青素高得率为9.47 mg/g时的佳提取工艺条件为酶解液pH值为3.4,酶解温度30℃,酶解时间30 min,酶浓度4％.急性毒性实验结果表明,浓度为50和300 μg/ml的原花青素作用24 h对线虫均无急性毒性效应.线虫寿命实验表明,持续饲喂50 μg/ml原花青素的实验组,线虫平均寿命与对照组相比延长了22.88％(P＜0.01).氧化应激与热应激条件下,持续饲喂50 μg/ml原花青素的实验组与对照组相比,平均寿命分别延长了44.28％ (P ＜0.05)与24.46％(P＜0.01).结论 酶法提取工艺优化后,黑果枸杞原花青素的得率为9.47 mg/g.毒性和功效实验结果表明,黑果枸杞原花青素(浓度≤300μg/ml)对线虫没有急性毒性作用,原花青素(50 μg/ml)可延长线虫寿命,其功效可能是通过提高线虫的氧化应激及热应激能力而实现的.
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原花青素对氟致雄性小鼠精子数和畸形的改变
目的 研究原花青素对氟致雄性小鼠的生殖毒性是否具有交互作用.方法 将40只雄性小鼠随机分为4组,即对照组、氟化钠组(NaF,20 mg/kg)、原花青素组(GSP,200 mg/kg)、NaF(20 mg/kg)+ GSP(200 mg/kg)组,灌胃5周.颈椎脱臼处死小鼠,分别采集附睾及睾丸样本,检测小鼠睾丸脏器系数、精子计数和精子畸形率.结果 各组小鼠体重及睾丸脏器系数比较差异无统计学意义(P ＞0.05);NaF组精子数量低于对照组(P＜0.05),GSP组和NaF+ GSP组的精子数量均高于NaF组(P ＜0.05);NaF组精子畸形率高于对照组(P＜0.05),GSP组和NaF+ GSP组的精子畸形率均低于NaF组(P ＜0.05);GSP对NaF染毒雄性小鼠精子数量和精子畸形率存在拮抗作用(P＜0.05).结论 原花青素对氟化钠导致的雄性小鼠生殖毒性具有一定的拮抗作用.
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原花青素拮抗砷诱导人肺上皮细胞氧化损伤的研究
目的 探讨原花青素拮抗砷诱导支气管上皮细胞氧化损伤作用,为揭示原花青素拮抗砷毒性作用提供参考.方法 以BEAS-2B细胞为研究对象,分别给予不同剂量As2O3(0、5、10和20μmol/L)、葡萄紫原花青素(GSPE)(0、25和50mg/L)在24和48h时,利用试剂盒检测氧化应激相关指标[活性氧(ROS)、脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)、巯基(-SH)、超氧化物气化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)]的表达.采用一般线性模型分析原花青素拮抗砷效应的交互作用.结果 与砷染毒组相比,在24和48h均发现As2O3+GSPE50mg/L组的ROS、MDA和LPO的水平降低(P＜0.05),T-AOC、GSH、GSH-Px、CAT、-SH、SOD活性和水平增加(P＜0.05),As2O3+ GSPE25mg/L组的GSH、T-AOC和SOD升高(P＜0.05).结论 在一定浓度范围内,GSPE可以有效地拮抗砷所致的氧化损伤,且随着剂量增加,抗氧化损伤效果提高.
