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GTFIIF2文献资料
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人通用转录因子GTFIIF2表达与定位
目的构建不同标签的人通用转录因子 IIF多肽2(GTFIIF2)表达载体，观察其细胞内的表达和定位。方法设计GTFIIF2的引物，以全长cDNA序列为模板，利用聚合酶链式反应技术扩增 GTFIIF2全长序列，构建 pcDNA3.1-FLAG-GTFIIF2和 pCDGFP-GTFIIF2质粒，利用 Western blot法和免疫荧光法检测其在细胞表达与定位；构建GST-GTFI-IF2质粒，转化到BL21菌株，用IPTG诱导剂诱导融合蛋白表达，用SDS-PAGE分析诱导表达情况。结果免疫荧光法检测GTFIIF2蛋白集中分布在COS7细胞核中，在细胞质没有分布；pcDNA3.1-FLAG-GTFIIF2和pCDGFP-GTFIIF2质粒能够在HEK293T细胞中有效表达；GST-GTFIIF2在BL21菌株中很好的诱导表达。结论 GTFIIF2在 COS7细胞、HEK293T细胞和BL21感受态细胞中能有效表达，为更好地了解GTFIIF2蛋白在细胞内的功能提供一定的研究基础。
