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泛素羧基末端水解酶 L1在氟西汀抑制大鼠肺动脉高压中的作用
目的研究泛素羧基末端水解酶 L1(UCH-L1)在氟西汀抑制野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压中的作用。方法用野百合碱(60 mg·kg -1)建立肺动脉高压大鼠模型,用低剂量(2 mg·kg -1·d -1)或高剂量(10 mg·kg -1·d -1)的氟西汀进行干预,观察各组大鼠血流动力学,肺组织与肺小动脉形态,以及 UCH-L1蛋白表达与核因子κB(NF-κB)核转位的变化。结果野百合碱诱导大鼠肺动脉压力升高、肺动脉重构、肺组织炎症反应、肺组织 UCH-L1表达减少以及 NF-κB 活性增加。氟西汀剂量依赖地抑制这些变化。但是各组之间大鼠肺动脉 UCH-L1蛋白表达差异无显著性。结论氟西汀抑制野百合碱诱导的大鼠肺组织炎症反应,与上调的UCH-L1蛋白抑制 NF-κB 活性有关。
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pEGFP-N1-UCH-L1重组质粒的构建
目的构建 pEGFP-N1-UCH-L1重组质粒,并进行鉴定。方法提取 Wistar 乳鼠大脑组织总 RNA,逆转录合成cDNA,经 PCR 扩增 UCH-L1基因,定向克隆至载体 pEGFP-N1,构建重组质粒,经测序进行鉴定。结果 UCH-L1基因重组质粒经测序鉴定证明构建正确。结论成功构建了 UCH-L1基因重组质粒,可用于神经细胞转染,进行后续研究。
关键词: 泛素羧基末端水解酶 L1 pEGFP-N1载体 重组质粒