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原花青素对氯氰菊酯致小鼠小脑组织氧化损伤及核转录因子NF-E2相关因子2、血红素氧合酶-1表达的影响
目的 研究原花青素(proanthocyanidin,PC)对氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)所致小鼠小脑组织氧化损伤及核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 将50只雄性昆明小鼠随机分为5组:双蒸水对照组,染毒组(以CYP 10 mg/kg进行灌胃),PC保护组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(分别以50、100和200mg/kg PC预先给小鼠灌胃,再以10 mg/kg CYP染毒).连续3周经口灌胃,之后颈椎脱臼法处死小鼠,检测小脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫组化分析Nrf2在小脑组织中的表达;RT-PCR检测Nrf2及HO-1 mRNA的表达.结果 染毒组小鼠小脑组织MDA含量升高,GSH-Px、T-SOD、CAT活性降低;Nrf2胞核阳性细胞比例增加;Nrf2及HO-1 mRNA表达增加,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).与染毒组相比,PC保护组MDA水平降低,T-SOD、GSH-Px、CAT活性增加;胞核Nrf2阳性细胞逐渐减少;Nrf2及HO-1 mRNA表达下降,与染毒组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 CYP暴露可诱导小鼠小脑组织氧化损伤,使Nrf2由胞质向胞核转位,同时诱导下游靶基因HO-1的表达;抗氧化剂PC能够使活化的Nrf2及HO-1mRNA表达回调至基础水平,从而拮抗CYP所致的氧化损伤.
关键词： 原花青素 氯氰菊酯 NF-E2相关因子2 血红素氧合酶-1 -
原花青素对小鼠乙醇性肝损伤的保护作用机制
目的 研究原花青素对乙醇导致肝脏损伤的保护作用机制.方法 将昆明种小鼠分为正常对照组、乙醇对照组、原花青素低剂量组(100mg/kg)和高剂量组(300mg/kg),观察各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)等指标水平,并采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织Cu,Zn-SOD和toll样受体4(TLR4)的mRNA水平.结果 原花青素低、高剂量组与乙醇对照组比较,ALT、MDA、ROS明显降低(P＜0.01),SOD明显升高(P＜0.01),并可使cu,Zn-SOD mRNA的表达上调和TLR4 mRNA的表达下调.结论 原花青紊对小鼠乙醇性肝损伤的保护作用与增强Cu,Zn-SOD的表达、抑制TLR4的表达有关.
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原花青素对高脂饮食大鼠胸主动脉壁过氧化物酶增殖激活受体γ及核转录因子-κB途径的影响
目的 观察葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对高脂饮食大鼠胸主动脉壁过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)mRNA表达及核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法 雄性SD大鼠32只,随机分为4组:对照组、高脂组、吡格列酮组、原花青素组.每组8只,其中吡格列酮组为阳性对照组.对照组饲基础饲料,其他3组饲高脂饲料.各组在饲喂饲料的同时,灌胃给相应的干预剂,吡格列酮和原花青素灌胃量分别是10mg/(kg·d)、100mg(kg·d),吡格列酮组和高脂组灌蒸馏水.在0周、3周、6周空腹尾静脉采血,测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量.实验期末,取大鼠胸主动脉组织,保存于-70℃.运用RT-PCR检测PPARγ的mRNA表达水平,EMSA检测NF-κB活性.结果 (1)高脂组较对照组大鼠血清TC、TG水平含量明显升高(P<0.05).原花青素组和吡格列酮较高脂组血清TG、TC的含量显著降低(P<0.05),原花青素组与吡格列酮组、对照组间差异无显著性.(2)高脂组与对照组相比,PPARγmRNA表达显著降低(P<0.05),胸主动脉壁NF-κB活性明显升高.(3)吡格列酮组与高脂组比较,胸主动脉壁PPARγmRNA表达水平升高(P<0.05).(4)原花青素组与高脂组比较,胸主动脉壁PPARγ mRNA表达水平明显升高(P<0.05),NF-κB活性显著降低.结论 原花青素具有预防血清TG、TC升高的作用;原花青素能通过预防高脂状态下大鼠胸主动脉壁PPARγ mRNA表达下调,抑制NF-κB的激活.
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葡萄籽原花青素抗LDL氧化修饰作用的研究
目的探讨葡萄籽原花青素(GSPE)抗LDL氧化修饰的作用.方法 15只雄性新西兰大白兔随机分为正常对照(A)组(饲喂标准颗粒饲料)、高脂模型(B)组(饲喂含1%胆固醇的颗粒饲料)、GSPE预防干预(C)组(饲喂含1%胆固醇和1%GSPE的颗粒饲料).于实验开始前1天和实验后第1、2、4、8、12周末取空腹血,检测血浆氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和血清丙二醛(MDA)水平.所有数据经SAS 8.2统计分析.结果与B组比较,C组ox-LDL含量在8周末明显降低(P＜0.0001)直至实验结束;MDA含量在1周后明显降低(P＜0.01),在8周末差异更加明显(P＜0.0001)直至实验结束.结论 GSPE可通过阻止LDL氧化修饰的作用而具有抗动脉粥样硬化作用.
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葡萄籽提取物原花青素调节血脂作用及机理研究
为研究葡萄籽提取物原花青素调节血脂的效果,选用雄性健康成年SD大鼠,观察原花青素对高脂血症大鼠血清脂质的影响.实验根据大鼠体重、血脂水平进行随机分组,设正常对照组、高脂饲料对照组、原花青素低、中、高剂量组(分别为25、100、150 mg/kg BW).受试物每天经口灌胃给予.6周末测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LACT)活性,同时测定肝脏TC、TG,粪总胆汁酸(TAB)的排出量.结果显示:原花青素各组与高脂饲料对照组比较,大鼠血清TC、TG水平降低,差异有显著性(P<0.05),原花青素使高脂大鼠血清TC水平降低了18.1%(高剂量);使血清TG水平降低了34.4%以上.原花青素对高脂大鼠肝脏胆固醇、甘油三酯有显著的降低作用(P<0.01).原花青素对高脂大鼠血清LCAT活性有升高的作用(P<0.05).实验各组粪胆汁酸每日排出量高于高脂饲料对照组,差异有显著性(P<0.05).提示原花青素有降低高脂大鼠血脂水平的作用.
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组合体外与临床测试评价植物抗氧化剂抗老化功效
目的 基于非动物测试理念,研究植物抗氧化剂复配后的皮肤抗老化功效.方法 体外培养HaCaT角质细胞,紫外线照射诱发氧化损伤模型,分别加入白藜芦醇、原花青素和二者复配物,用MTT比色法、荧光素标记法和ELISA法检测细胞活性、活性氧簇自由基(ROS)、超氧化物岐化酶(SOD)、细胞周期及细胞凋亡的变化.对含两种植物原料的眼霜配方进行鸡胚尿囊膜血管试验(CAMVA)和牛角膜混浊渗透试验(BCOP)的组合测试评价其眼刺激性.选择平均年龄40岁的女性志愿者25名,眼部连续使用该眼霜60 d,于使用产品的第0、30和60 d分别检测皮肤的水份、水份流失、弹性和肤色等皮肤老化相关指标.结果 白藜芦醇-原花青素复配的植物抗氧化剂可明显缓解紫外线造成的HaCaT细胞氧化损伤,SOD水平明显升高(P＜0.001),ROS荧光强度、细胞凋亡率及S期细胞比例均明显降低(P ＜0.001),细胞修复作用强于单独作用.经过替代方法组合评价其安全性后进行临床志愿者测试,证明皮肤保湿、弹性和皮肤颜色等指标得到改善.结论 白藜芦醇和原花青素两种植物抗氧化剂复配使用可有效减少皮肤氧化应激和明显改善皮肤性能.
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新疆葡萄中3种生物活性物质的含量分析
为开发利用新疆葡萄,分析了新疆葡萄中生物活性物质的构成及其含量.采用超声法和回流法分别提取葡萄皮、籽中的齐墩果酸、白藜芦醇和原花青素,用高效液相色谱法和比色法分别测定葡萄皮、籽中齐墩果酸、白藜芦醇和原花青素的含量.葡萄中齐墩果酸主要存在于葡萄皮中,含量可高达1%左右,符合工业化提取要求;地产葡萄品种的齐墩果酸含量相时高于欧洲引进品种;齐墩果酸含量比较:人工发酵葡萄皮＞自然发酵葡萄皮＞新鲜葡萄皮.葡萄皮白藜芦醇的含量高于葡萄籽;欧洲引进葡萄品种白藜芦醇含量相对高于地产葡萄;白藜芦醇含量比较:人工发酵葡萄皮＞自然发酵葡萄皮＞新鲜葡萄皮＞陈旧葡萄皮.葡萄籽原花青素含量高于葡萄皮;地产与欧洲引进葡萄品种的原花青素含量比较接近;原花青素含量比较:新鲜葡萄籽＞自然发酵葡萄籽＞人工发酵葡萄籽.由结果可以看出新疆葡萄富含齐墩果酸、白藜芦醇及原花青素等多种具有营养保健功能的生物活性物质.
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原花青素的抗氧化活性研究进展
本文综述了近几年对于原花青素抗氧化作用的研究概述,尤其对原花青素的抗脂质过氧化和清除自由基作用、预防白内障作用、保护细胞作用、抗衰老作用抗炎活性、抗肿瘤作用等药理作用进行了讨论,并对其化学结构,生物活性及临床应用进行了概述.
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保健食品对辐射危害有辅助保护功能方法验证研究
目的 为研究《保健食品检验与评价技术规范-2003》中"对辐射危害有辅助保护功能"的新的评价程序和检验方法是否适用于保健食品,特进行验证研究.方法 使用两个分别以茶多酚及原花青素为主要功效成分的受试物,按照技术规范对其进行评价.结果 ①在按照新方法进行的研究中,两个受试物在多项实验中具有逆转辐射造成的损伤的作用.②按照新的技术规范中的方法建立辐射损伤模型,在大部分的系统中均可成立.结论 《保健食品检验与评价技术规范-2003》适用于判定受试物是否对辐射危害有辅助保护功能.
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原花青素对氧化应激致大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究
目的 观察原花青素(proanthoeyanidin,PC)对氧化应激(oxidative stress)致大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支(LAD) 30 min,复灌3h的方法,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,对照组、剂量组分别给予生理盐水、PC,阳性对照组给予银杏叶片(48mg/kg),观察PC对大鼠心肌梗死面积、心肌细胞凋亡及心肌酶学的影响.结果 与假手术组比较,模型对照组大鼠的心肌梗死面积明显增大、心肌细胞凋亡指数与心肌酶学各指标均发生显著变化,差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型对照组比较,阳性对照组、PC剂量组降低了心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的心梗面积、心肌细胞凋亡、减少心肌细胞磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)释放、心肌组织黄嘌呤氧化酶(XO)活性及血清丙二醛(MDA)含量,提高了血清一氧化氮(NO)水平、血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及谷胱甘肽(GSH)含量,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),并存在剂量反应关系.结论 PC对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠具有抗氧化应激作用,能够减少心肌细胞凋亡,从而减少心肌梗死面积,并存在剂量反应关系.
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化学发光法测定葡多酚对羟和超氧阴离子自由基的清除
葡多酚,国外多称原花青素(grape procyanidins,GPC),据国外研究报道GPC具有抗氧化、抗自由基损伤等多种生物学功效.我们采用化学发光技术,检测了GPC对羟自由基(*OH)和超氧阴离子自由基(O@2)的直接消除作用.一、材料与方法1.葡多酚:取新鲜葡萄籽晾干粉碎,经石油醚脱脂后,用乙醇浸提并纯化干燥所得,纯度>99.9%.标准品由日本岛田株式会社提供.2.GPC对羟自由基(*OH)的清除试验: 采用Fenton羟自由基产生体系和依赖鲁米诺的化学发光技术进行.在反应体系中加入0.1 mmol/L鲁米诺0.8 ml、GPC样品0.02 ml、3%H2O2溶液和0.2 mmol/L FeSO4溶液各0.02 ml立即混匀测定发光强度值.共设7个剂量组,每个剂量做5个平行管,各管自由基含量以其化学发光强度值表示,计算GPC对*OH的清除率和50%清除浓度.
